Descripción del proyecto
LAS POLIMERASAS VIRALES TIENEN UN PAPEL CENTRAL EN LA REPLICACION Y TRANSCRIPCION DEL GENOMA DE ESTOS PATOGENOS, ESTAS PROTEINAS SON CAPACES DE DESEMPEÑAR MULTIPLES FUNCIONES RELACIONADAS CON LA SINTESIS DE ACIDOS NUCLEICOS, EN FUNCION DEL TIPO DEL GENOMA (DE RNA O DE DNA) Y LAS NECESIDADES ESPECIFICAS DE CADA FAMILIA DE VIRUS, LAS POLIMERASAS VIRICAS UTILIZAN ESTRATEGIAS Y MECANISMOS MUY DIVERSOS PARA ASEGURAR LA COPIA DEL MATERIAL GENOMICO, COMO PRINCIPALES PROTEINAS ENCARGADAS DE LA REPLICACION DE ESTOS PATOGENOS MOLECULARES, ESTAS ENZIMAS HAN SIDO OBJETO DE NUMEROSOS ESTUDIOS QUE SE HAN TRADUCIDO EN UN CONOCIMIENTO SIGNIFICATIVO DE SU ESTRUCTURA Y FUNCION, ESTO HA PERMITIDO DEMOSTRAR EL ALTO POTENCIAL BIOTECNOLOGICO DE ESTAS ENZIMAS EN PROCESOS DE AMPLIFICACION, GENOTIPADO Y SECUENCIACION, ADEMAS, EL ESTUDIO DE ESTAS POLIMERASAS TAMBIEN HA ESTADO ENFOCADO A SU UTILIZACION COMO DIANA DE AGENTES TERAPEUTICOS PARA EL TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES DE ORIGEN VIRICO, ACTUALMENTE, YA ESTAN SIENDO UTILIZADAS EN ENFERMEDADES TAN IMPORTANTES DESDE EL PUNTO DE VISTA CLINICO COMO EL SIDA O LA HEPATITIS CRONICA CAUSADA POR EL VIRUS DE LA HEPATITIS C (HCV), TENIENDO EN CUENTA ESTAS PREMISAS, EL OBJETIVO PRINCIPAL DEL PROYECTO ES EL DESARROLLO DE HERRAMIENTAS BASADAS EN POLIMERASAS VIRALES CON USO CLINICO Y BIOTECNOLOGICO, TRABAJANDO EN PARALELO CON POLIMERASAS DE TRES VIRUS DIFERENTES, TODOS LOS OBJETIVOS DESCRITOS EN ESTE PROYECTO TIENEN EN COMUN EL USO DE METODOS FLUOROMETRICOS PARA MEDIR LA ACTIVIDAD DE POLIMERIZACION, SE USARA UN FLUROFORO QUE INCREMENTA SU EMISION DE FLUORESCENCIA AL UNIRSE A ACIDOS NUCLEICOS DE DOBLE CADENA (DSRNA O DSDNA), ASI, LA PRODUCCION DE DSDNA O DSRNA POR PARTE DE LAS POLIMERASAS ESTUDIADAS, A PARTIR DE MOLDES DE CADENA SENCILLA, PERMITIRA LA UNION ESPECIFICA DEL FLUOROFORO, ESTA UNION PROVOCARA UN AUMENTO DE FLUORESCENCIA EMITIDA POR EL FLUOROFORO, QUE SE CORRESPONDERA CON LA ACTIVIDAD POLIMERASA,SE CARACTERIZARA UNA NUEVA POLIMERASA DE DNA CODIFICADA POR EL VIRUS CON FORMA DE BOTELLA DE ACIDIANUS (ABV), QUE INFECTA ARQUEAS TERMOFILAS, SU ESTRUCTURA PRIMARIA SUGIERE LA PRESENCIA DE UNA ALTA PROCESIVIDAD, ACTIVIDAD CORRECTORA DE ERRORES Y DE DESPLAZAMIENTO DE BANDA, POR LO QUE RESULTA MUY PROMETEDORA DESDE UN PUNTO DE VISTA BIOTECNOLOGICO,SE REALIZARA UN ESTUDIO POR EVOLUCION DIRIGIDA DEL SITIO ACTIVO DE LA POLIMERASA DE RNA DEPENDIENTE DE RNA (RDRP) DE HCV, CON EL PROPOSITO DE OBTENER VARIANTES CAPACES DE UTILIZAR DESOXIRIBONUCLEOTIDOS, TANTO PARA SER INCORPORADOS, COMO PARA SER USADOS DE MOLDE, LA OBTENCION DE VARIANTES DE ESTA POLIMERASA CON PROPIEDADES MODIFICADAS PODRIA SER EXPLOTADA PARA SU USO BIOTECNOLOGICO COMO RETROTRANSCRIPTASA INDEPENDIENTE DE INICIADORES, O COMO POLIMERASA DE RNA INDEPENDIENTE DE PROMOTORES,FINALMENTE, SE CONSTRUIRA UNA PLATAFORMA PARA LA SELECCION DE DROGAS DIRIGIDAS CONTRA LA RDRP DEL VIRUS ZIKA (ZIKAV), UN IMPORTANTE PATOGENO HUMANO DE RAPIDA EXPANSION PARA EL QUE NO EXISTE NINGUN AGENTE ANTIVIRAL EFECTIVO, ESTA PLATAFORMA SUPONDRA LA POSIBILIDAD DE COMPROBAR EL EFECTO INHIBITORIO DE DIFERENTES COMPUESTOS CONTRA LA RDRP DE MANERA RAPIDA, EFICIENTE Y SIN REQUERIR LA UTILIZACION DE INSTALACIONES ESPECIALES PARA SU FUNCIONAMIENTO,LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN ESTE PROYECTO TENDRIAN UN CARACTER CLARAMENTE TRANSLACIONAL, CREANDO HERRAMIENTAS BIOTECNOLOGICAS CON EFECTO EN LA PREVENCION, DIAGNOSTICO Y TERAPIA, LO QUE REDUNDARIA EN UN BENEFICIO DIRECTO PARA EL BIENESTAR DE LA SOCIEDAD, EVOLUCIÓN DIRIGIDA\INGENIERÍA DE PROTEÍNAS\BIOTECNOLOGÍA. VIRUS\POLIMERASAS DE DNA Y RNA\MEDICINA PERSONALIZADA