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AGL2016-79738-R

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REGULACION DE LA VIRULENCIA EN EL PATOGENO EMERGENTE DE PECES PHOTOBACTERIUM DAM...

REGULACION DE LA VIRULENCIA EN EL PATOGENO EMERGENTE DE PECES PHOTOBACTERIUM DAMSELAE SUBSP. DAMSELAE: APLICACIONES A LA PREVENCION Y EL CONTROL PHOTOBACTERIUM DAMSELAE SUBSP. DAMSELAE ES UN PATOGENO EMERGENTE QUE CAUSA SEPTICEMIAS MORTALES EN NUMEROSAS ESPECIES DE PECES DE ELEVADO INTERES EN LA ACUICULTURA MARINA. RECIENTEMENTE HEMOS COMENZADO A DILUCIDAR SUS MECANISMOS D... ver más

01/01/2016

USC

145K€

Presupuesto del proyecto: 145K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPOSTELA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 236

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2016-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPOSTELA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 236

Presupuesto del proyecto 145K€

Descripción del proyecto PHOTOBACTERIUM DAMSELAE SUBSP. DAMSELAE ES UN PATOGENO EMERGENTE QUE CAUSA SEPTICEMIAS MORTALES EN NUMEROSAS ESPECIES DE PECES DE ELEVADO INTERES EN LA ACUICULTURA MARINA. RECIENTEMENTE HEMOS COMENZADO A DILUCIDAR SUS MECANISMOS DE VIRULENCIA. ASI, HEMOS DEMOSTRADO QUE ALGUNAS CEPAS CONTIENEN EL PLASMIDO DE VIRULENCIA PPHDD1 QUE CODIFICA DOS CITOTOXINAS HEMOLITICAS: LA DAMSELISINA (DLY) Y LA TOXINA FORMADORA DE PORO HLYAPL, SIENDO AMBOS FACTORES DE VIRULENCIA PARA PECES. EN EL DESARROLLO DE UN PROYECTO PREVIAMENTE FINANCIADO, APLICANDO UNA ESTRATEGIA COMBINADA DE SECUENCIACION DE GENOMAS COMPLETOS Y DE MUTAGENESIS POR TRANSPOSICION, DEMOSTRAMOS QUE LAS CEPAS DE ESTE PATOGENO TAMBIEN EMPLEAN UNA HEMOLISINA (HLYACH) Y UNA FOSFOLIPASA (PLP) CROMOSOMICAS COMO FACTORES DE VIRULENCIA, EXISTIENDO POSIBLES FACTORES ADICIONALES QUE DESCONOCEMOS. SI BIEN HEMOS DESCUBIERTO QUE LA SALINIDAD DEL MEDIO REGULA LA PRODUCCION DE LAS HEMOLISINAS, LOS MECANISMOS MOLECULARES QUE REGULAN LA EXPRESION DE FACTORES DE VIRULENCIA EN ESTE PATOGENO SON DESCONOCIDOS. MUY RECIENTEMENTE, IDENTIFICAMOS UN SISTEMA REGULADOR DE DOS COMPONENTES, DENOMINADO RSTAB, CUYA MUTACION PRACTICAMENTE ANULA LA PRODUCCION DE LAS TOXINAS, Y LA QUIMIOTAXIS RELACIONADA CON LA MOTILIDAD FLAGELAR, ASI COMO LA VIRULENCIA PARA PECES.ESTE PROYECTO PLANTEA UN DOBLE OBJETIVO: POR UNA PARTE, IDENTIFICAR LOS SISTEMAS DE REGULACION DE GENES DE VIRULENCIA Y LAS SEÑALES FISICO-QUIMICAS QUE ACTIVAN A LOS REGULADORES, ASI COMO IDENTIFICAR QUE GENES DE VIRULENCIA COMPONEN EL REGULON RSTAB. POR OTRA PARTE, PLANTEAMOS UTILIZAR LOS CONOCIMIENTOS ADQUIRIDOS PARA: (I) CONSTRUCCION DE CEPAS ATENUADAS EN LA VIRULENCIA; (II) PROPONER MODIFICACIONES A LA CARTA EN LAS CONDICIONES FISICO-QUIMICAS DE CULTIVO DE POTENCIALES CEPAS VACUNALES Y ASI MODULAR LA PRODUCCION DE FACTORES DE VIRULENCIA, (III) PROPONER POSIBLES MEDIDAS PREVENTIVAS EN INSTALACIONES DE ACUICULTURA INTENSIVA, EN EL CASO DE IDENTIFICAR VARIABLES AMBIENTALES QUE REPRIMAN/ACTIVEN LA EXPRESION GENICA. EL PRIMER PASO SERA IDENTIFICAR GENES REGULADORES DE LOS GENES DE LAS HEMOLISINAS Y DE OTROS GENES DE VIRULENCIA MEDIANTE MUTAGENESIS POR TRANSPOSICION. ADEMAS, DISPONEMOS YA DE UNA COLECCION DE MUTANTES DE TRANSPOSICION SOBRE UN MUTANTE PREVIO RSTB Y QUE SON REVERTIENTES AL FENOTIPO SALVAJE, ES DECIR, SON FIRMES CANDIDATOS A CODIFICAR REPRESORES GENETICOS. A CONTINUACION, PLANTEAMOS DETERMINAR CUALES SON LAS SEÑALES AMBIENTALES QUE ACTIVAN AL SISTEMA DE DOS COMPONENTES RSTAB, Y QUE SEÑALES REGULAN A LOS DEMAS REGULADORES (ACTIVADORES Y REPRESORES QUE SE IDENTIFIQUEN EN EL PROYECTO). ESTO SE ESTUDIARA MEDIANTE FUSIONES TRANSCRIPCIONALES DE LOS PROMOTORES DE LOS GENES IDENTIFICADOS CON GENES REPORTER, ANALIZANDO SU REGULACION EN RESPUESTA A DIFERENTES CONDICIONES FISICO-QUIMICAS Y BIOLOGICAS (TEMPERATURA, SALINIDAD, DISPONIBILIDAD DE OXIGENO, IONES CL-, MG2+, CA2+, PRESENCIA DE SUERO/MUCUS DE PEZ). ADEMAS, PROPONEMOS EL ESTUDIO DEL REGULON RSTAB MEDIANTE TRANSCRIPTOMICA, PARA IDENTIFICAR OTROS FACTORES DE VIRULENCIA DESCONOCIDOS.CON EL DESARROLLO DE ESTE PROYECTO Y EL CONOCIMIENTO DE LOS MECANISMOS QUE MODULAN LA PATOGENESIS BACTERIANA PODREMOS SENTAR LAS BASES DE DOS ESTRATEGIAS PRACTICAS DE FUTURO CONTRA LA VIBRIOSIS CAUSADA POR ESTE PATOGENO EMERGENTE: (1) PREVENCION: FUTURO DISEÑO DE NUEVAS Y MEJORES VACUNAS EFECTIVAS; (2) CONTROL: IDENTIFICACION DE NUEVAS DIANAS TERAPEUTICAS PARA ANTIMICROBIANOS. OXINAS\LUBINA\ESPÁRIDOS\VACUNAS\VIBRIOSIS\REGULACIÓN GENÉTICA\HEMOLISINAS

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