Descripción del proyecto
ENTRE LAS SUSTANCIAS POTENCIALMENTE PRESENTES EN ALIMENTOS Y PIENSOS, LAS MICOTOXINAS REPRESENTAN UN SERIO PROBLEMA PARA LA SALUD HUMANA Y ANIMAL, OCASIONANDO IMPORTANTES PERDIDAS ECONOMICAS AL SECTOR AGROALIMENTARIO. PARA ESTE GRUPO DE CONTAMINANTES, LOS METODOS BASADOS EN LA UTILIZACION DE ANTICUERPOS GOZAN DE UNA AMPLIA ACEPTACION A NIVEL MUNDIAL COMO TECNICAS DE SCREENING POR SU SENCILLEZ, RAPIDEZ Y BAJO COSTE. NO OBSTANTE, HEMOS DETECTADO QUE PARA ALGUNAS MICOTOXINAS LAS ESTRATEGIAS SEGUIDAS PARA LA OBTENCION DE INMUNORREACTIVOS SON MANIFIESTAMENTE MEJORABLES. ESTE ES EL CASO DE DEOXINIVALENOL Y CITRININA, DOS MICOTOXINAS CON UNA ELEVADA PRESENCIA EN DETERMINADOS ALIMENTOS Y PARA LAS QUE SE HAN ESTABLECIDO LIMITES MAXIMOS E INGESTAS DIARIAS TOLERABLES. ANTE ESTA SITUACION, HEMOS CONSIDERADO COMO UN OBJETIVO DE GRAN TRASCENDENCIA CIENTIFICO-TECNOLOGICA LA OBTENCION DE INMUNORREACTIVOS CON PRESTACIONES MEJORADAS PARA DEOXINIVALENOL Y CITRININA. PROPONEMOS OBTENER Y CARACTERIZAR EXHAUSTIVAMENTE BIOCONJUGADOS PREPARADOS MEDIANTE ESTRATEGIAS ALTERNATIVAS. DE ESTE MODO, PODREMOS LLEVAR A CABO ESTUDIOS DE RELACION ESTRUCTURA-ACTIVIDAD REFERENTES A LA AFINIDAD Y ESPECIFICIDAD DE LOS ANTICUERPOS GENERADOS, ESTUDIOS QUE FINALMENTE NOS PERMITIRAN DESARROLLAR METODOS INMUNOQUIMICOS PARA EL ANALISIS SENSIBLE Y SELECTIVO DE ESTAS DOS RELEVANTES BIOTOXINAS EN AQUELLAS MATRICES ALIMENTARIAS DONDE PUEDEN CONSTITUIR UN RIESGO PARA LA SALUD HUMANA O EL BIENESTAR ANIMAL.EL GRUPO RESPONSABLE DE ESTE SUBPROYECTO TIENE UNA AMPLIA EXPERIENCIA EN LA OBTENCION DE BIORRECEPTORES MOLECULARES Y EN EL DESARROLLO DE INMUNOENSAYOS PARA EL ANALISIS DE CONTAMINANTES ORGANICOS EN ALIMENTOS, TAL COMO SE REFLEJA EN LAS PATENTES DEPOSITADAS, LICENCIADAS Y EN EXPLOTACION, ASI COMO EN LAS NUMEROSAS PUBLICACIONES EN LAS MAS PRESTIGIOSAS REVISTAS DE AREAS COMO LA QUIMICA ANALITICA Y LA QUIMICA DE ALIMENTOS.COMO PASO PREVIO PARA DESARROLLAR SISTEMAS BIOANALITICOS ESPECIFICOS PARA CADA UNA DE LAS MICOTOXINAS CONTEMPLADAS, SERA NECESARIO GENERAR INMUNORREACTIVOS (HAPTENOS, CONJUGADOS Y ANTICUERPOS), ASI COMO CARACTERIZARLOS Y COMBINARLOS ADECUADAMENTE PARA LOGRAR LAS PRESTACIONES EXIGIBLES A CUALQUIER METODOLOGIA ANALITICA.LOS OBJETIVOS PARTICULARES DE ESTE SUBPROYECTO SE PUEDEN RESUMIR DEL SIGUIENTE MODO:- DISEÑO Y SINTESIS DE HAPTENOS INMUNIZANTES. SE LLEVARA A CABO LA SINTESIS DE UN CONJUNTO DE DERIVADOS DE CADA MICOTOXINA. ESTOS CONJUGADOS MIMETIZARAN LAS CARACTERISTICAS FISICOQUIMICAS DE LA MOLECULA DIANA E INCORPORARAN UN BRAZO ESPACIADOR FUNCIONALIZADO.- DISEÑO Y SINTESIS DE HAPTENOS HETEROLOGOS. SE PREPARARA UNA SERIE DE ANALOGOS ESTRUCTURALES DE LOS HAPTENOS INMUNIZANTES PARA MEJORAR LA SENSIBILIDAD DE LOS INMUNOENSAYOS.- SINTESIS DE METABOLITOS Y PRODUCTOS DE DEGRADACION DE LA CITRININA. SE SINTETIZARAN LOS ANALOGOS ESTRUCTURALES DE LOS ANALITOS MAS RELEVANTES PARA TESTAR LA ESPECIFICIDAD DE LA COLECCION DE ANTICUERPOS.- PREPARACION DE BIOCONJUGADOS. LA COLECCION DE HAPTENOS SINTETIZADOS SE ACOPLARAN A DIFERENTES PROTEINAS PARA OBTENER LOS BIOCONJUGADOS INMUNIZANTES Y DE ENSAYO QUE SE REQUIEREN PARA EL DESARROLLO DE LOS METODOS INMUNOQUIMICOS PROPUESTOS.- METODOS ANALITICOS INSTRUMENTALES PARA LA DETERMINACION DE DEOXINIVALENOL Y CITRININA. SE PONDRAN A PUNTO METODOS CROMATOGRAFICOS PARA LA DETERMINACION DE AMBAS MICOTOXINAS EN MUESTRAS DE ALIMENTOS, FORTIFICADAS O CONTAMINADAS DE FORMA NATURAL, PARA LA VALIDACION DE LOS METODOS INMUNOQUIMICOS. ICOTOXINAS\ELISA\INMUNOENSAYO\ANALISIS\BIOCONJUGADOS\HAPTENOS\SINTESIS\CITRININA\DEOXINIVALENOL