Descripción del proyecto
PHOTOBACTERIUM DAMSELAE SUBSP, DAMSELAE (PDD) ES UN PATOGENO EMERGENTE QUE CAUSA SEPTICEMIAS MORTALES EN ESPECIES DE PECES DE ALTO VALOR COMERCIAL, INCLUYENDO ALGUNAS DE RECIENTE INTRODUCCION EN LA ACUICULTURA MARINA ESPAÑOLA, A PESAR DE SU CRECIENTE IMPORTANCIA, NO SE HAN DESARROLLADO ESTRATEGIAS DE PREVENCION Y CONTROL DE LOS BROTES EN LAS PISCIFACTORIAS, DEBIDO AL INCIPIENTE CONOCIMIENTO ACERCA DE SUS FACTORES DE VIRULENCIA Y DEL POTENCIAL INMUNOGENICO DE LAS DIFERENTES MOLECULAS DEL PATOGENO, ASI COMO ACERCA DE LA BASE GENETICA DE LA ADHERENCIA DE PDD A LAS CELULAS DE LOS PECES, SUS MECANISMOS DE COLONIZACION DEL PEZ, Y SUS ESTRATEGIAS PARA EVADIR LA RESPUESTA INMUNE DEL HOSPEDADOR, EN EL DESARROLLO DE UN PROYECTO NACIONAL PREVIAMENTE FINANCIADO (AGL2013-48353-R), CARACTERIZAMOS TRES CITOTOXINAS HEMOLITICAS EN ESTE PATOGENO (LA DAMSELISINA, Y LAS FOBALISINAS P Y C), QUE CONSTITUYEN IMPORTANTES FACTORES DE VIRULENCIA, EXISTIENDO FACTORES ADICIONALES QUE DESCONOCEMOS, EN EL DESARROLLO DEL PROYECTO VIGENTE AGL2016-79738-R QUE AHORA REMATA, HEMOS CARACTERIZADO EL SISTEMA REGULADOR DE DOS COMPONENTES RSTAB, Y LA HISTIDIN-KINASA VARS, LOS MUTANTES RSTAB ESTAN FUERTEMENTE AFECTADOS EN LA SINTESIS DE LAS HEMOLISINAS, MIENTRAS QUE EL MUTANTE VARS PRODUCE TODAS ESTAS TOXINAS DE FORMA NORMAL, SIN EMBARGO, TANTO LOS MUTANTES RSTAB COMO VARS SON AVIRULENTOS PARA PECES, Y AMBOS SISTEMAS RSTAB Y VARS REGULAN FUERTEMENTE UN CLUSTER DE GENES CANDIDATOS DE SINTESIS DE POLISACARIDOS CAPSULARES, TAL Y COMO HAN REVELADO NUESTROS RECIENTES DATOS DE TRANSCRIPTOMICA, UN ESTUDIO EN PARALELO MEDIANTE MUTAGENESIS POR TRANSPOSICION, NOS HA REVELADO UN SEGUNDO CLUSTER DE GENES CUYA MUTACION CAUSA LA PERDIDA DE LA VIRULENCIA PARA PECES, ESTE SEGUNDO CLUSTER NO ESTA SUJETO A REGULACION POR RSTAB NI POR VARS, Y ES UN FIRME CANDIDATO A ESTAR RELACIONADO TAMBIEN CON LA SINTESIS DE LA CAPSULA, LA OBSERVACION DE ESTOS TRES TIPOS DE MUTANTES (RSTAB, VARS Y LOS MUTANTES POR TRANSPOSICION) A MICROSCOPIA ELECTRONICA REVELO LA AUSENCIA EN TODOS ELLOS DE UNA CAPA CON CARACTERISTICAS DE UNA CAPSULA, QUE SI ESTA PRESENTE EN LA CEPA PARENTAL, POR TANTO, DISPONEMOS DE EVIDENCIAS DE QUE AL MENOS DOS GRUPOS DE GENES, CON UN PAPEL DETERMINANTE EN LA VIRULENCIA, ESTARIAN RELACIONADOS CON PROPIEDADES DE LA ENVUELTA CELULAR EN PDD, ES PERTINENTE RECORDAR QUE EN PDD, LA BIOGENESIS DE LA CAPSULA Y SU PAPEL EN LA PATOGENICIDAD ES UN TEMA COMPLETAMENTE DESCONOCIDO,ESTE PROYECTO PLANTEA UN DOBLE OBJETIVO: POR UNA PARTE, IDENTIFICAR LA BASE GENETICA DE LA SINTESIS DE LA CAPSULA EN PDD Y SU REGULACION, Y TRATAR DE DAR RESPUESTAS A ESTOS INTERROGANTES: I) EL PAPEL DE LA CAPSULA EN LA VIRULENCIA PARA PECES: II) EN LA ADHESION AL MUCUS Y A CELULAS DE LOS PECES, III) EN LA RESISTENCIA AL SUERO DE LOS PECES Y A LA FAGOCITOSIS, Y IV) COMO LOS CAMBIOS EN LA SALINIDAD MODULAN LA EXPRESION DE GENES DE VIRULENCIA, POR OTRA PARTE, PLANTEAMOS UTILIZAR LOS CONOCIMIENTOS DERIVADOS DE ESTA PROPUESTA, ASI COMO LOS ADQUIRIDOS EN LOS DOS PROYECTOS ANTERIORES PARA: (I) CONSTRUIR Y EVALUAR CEPAS VACUNALES ATENUADAS; (II) IDENTIFICAR NUEVOS MARCADORES MOLECULARES QUE SE CORRELACIONEN CON LA VIRULENCIA Y LA PROTECCION VACUNAL; (III) PROPUESTA DE NUEVAS VACUNAS DE SUBUNIDAD, BASADAS EN POLISACARIDOS CAPSULARES Y TOXOIDES, PHOTOBACTERIUM DAMSELAE\VIBRIOSIS\VACUNAS\ESPARIDOS\LUBINA\CAPSULA\TOXINAS\HEMOLISINAS