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BFU2014-54754-P

Financiado

REGULACION POR ACETILACION DEL FACTOR DE SUPERVIVENCIA DE LAS NEURONAS MOTORAS:...

REGULACION POR ACETILACION DEL FACTOR DE SUPERVIVENCIA DE LAS NEURONAS MOTORAS: SU IMPORTANCIA EN LA BIOGENESIS DE SNRNPS Y EN EL ENSAMBLAJE DE CUERPOS NUCLEARES DE CAJAL EL CUERPO NUCLEAR DE CAJAL ("CAJAL BODY", CB) ESTA IMPLICADO EN LA BIOGENESIS DE SNRNPS Y U7 SNRNPS REQUERIDAS PARA EL SPLICING DE LOS PRE-MRNAS Y PARA EL PROCESAMIENTO ESPECIFICO DE LOS PRE-MRNAS DE LAS HISTONAS, LA PROTEINA DE S... ver más

01/01/2014

UNICAN

115K€

Presupuesto del proyecto: 115K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE CANTABRIA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 469

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2014-01-01

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Participantes

UNICAN

Lider

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE CANTABRIA

Total investigadores 469

Presupuesto del proyecto 115K€

Descripción del proyecto EL CUERPO NUCLEAR DE CAJAL ("CAJAL BODY", CB) ESTA IMPLICADO EN LA BIOGENESIS DE SNRNPS Y U7 SNRNPS REQUERIDAS PARA EL SPLICING DE LOS PRE-MRNAS Y PARA EL PROCESAMIENTO ESPECIFICO DE LOS PRE-MRNAS DE LAS HISTONAS, LA PROTEINA DE SUPERVIVENCIA DE LAS NEURONAS MOTORAS (SMN) ES UN COMPONENTE ESENCIAL DEL CB QUE PARTICIPA DIRECTAMENTE EN LAS ETAPAS CITOPLASMATICA Y NUCLEAR DE LA BIOGENESIS DE SNRNPS Y U7 SNRNPS Y EN EL ENSAMBLAJE DE CBS, ADEMAS DE NUCLEAR OTROS COMPLEJOS DE RNPS REQUERIDOS PARA EL TRANSPORTE AXONAL DE MRNAS, SMN ES VITAL PARA LA SUPERVIVENCIA DE LOS ORGANISMOS ANIMALES Y SU DEFICIT PRODUCE LA ATROFIA MUSCULAR ESPINAL, CARACTERIZADA POR LA DEGENERACION DE LAS MOTONEURONAS ESPINALES, Y TAMBIEN AFECTA A OTRAS ENFERMEDADES DE LA MOTONEURONA,EN EL PRESENTE PROYECTO PRETENDEMOS ESTUDIAR EL EFECTO DE DOS MODIFICACIONES POSTRADUCCIONALES (PTMS) DE LA SMN, LA SUMOILACION Y ESPECIALMENTE LA ACETILACION, EN LA BIOGENESIS DE DIFERENTES SNRNPS, EN EL ENSAMBLAJE MOLECULAR DE CBS Y OTROS CUERPOS NUCLEARES Y EN EL RECLUTAMIENTO DE LA SMN EN GRANULOS DE ESTRES (SGS), RECIENTEMENTE HEMOS DEMOSTRADO QUE LA SMN SE CONJUGA CON SUMO1 Y POSEE UNA SECUENCIA SIM-LIKE (SUMO INTERACTING MOTIF-LIKE) EN EL DOMINIO TUDOR DE LA PROTEINA QUE ES CLAVE PARA SUS INTERACCIONES MOLECULARES Y PARA LA FORMACION DE CBS (TAPIA ET AL,, 2014), ADEMAS, NUESTROS RESULTADOS PRELIMINARES NO PUBLICADOS NOS HAN PERMITIDO DEMOSTRAR QUE LA SMN SE ACETILA POR LA ACETILTRANFERASA CBP Y CARACTERIZAR A LA LISINA K119 COMO LA PRINCIPAL DIANA DE LA ACETILACION, EN EL PROYECTO UTILIZAREMOS CELULAS MCF7 Y 293T TRANSFECTADAS CON CONSTRUCCIONES DE GFP-SMNWT (CONTROL) Y CON LA MUTACION GFP-SMN-K119R, COMO MODELO DE HIPOACETILACION, PARA ESTIMULAR LA ACETILACION EN ESTOS MODELOS CELULARES UTILIZAREMOS EL TRATAMIENTO CON TRICOSTATINA A O LA COTRANSFECCION CON HA-CBP, PRETENDEMOS ANALIZAR LOS EFECTOS DEL ESTADO DE ACETILACION DE LA SMN SOBRE I) LA BIOGENESIS DE SNRNPS Y U7 SNRNPS, II) EL ENSAMBLAJE MOLECULAR DE CBS Y SGS, III) LA LOCALIZACION SUBCELULAR Y CINETICA MOLECULAR DE LA SMN, IV) LA VIDA MEDIA DE LA PROTEINA Y V) LA ACTIVIDAD TRANSCRIPCIONAL, PARA ELLO SE UTILIZARAN TECNICAS DE MICROSCOPIA CONFOCAL Y ELECTRONICA, ESTUDIOS EN CELULAS VIVAS QUE EXPRESAN GFP-SMN, ENSAYOS DE INMUNOPRECIPITACION Y WESTERN BLOTTING, ANALISIS CON ESPECTROMETRIA DE MASAS UTILIZANDO EL PROCEDER DE "GFP-BINDER", ENSAYOS DE TRANSCRIPCION Y REPLICACION IN SITU Y PCR CUANTITATIVA PARA DETERMINAR NIVELES DE EXPRESION DE TRANCRITOS QUE CODIFICAN SMN E HISTONAS NUCLEOSOMALES, INCLUYENDO H2AX IMPLICADA EN LA RESPUESTA AL DAÑO EN EL DNA, ADEMAS, EL EFECTO DE LA ACTIVACION DE LA ACETILACION SOBRE LA LOCALIZACION DE LA SMN, BIOGENEIS DE CBS Y ACTIVIDAD TRANSCRIPCIONAL SERA VALIDADO EN RATONES TRATADOS CON TSA, EN ESTE MODELO ANIMAL SE ESTUDIARAN LOS EFECTOS DE LA ACETILACION SOBRE LAS MOTONEURONAS ESPINALES, LA PRINCIPAL DIANA DE LA PATOLOGIA HUMANA EN LOS CUADROS QUE CURSAN CON DEFICIT DE SMN, FINALMENTE, CONSIDERMOS QUE ESTE PROYECTO DEBE CONTRIBUIR AL CONOCIMIENTO DE LA REGULACION FUNCIONAL DE LA SMN Y PLANTEAR LA IMPORTANCIA POTENCIAL DE LAS PTMS DE LA SMN EN LA FISIOPATOLOGIA MOLECULAR DE CUADROS NEURODEGENERATIVOS CAUSADOS POR UN DEFICIT FUNCIONAL DE SMN, CUERPO NUCLEAR DE CAJAL\SMN\ACETILACIÓN\SNRNPS\U7 SNRNPS\ATROFIA MUSCULAR ESPINAL

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