Descripción del proyecto
ESTE PROYECTO SE DIRIGE A LA INVESTIGACION DE LA BASE ESTRUCTURAL DE LA FUNCION DE LA FOSFOFRUCTOKINASA (PFK) DE MAMIFEROS, EL EXAMEN DE LA TRASCENDENCIA FUNCIONAL DE SU INTERACCION CON CAVEOLINAS Y EL ESTUDIO DE LA REGULACION DE SU EXPRESION GENICA EN RESPUESTA A GLUCOSA, EL PROYECTO ABARCARA LOS SIGUIENTES OBJETIVOS:1, ANALISIS FUNCIONAL DE LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE PFK-M, SUPONDRA LA PRODUCCION Y CARACTERIZACION DE TETRAMEROS HIBRIDOS DE PFK-M COMPUESTOS POR SUBUNIDADES CON SITIOS LIGANTES ALTERADOS Y SUBUNIDADES SALVAJES PARA ANALIZAR LA TRASCENDENCIA FUNCIONAL DE LA DIFERENTE CONFORMACION DE LOS COMPONENTES DEL OLIGOMERO, EL EXAMEN ESTRUCTURAL DE TETRAMEROS MUTANTES Y SALVAJES MEDIANTE MICROSCOPIA ELECTRONICA Y LA LOCALIZACION DEL SITIO ALOSTERICO PARA AMP,2, MODULACION DE LA PFK DE MAMIFEROS MEDIANTE ASOCIACION CON CAVEOLINAS, SE INVESTIGARA LA IMPLICACION FUNCIONAL PARA PFK-M DE LA INTERACCION CON CAVEOLINAS (CAV-3 Y CAV-1) OBTENIDAS COMO PROTEINAS RECOMBINANTES E INCORPORADAS A MEMBRANAS LIPIDICAS RECONSTITUIDAS Y SE ANALIZARA LA INFLUENCIA DE METABOLITOS REGULADORES Y LOS REQUERIMIENTOS ESTRUCTURALES Y FUNCIONALES DE PFK-M PARA ESTA ASOCIACION,3, CONTROL DE LA EXPRESION GENICA DE PFK DE MAMIFEROS EN REPUESTA A GLUCOSA, SE ESTUDIARA A NIVEL DEL GEN PFK-L Y COMPRENDERA EL AISLAMIENTO DE SU REGION PROMOTORA, LA IDENTIFICACION DE LAS SECUENCIAS REGULADORAS IMPLICADAS EN EL EFECTO DE GLUCOSA Y EL ANALISIS DE LOS POSIBLES FACTORES DE TRANSCRIPCION QUE MEDIAN EL PAPEL DEL AZUCAR SOBRE LA EXPRESION DE ESTE GEN EN CELULAS PANCREATICAS β, Fosfofructikinasa\caveolinas\estructura de proteínas\interacciones proteicas\regulación alostérica\glicolisis\expresión génica\respuesta a glucosa\células pancreáticas beta