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SAF2009-09215

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CARACTERIZACION DE LA RESPUESTA DE LINFOCITOS B AUTOREACTIVOS CONTRA UN NUEVO AU...

CARACTERIZACION DE LA RESPUESTA DE LINFOCITOS B AUTOREACTIVOS CONTRA UN NUEVO AUTOANTIGENO DE 90 KDA ESPECIFICO DE CELULAS BETA PANCREATICAS DURANTE EL DESARROLLO DE LA DIABETES TIPO 1 INTRODUCCION: LA DIABETES MELLITUS TIPO 1 (T1D), ES UNA ENFERMEDAD MULTIFACTORIAL CARACTERIZADA POR LA PERDIDA DE LAS CELULAS BETA PRODUCTORAS DE INSULINA A TRAVES DE UN PROCESO AUTODESTRUCTIVO MEDIADO POR EL PROPIO SISTEMA INMUNE... ver más

01/01/2009

UDL

121K€

Presupuesto del proyecto: 121K€

Líder del proyecto

UNIVERSITAT DE LLEIDA CCT No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Sin perfil tecnológico

Fecha límite participación Sin fecha límite de participación.

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2009-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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Este proyecto no cuenta con búsquedas de partenariado abiertas en este momento.

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Participantes

UDL

Lider

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Líder del proyecto

UNIVERSITAT DE LLEIDA CCT No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Sin perfil tecnológico

Presupuesto del proyecto 121K€

Fecha límite de participación Sin fecha límite de participación.

Descripción del proyecto INTRODUCCION: LA DIABETES MELLITUS TIPO 1 (T1D), ES UNA ENFERMEDAD MULTIFACTORIAL CARACTERIZADA POR LA PERDIDA DE LAS CELULAS BETA PRODUCTORAS DE INSULINA A TRAVES DE UN PROCESO AUTODESTRUCTIVO MEDIADO POR EL PROPIO SISTEMA INMUNE DEL INDIVIDUO AFECTADO, EN LA ACTUALIDAD, UNO DE LOS MEJORES MODELOS DE T1D ES EL RATON NOD EL CUAL ESPONTANEAMENTE DESARROLLA UNA FORMA DE DIABETES AUTOINMUNITARIA MUY PARECIDA A LA T1D HUMANA, AUNQUE LOS LINFOCITOS T SON LOS PRINCIPALES EFECTORES DEL DAÑO SOBRE LAS CELULAS BETA, LA COOPERACION DE OTRAS POBLACIONES CELULARES DEL SISTEMA INMUNE ES NECESARIA PARA QUE LA ENFERMEDAD SE INICIE Y PROGRESE, ENTRE ELLAS, SE HA VISTO QUE LOS LINFOCITOS B JUEGAN UN PAPEL DETERMINANTE EN LA INICIACION Y POSTERIOR DESARROLLO DE LA ENFERMEDAD, EN EL RATON NOD, CON EL OBJETIVO DE ELUCIDAR EL REPERTORIO ANTIGENICO DE LOS LINFOCITOS B EN EL CURSO DE LA ENFERMEDAD, GENERAMOS HIBRIDOMAS CON LINFOCITOS B INFILTRANTES EN LOS ISLOTES PANCREATICOS DE RATONES NOD, LOS RESULTADOS INDICARON QUE UNA PEQUEÑA PROPORCION DE ELLOS (5,8%) PRODUCIAN ANTICUERPOS QUE RECONOCIAN UNA PROTEINA CITOPLASMATICA DE ~90 KDA (ICA90) PRESENTE ESPECIFICAMENTE EN CELULAS BETA DE ISLOTE Y EN LAS LINEAS DE INSULINOMA BHC6 Y NIT-1, INTERESANTEMENTE, EL ANALISIS DEL ISOTIPO DE INMUNOGLOBULINA MOSTRO QUE ESTOS HIBRIDOMAS SECRETABAN ANTICUERPOS DEL ISOTIPO IGG2B O IGG1, INDICANDO QUE DERIVABAN DE PRECURSORES QUE HABIAN SUFRIDO CAMBIO DE CLASE, ADEMAS, EL ANALISIS DE LA REGION VL AND VH DE LOS GENES DE LAS INMUNOGLOBULINAS DEL HIBRIDOMA H116, REPRESENTANTE DE ESTE GRUPO DE HIBRIDOMAS MOSTRO LA EXISTENCIA DE HIPERMUTACION SOMATICA, ESTOS RESULTADOS NOS INDICARON QUE ESTOS HIBRIDOMAS PROCEDIAN DE LINFOCITOS B QUE HABIAN SUFRIDO MADURACION DE LA AFINIDAD, EN CONSECUENCIA, Y CON EL OBJETIVO DE ESTUDIAR LA FUNCION DE ESTAS CELULAS EN LA T1D, RECIENTEMENTE GENERAMOS UN NUEVO MODELO RATON NOD, EL RATON H116HL-NOD, PORTADOR TRANSGENICAMENTE DE GENES DE INMUNOGLOBULINAS QUE CODIFICAN LAS REGIONES VARIABLES IGH Y IGL VARIABLE DEL HIBRIDOMA H116, OBJETIVOS: LOS OBJETIVOS ESPECIFICOS DEL PRESENTE PROYECTO SON: A) IDENTIFICAR EL AUTOANTIGENO ICA90; B) ELUCIDAR LA FUNCION DEL AUTOANTIGENO ICA90 COMO POSIBLE CAUSA DE T1D EN EL RATON NOD; C) ESTABLECER LA FUNCION DE LOS LINFOCITOS B AUTOREACTIVOS CONTRA ICA90 EN EL CURSO DE LA ENFERMEDAD; D) INVESTIGAR LA RESPUESTA HUMORAL CONTRA EL AUTOANTIGENO ~90 KDA EN RATONES NOD Y PACIENTES AFECTOS DE T1D; Y E) ANALIZAR LOS MECANISMOS IMPLICADOS EN LA GENERACION LINFOCITOS B AUTOREACTIVOS CONTRA CELULA BETA TANTO EN UN FONDO GENETICO DE RESISTENCIA COMO DE SUSCEPTIBILIDAD AL DESARROLLO ESPONTANEO DE T1D,METODOLOGIA: PROPONEMOS ABORDAR LOS OBJETIVOS PREVIOS MEDIANTE LA SIGUIENTE METODOLOGIA: A) POR METODOS DE PROTEOMICA, E,J, ELECTROFORESIS 2-D Y ESPECTOMETRIA DE MASAS PARA CARACTERIZAR EL AUTOANTIGENO ICA90; B) GENERACION DE UN ELISA CON EL AUTOANTIGENO ICA90 PURIFICADO, PARA DETERMINAR LA PRESENCIA DE AUTOANTICUERPOS CONTRA ICA90 EN SUERO DE RATONES NOD Y EN PACIENTES DE T1D; C) SEGUIMIENTO DE LA INCIDENCIA DE DIABETES EN RATONES H116HL-NOD TRANSGENICOS Y EN OTROS RATONES CON FONDO GENETICO DE RESISTENCIA A LA ENFERMEDAD PORTADORES DEL MISMO PAR DE TRANSGENES H116 (E,J,, RATONES H116HL-NOR, Y H116HL-C57BL/6); Y D) ANALISIS FENOTIPICO Y FUNCIONAL DE LOS LINFOCITOS B INFILTRANTES EN ISLOTES, DE BAZO, Y GANGLIOS LINFATICOS, MEDIANTE DEFERENTES APROXIMACIONES TALES COMO HISTOPATOLOGIA, FACS, Y CULTIVOS CELULARES, DIABETES TIPO 1\AUTOINMUNIDAD\LINFOCITO B\AUTOANTICUERPO\AUTOANTIGENO\TOLERANCIA INMUNITARIA\CELULA BETA PANCREATICA

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