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SAF2016-77227-R

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LINFOCITOS T Y B ANTI-PERIFERINA Y ANTI-CROMOGRANINA T AND B LYMPHOCYTE DURANTE...

LINFOCITOS T Y B ANTI-PERIFERINA Y ANTI-CROMOGRANINA T AND B LYMPHOCYTE DURANTE EL DESARROLLO DE LA DIABETES MELLITUS TIPO 1. LA DIABETES TIPO 1 (T1D) ES UNA ENFERMEDAD AUTOINMUNE ACTUALMENTE SIN CURA CARACTERIZADA POR LA PERDIDA DE LAS CELULAS BETA PANCREATICAS PRODUCTORAS DE INSULINA. TANTO LOS LINFOCITOS T COMO LOS B ESTAN IMPLICADOS EN LA PATOGENESIS... ver más

01/01/2016

UDL

169K€

Presupuesto del proyecto: 169K€

Líder del proyecto

UNIVERSITAT DE LLEIDA CCT No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Sin perfil tecnológico

Fecha límite participación Sin fecha límite de participación.

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Líder del proyecto

UNIVERSITAT DE LLEIDA CCT No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Sin perfil tecnológico

Presupuesto del proyecto 169K€

Fecha límite de participación Sin fecha límite de participación.

Descripción del proyecto LA DIABETES TIPO 1 (T1D) ES UNA ENFERMEDAD AUTOINMUNE ACTUALMENTE SIN CURA CARACTERIZADA POR LA PERDIDA DE LAS CELULAS BETA PANCREATICAS PRODUCTORAS DE INSULINA. TANTO LOS LINFOCITOS T COMO LOS B ESTAN IMPLICADOS EN LA PATOGENESIS AUNQUE LOS DETERMINANTES MOLECULARES Y CELULARES IMPLICADOS EN SU INTERACCION SON DESCONOCIDOS. PROPONEMOS ANALIZAR LA ACCION E INTERACCION DE LINFOCITOS T Y B CONTRA DOS AUTOANTIGENOS, LA PERIFERINA Y LA CROMOGRANINA, EN EL RATON NOD, UN MODELO EXPERIMENTAL DE T1D. CREEMOS QUE LA RESOLUCION DE ESTE OBJETIVO AYUDARA A LA GENERACION DE NUEVAS ESTRATEGIAS TERAPEUTICAS PARA PREVENIR Y/O REVERTIR LA ENFERMEDAD.1. RESPUESTA DE LINFOCITOS T Y B ANTI-PERIFERINA (PRPH)LA PRPH ES UN AUTOANTIGENO RECONOCIDO POR UN GRAN NUMERO DE LINFOCITOS B AUTOREACTIVOS EN RATONES NOD. RECIENTEMENTE HEMOS GENERADO UN RATON TRANSGENICO DE LINFOCITOS B ANTI-PRPH (280IGHIGL-NOD). LOS RESULTADOS INDICAN QUE, A PESAR DE MOSTRAR UN FENOTIPO DE ANERGIA, LOS LINFOCITOS B DE LOS RATONES 280IGHIGL-NOD ACTIVAN LINFOCITOS T EFECTORES ANTI-PRPH PROVOCANDO DE ESTA FORMA UNA ACCELERACION SIGNIFICATIVA DEL DEBUT Y UN INCREMENTO DE LA INCIDENCIA DE LA ENFERMEDAD COMPARADO CON LOS RATONES NOD NO TRANSGENICOS. ADEMAS, EN LOS RATONES NOD.PRPH-/- DEFECTIVOS DE PRPH SE PRODUCE UN RETRASO EN EL DEBUT DE LA ENFERMEDAD AUNQUE CON UNA INCIDENCIA DE LA ENFERMEDAD PARECIDA A LA DEL RATON NOD. RECIENTEMENTE PARA DETERMINAR LA RESPUESTA T CONTRA PRPH HEMOS GENERADO CLONES DE LINFOCITOS T DE RATONES 280IGHIGL-NOD. UTILIZANDO FRAGMENTOS Y PEPTIDOS SINTETICOS DE PRPH HEMOS IDENTIFICADO DOS CLONES REACTIVOS CONTRA PERIFERINA. EN EL PRESENTE PROYECTO PROPONEMOS ANALIZAR LA CAPACIDAD DIABETOGENICA DE ESTOS DOS CLONES, IDENTIFICAR EL EPITOPO DE PRPH QUE RECONOCEN, GENERAR TETRAMEROS DE MHCII/PRPH, ANALIZAR LA FRECUENCIA DE LINFOCITOS T ANTI-PRPH EN RATONES 280IGHIGL-NOD Y NOD, Y FINALMENTE GENERAR RATONES TCR TRANSGENICOS ANTI-PRPH. 2. ALTERNATIVAMENTE, GENERAREMOS UN RATON BCR TRANSGENICO ANTI-CROMOGRANINA A (CHGA), EL AUTOANTIGENO RECONOCIDO POR EL CLON T CD4+ BDC-2.5 DIABETOGENICO. SE MONITORIZARA LA INCIDENCIA DE T1D Y LA FRECUENCIA DE LINFOCITOS T ANTI-CHGA MEDIANTE EL USO DE TETRAMEROS MHC DE CLASE II. MAS ALLA DEL AMBITO DE ESTE PROYECTO, ESTE MODELO NOS PERMITIRA, AL IGUAL QUE LOS MODELOS TCR Y BCR ANTI-PRPH, ESTUDIAR LA COEVOLUCION DE LA RESPUESTA DE LINFOCITOS T Y B DE FORMA SEPARADA O CONJUNTA (EN RATONES TRANSGENICOS BCR-TCR DOBLES).3. TERAPIA PARA LA GENERACION DE CELULAS TR1 IN VIVO Y LA REVERSION/PREVENCION DE LA T1D. LA TERAPIA CON VECTORES DE ADN QUE CODIFICA PARA LIMP II FUSIONADO A UN PEPTIDO 2.5MI, UN MIMOTOPO RECONOCIDO POR LOS LINFOCITOS T BDC-2.5, HA DEMOSTRADO TENER UNA ALTA EFICACIA EN NUESTRO LABORATORIO EN LA PREVENCION DE LA DIABETES EN RATONES NOD. HIPOTETIZAMOS QUE LA INCLUSION DE INTERLEUCINAS COMO LA IL-10 O LA IL-27 PUEDE AYUDAR A LA GENERACION DE CELULAS TR1 EN VIVO. POR ELLO, SE GENERARAN VECTORES QUE CODIFIQUEN 2.5MI-LIMP II Y IL-10 O IL-27, Y SE TRATARAN RATONES NOD PARA PREVENIR O CURAR LA T1D EN RATONES NOD. 4. TETRAMEROS DE MHC DE CLASE II FREQUENTEMENTE NO SON FUNCIONALES PARA LA TINCION DE CELULAS T CD4, DEBIDO A LA UNION DE PEPTIDOS EN DIFERENTES REGISTROS AL MHC. PROPONEMOS SOLUCIONAR ESTE PROBLEMA UTILIZANDO COMO MODELO AG7, EL ALELO DEL RATON NOD DE MHC DE CLASE II, MEDIANTE LA INTODUCCION DE PUENTES SULFUROS ENTRE EL PEPTIDO ANCLADO Y EL MHC PARA ASEGURAR LA UNION DEL PEPTIDO EN UN REGISTRO UNICO. NMUNOLOGÍA\TRANSGÉNICO\RATÓN NOD\AUTOANTÍGENO\TOLERANCIA INMUNOLÓGICA\LINFOCITO B\LINFOCITO T\T1D\AUTOINMUNIDAD

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