Descripción del proyecto
PHOTOBACTERIUM DAMSELAE SUBSP, PISCICIDA Y VIBRIO HARVEYI SON DOS BACTERIAS PATOGENAS QUE LIMITAN EL DESARROLLO DEL CULTIVO DEL LENGUADO (SOLEA SENEGALENSIS), UNA DE SUS ESPECIES HOSPEDADORAS, PARA COMBATIR LA ENFERMEDAD SE ESTAN UTILIZANDO DISTINTOS METODOS, ENTRE LOS QUE SE INCLUYEN EL USO DE ANTIBIOTICOS Y LA ADMINISTRACION DE VACUNAS, EL USO DE ANTIBIOTICOS PRODUCE CONTAMINACION DE LAS AGUAS Y DE LOS TEJIDOS DEL PEZ, ADEMAS DE GENERAR RESISTENCIAS A LARGO PLAZO, EL USO DE VACUNAS, FUNDAMENTALMENTE BASADAS EN EL USO DE CELULAS INACTIVADAS, SOLUCIONA ESTOS DOS PROBLEMAS, PERO NO HA EVITADO LA APARICION DE BROTES EPIDEMICOS Y SU GRADO DE PROTECCION DESAPARECE A LOS POCOS MESES, POR LO QUE LAS BAJAS CAUSADAS POR LOS PATOGENOS SIGUE SIENDO ALTAS, POR ELLO SE HACE NECESARIO EL ESTUDIO DE METODOS ALTERNATIVOS COMO MEDIDA PARA CONTROLAR LA APARICION DE ENFERMEDADES EN LAS PISCIFACTORIAS, EL USO DE PROBIOTICOS CON CAPACIDAD INMUNOMODULADORA DEBE SER UNA OPCION A ESTUDIAR, LOS PROBIOTICOS, AL COLONIZAR LAS SUPERFICIES EXTERNAS E INTERNAS DEL PEZ PUEDEN ESTIMULAR LA PRODUCCION DE ANTICUERPOS ESPECIFICOS, DE TAL FORMA QUE SI ESTOS PROBIOTICOS MANTIENEN SEMEJANZAS ESTRUCTURALES CON LOS PATOGENOS ESTUDIADOS, PODRIAN GENERAR REACCIONES CRUZADAS CONTRA ESTOS PATOGENOS, DE ESTA FORMA ESTOS PROBIOTICOS HARIAN LA FUNCION DE VACUNAS VIVAS, POR ELLO ESTE TRABAJO TIENE COMO OBJETIVO LA SELECCION Y USO DE BACTERIAS PROBIOTICAS CON CAPACIDAD DE ACTIVACION DE LA RESPUESTA INMUNITARIA DE LENGUADOS CULTIVADOS, CONFIRIENDO PROTECCION FRENTE A INFECCIONES CAUSADAS POR V, HARVEYI Y P, DAMSELAE SUBSP, PISCICIDA, EN UN PRIMER PASO SE IDENTIFICARAN LOS ANTIGENOS DE V, HARVEYI Y P, DAMSELAE SUBSP, PISCICIDA INVOLUCRADOS EN LA ACTIVACION DE LA RESPUESTA INMUNITARIA ESPECIFICA EN LOS PECES, PARA ELLO SE INOCULARAN PECES CON LOS PATOGENOS PARA OBTENER ANTISUERO CON LOS QUE REALIZAR ENSAYOS ELISA Y WESTERN BLOT DE UNA Y DOS DIMENSIONES, UTILIZANDO ANTIGENOS BACTERIANOS DE LOS PATOGENOS, PARALELAMENTE SE REALIZARA UNA SELECCION DE BACTERIAS POTENCIALMENTE PROBIOTICAS AISLADAS DEL MEDIO MARINO Y DE PECES SANOS, TANTO SALVAJES COMO CRIADOS EN PISCIFACTORIAS, LA PRIMERA SELECCION SE REALIZARA EN FUNCION DE LA CAPACIDAD DE ESTAS BACTERIAS DE PRODUCIR BACTERIOCINAS FRENTE A LAS CEPAS PATOGENAS UTILIZADAS, EN UNA SEGUNDA SELECCION SE BUSCARAN PROBIOTICOS QUE COMPARTAN ANTIGENOS HOMOLOGOS A LOS PRESENTES EN LAS BACTERIAS PATOGENAS ESTUDIADAS, UNA VEZ COMPROBADA SU INOCUIDAD, LOS PROBIOTICOS SELECCIONADOS SE ADMINISTRARAN A LOS PECES POR VIA ORAL Y BAÑO PARA COMPROBAR SI ESTIMULAN LA PRODUCCION DE ANTICUERPOS FRENTE A ESTOS ANTIGENOS COMUNES, DE TAL FORMA QUE LOS PECES PUEDAN QUEDAR PROTEGIDOS FRENTE A POSIBLES BROTES EPIDEMICOS, PARA ELLO SE UTILIZARAN TANTO LAS TECNICAS ELISA, WESTERN BLOT Y EXPRESION PROTEICA DE LOS SUEROS DE LOS PECES POR ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL, COMPLEMENTARIAMENTE SE REALIZARAN OTRAS PRUEBAS PARA COMPROBAR LA ACTIVACION DE LA RESPUESTA INMUNITARIA INESPECIFICA, FINALMENTE SE HARAN ESTUDIOS IN VIVO COMPARANDO EL EFECTO DE LOS PROBIOTICOS CON VACUNAS OBTENIDAS A PARTIR DE BACTERINAS Y DE LOS COMPONENTES SUBCELULARES DE LOS DOS PATOGENOS, EN ESTE ESTUDIO SE REALIZARAN ENSAYOS DE PROTECCION FRENTE A INFECCIONES EXPERIMENTALES,