DESARROLLO Y APLICACION DE PLATAFORMAS DE ALTO RENDIMIENTO BASADA EN FLUORESCENC...
DESARROLLO Y APLICACION DE PLATAFORMAS DE ALTO RENDIMIENTO BASADA EN FLUORESCENCIA PARA LA SELECCION DE COMPUESTOS ANTIVIRALES FRENTE AL VIRUS DEL NILO OCCIDENTAL Y SARS-COV-2
LAS POLIMERASAS VIRALES TIENEN UN PAPEL CENTRAL EN LA REPLICACION Y TRANSCRIPCION DEL GENOMA DE ESTOS PATOGENOS. ESTAS PROTEINAS SON CAPACES DE DESEMPEÑAR MULTIPLES FUNCIONES RELACIONADAS CON LA SINTESIS DE ACIDOS NUCLEICOS. EN FU...
LAS POLIMERASAS VIRALES TIENEN UN PAPEL CENTRAL EN LA REPLICACION Y TRANSCRIPCION DEL GENOMA DE ESTOS PATOGENOS. ESTAS PROTEINAS SON CAPACES DE DESEMPEÑAR MULTIPLES FUNCIONES RELACIONADAS CON LA SINTESIS DE ACIDOS NUCLEICOS. EN FUNCION DEL TIPO DEL GENOMA (DE RNA O DE DNA) Y LAS NECESIDADES ESPECIFICAS DE CADA FAMILIA DE VIRUS, LAS POLIMERASAS VIRICAS UTILIZAN ESTRATEGIAS Y MECANISMOS MUY DIVERSOS PARA ASEGURAR LA COPIA DEL MATERIAL GENOMICO. COMO PRINCIPALES PROTEINAS ENCARGADAS DE LA REPLICACION DEL GENOMA VIRAL, ESTAS ENZIMAS HAN SIDO OBJETO DE NUMEROSOS ESTUDIOS QUE SE HAN TRADUCIDO EN UN CONOCIMIENTO SIGNIFICATIVO DE SU ESTRUCTURA Y FUNCION. ESTO HA PERMITIDO DEMOSTRAR EL ALTO POTENCIAL BIOTECNOLOGICO DE ESTAS ENZIMAS EN PROCESOS DE AMPLIFICACION, GENOTIPADO Y SECUENCIACION. ADEMAS, EL ESTUDIO DE ESTAS POLIMERASAS TAMBIEN HA ESTADO ENFOCADO A SU UTILIZACION COMO DIANA DE AGENTES TERAPEUTICOS PARA EL TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES DE ORIGEN VIRICO. MIENTRAS QUE LAS POLIMERASAS DE LOS VIRUS DE DNA CATALIZAN LA REACCION DE POLIMERIZACION MEDIANTE UNA REACCION SIMILAR AL DE LAS POLIMERASAS UTILIZADAS POR LOS ORGANISMOS QUE INFECTAN, LOS VIRUS DE RNA SINTETIZAN POLIMERASAS CON UNA CAPACIDAD ENZIMATICA ES EXCLUSIVA, YA QUE SON CAPACES DE USAR RNA COMO MOLDE PARA GENERAR NUEVAS MOLECULAS DE DNA (POLIMERASAS QUE SE DENOMINAN RETROTRANSCRIPTASAS), O DE RNA (POLIMERASAS DE RNA DEPENDIENTES DE RNA O RDRP). DEBIDO A ESTE HECHO DIFERENCIAL, ESTE TIPO DE POLIMERASAS SON DIANAS MUY ATRACTIVAS PARA EL DISEÑO DE AGENTES ANTIVIRALES DE ACCION DIRECTA ESPECIFICA. ACTUALMENTE, LAS RDRPS YA ESTAN SIENDO UTILIZADAS COMO DIANAS TERAPEUTICAS EN ENFERMEDADES TAN IMPORTANTES DESDE EL PUNTO DE VISTA CLINICO COMO EL SIDA O LA HEPATITIS CRONICA CAUSADA POR EL VIRUS DE LA HEPATITIS C. DOS ENFERMEDADES CAUSADAS POR VIRUS DE RNA PANDEMICOS FRENTE A LOS QUE NO EXISTE TODAVIA NINGUN TRATAMIENTO CLINICO ESPECIFICO SON LA ENFERMEDAD CAUSAD POR DEL VIRUS DEL NILO OCCIDENTAL, QUE EN 2020 HA CAUSADO 77 MUERTES EN EUROPA (7 DE ELLAS EN ESPAÑA) Y LA COVID-19, CAUSADA POR EL SARS-COV-2, Y QUE A NIVEL GLOBAL HA PRODUCIDO SOLO EN ESTE AÑO MAS DE 1,5 MILLONES DE MUERTES.TENIENDO EN CUENTA ESTAS PREMISAS, EL OBJETIVO PRINCIPAL DEL PROYECTO ES EL DESARROLLO Y APLICACION DE SISTEMAS DE ALTA EFICIENCIA PARA EL CRIBADO DE COMPUESTOS CON ACTIVIDAD INHIBITORIA FRENTE A LAS POLIMERASAS DEL VIRUS DEL NILO OCCIDENTAL Y EL SARS-COV-2. ESTOS METODOS PERMITIRAN EVALUAR EL EFECTO INHIBITORIO DE DIFERENTES COMPUESTOS CONTRA LA RDRP DE ESTOS DOS VIRUS DE MANERA EFICIENTE Y SIN REQUERIR LA UTILIZACION DE INSTALACIONES ESPECIALES PARA SU FUNCIONAMIENTO.LA PRINCIPAL METODOLOGIA UTILIZADA SERA EL USO DE TECNICAS FLUORIMETRICAS PARA MEDIR LA ACTIVIDAD DE POLIMERIZACION. SE USARA UN FLUROFORO QUE QUE AUMENTA ESPECIFICAMENTE SU EMISION DE FLUORESCENCIA AL UNIRSE A RNA BICATENARIO (DSRNA). LA ACTIVIDAD POLIMERASA SE DETERMINARA MIDIENDO EL INCREMENTO DE FLUORESCENCIA EMITIDA POR EL FLUOROFORO TRAS SU FUERTE UNION AL DSRNA, QUE ES SINTETIZADO POR LAS POLIMERASAS A LO LARGO DEL TIEMPO. EL POTENCIAL EFECTO INHIBITORIO DE LOS COMPUESTOS SE OBSERVARA COMO UNA DISMINUCION EN LA EMISION DE ESTA FLUORESCENCIA.LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN ESTE PROYECTO TENDRAN UN MARCADO CARACTER TRANSLACIONAL, CREANDO UNA HERRAMIENTA BIOTECNOLOGICA QUE TENDRA EFECTO INMEDIATO EN LA BUSQUEDA DE UNA TERAPIA ANTIVIRAL, LO QUE REDUNDARA EN UN BENEFICIO DIRECTO PARA EL BIENESTAR DE LA SOCIEDAD. ORONAVIRUS\ENSAYO FLUORIMETRICO\DESCUBRIMIENTO DE FARMACOS\SELECCION DE ALTO RENDIMIENTO\POLIMERASA VIRAL\POLIMERASA DE RNA\VIRUS DEL NILO OCCIDENTAL\FLAVIVIRUS\SARS-COV-2ver más
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