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BIO2013-48788-C2-1-R

Financiado
FIDELIDAD DE POLIMERASAS VIRALES QUE COPIAN MOLDES ARN Y SU RELACION CON LAS BAS...
FIDELIDAD DE POLIMERASAS VIRALES QUE COPIAN MOLDES ARN Y SU RELACION CON LAS BASES MOLECULARES DE LA RESISTENCIA A FARMACOS ANTIVIRALES LAS INFECCIONES CAUSADAS POR VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (VIH) O POR EL VIRUS DE LA HEPATITIS C (VHC) CONTINUAN SIENDO UN GRAN PROBLEMA DE SALUD Y SON LAS INFECCIONES VIRICAS CRONICAS MAS FRECUENTES EN PAISES DESARROLLADO... LAS INFECCIONES CAUSADAS POR VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (VIH) O POR EL VIRUS DE LA HEPATITIS C (VHC) CONTINUAN SIENDO UN GRAN PROBLEMA DE SALUD Y SON LAS INFECCIONES VIRICAS CRONICAS MAS FRECUENTES EN PAISES DESARROLLADOS, LOS GENOMAS DEL VIH Y DEL VHC ESTAN CONSTITUIDOS POR ARN DE CADENA SENCILLA, LA REPLICACION DEL ARN DE ESTOS VIRUS SE LLEVA A CABO POR POLIMERASAS CODIFICADAS EN SUS GENOMAS (RETROTRANSCRIPTASA O RT EN EL VIH Y ARN POLIMERASA NS5B EN EL VHC), AMBAS ENZIMAS TIENEN BAJA FIDELIDAD DE COPIA Y SON DIANAS IMPORTANTES DE FARMACOS ANTIVIRALES, EL DESARROLLO DE RESISTENCIA A INHIBIDORES DE LA RT APROBADOS PARA SU USO CLINICO, O A INHIBIDORES DE NS5B CONSTITUYEN AMENAZAS IMPORTANTES PARA EL EXITO DE LOS TRATAMIENTOS ANTIVIRALES, ADEMAS, EL VIH TIPO 2 (VIH-2) ES RESISTENTE NATURAL A MUCHOS FARMACOS TALES COMO LOS INHIBIDORES DE LA RT NO NUCLEOSIDICOS Y ADQUIERE RESISTENCIA A INHIBIDORES DE LA RT ANALOGOS A NUCLEOSIDO (NRTIS) POR MECANISMOS DISTINTOS A LOS OBSERVADOS EN EL VIH-1, EN ESTE PROYECTO NOS PLANTEAMOS ESTUDIAR LAS BASES MOLECULARES DE LA FIDELIDAD DE COPIA DE LAS POLIMERASAS DEL VIH Y DEL VHC CUANDO UTILIZAN COMO MOLDE ARN, ASI COMO EL IMPACTO DE LAS MUTACIONES ASOCIADAS A RESISTENCIA EN LA FIDELIDAD INTRINSECA DE VARIANTES DE LA RT Y DE LA POLIMERASA NS5B, LAS MEDIDAS DE FIDELIDAD SE HARAN USANDO ENSAYOS ENZIMATICOS Y GENETICOS BASADOS EN EL USO DEL ADN DEL FAGO M13MP2 COMO SUSTRATOS Y DEL GEN LACZα COMO REPORTERO, SE USARAN COMO MOLDES TANTO OLIGONUCLEOTIDOS SINTETICOS DE ARN DE MENOS DE 30 BASES, COMO ARNS MAS LARGOS, SINTETIZADOS CON LA ARN POLIMERASA DE T7, PARA ELLO, SE ESTABLECERAN CONDICIONES QUE MEJOREN LA FIDELIDAD DE DICHA POLIMERASA, POR OTRO LADO, UTILIZANDO LA RT DEL VIH-2 COMO MODELO, SE DETERMINARA EL IMPACTO SOBRE FIDELIDAD Y RESISTENCIA A NUCLEOTIDOS DE DISTINTAS MUTACIONES QUE APARECEN DURANTE EL TRATAMIENTO ANTIRRETROVIRAL (P, EJ,, K65R, Q151M Y M184V), ASI COMO LAS BASES MOLECULARES DE LA BAJA PREVALENCIA EN PACIENTES INFECTADOS POR EL VIH-2 DE LOS CAMBIOS M41L, T215Y Y MUTACIONES ASOCIADAS A RESISTENCIA A ANALOGOS A TIMIDINA, EN EL CASO DE NS5B, ESTUDIAREMOS EL IMPACTO DE MUTACIONES LOCALIZADAS EN EL CANAL DEL MOLDE (P, EJ, S282T), ASOCIADAS A RESISTENCIA A ANALOGOS A NUCLEOTIDO EN DESARROLLO PRECLINICO Y A SOFOSBUVIR, UN INHIBIDOR DE NS5B QUE SE APROBARA PROXIMAMENTE, SE ESTUDIARA TAMBIEN LA MUTACION F415Y, ASOCIADA CON RESISTENCIA A RIBAVIRINA, ESTOS RESULTADOS DEBERIAN SERVIR PARA RECOMENDAR Y SELECCIONAR TERAPIAS APROPIADAS PARA EL TRATAMIENTO DE INFECCIONES CAUSADAS POR EL VIH OR POR EL VHC, ASI COMO COINFECCIONES DE AMBOS VIRUS,OTRO OBJETIVO ES OBTENER POLIMERASAS MEJORADAS QUE PUEDAN SER UTILES EN APLICACIONES BIOTECNOLOGICAS, SE DISEÑARAN Y PURIFICARAN RTS DEL VIH-2 QUE MEJOREN SU ESTABILIDAD TERMICA, FIDELIDAD DE SINTESIS DE ADN EN PRESENCIA DE MOLDES ARN Y PROCESIVIDAD, COMPARANDOSE CON RTS DISPONIBLES ACTUALMENTE PARA LA SINTESIS DE ADN COMPLEMENTARIO A PARTIR DE ARN MENSAJERO, POR OTRO LADO, LA ARN POLIMERASA DEL VHC PODRIA UTILIZARSE TEORICAMENTE PARA AMPLIFICAR LIBRERIAS DE ARN, YA QUE NO REQUIERE INICIADORES PARA LLEVAR A CABO LA SINTESIS, SIN EMBARGO, SU BAJA FIDELIDAD, SU MODO DE ACCION DURANTE LA INICIACION DE LA SINTESIS Y SU BAJA ESTABILIDAD LIMITA SU DESARROLLO COMO ENZIMA UTIL PARA TALES FINES, EN ESTE PROYECTO ESPERAMOS OBTENER DATOS MOLECULARES IMPORTANTES PARA CONVERTIR LA ARN POLIMERASA DEL VHC EN UNA HERRAMIENTA UTIL EN ESTUDIOS DE EXPRESION GENICA, VIH\ VIRUS DE LA HEPATITIS C (VHC)\ RETROTRANSCRIPTASA\ ARN POLIMERASA\ FIDELIDAD\ FÁRMACOS ANTIVIRALES\ RESISTENCIA A FÁRMACOS\ BIOTECNOLOGÍA ver más
01/01/2013
CSIC
133K€
Perfil tecnológico estimado

Línea de financiación: concedida

El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2013-01-01
Presupuesto El presupuesto total del proyecto asciende a 133K€
Líder del proyecto
AGENCIA ESTATAL CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGA... No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.
Perfil tecnológico TRL 2-3 552M