Descripción del proyecto
LA MIGRACION DE CELULAS MICROGLIALES TIENE LUGAR TANTO DURANTE LA COLONIZACION DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL EN DESARROLLO (MICROGLIA AMEBOIDE) COMO EN RESPUESTA A LESIONES O PATOLOGIAS DURANTE LA EDAD ADULTA (MICROGLIA ACTIVADA), EL PRESENTE PROYECTO PRETENDE UTILIZAR LA RETINA EMBRIONARIA DE CODORNIZ Y LA RETINA POSTNATAL Y ADULTA DE RATON COMO MODELOS PARA EL ANALISIS DE LA PARTICIPACION DE DIFERENTES MOLECULAS EN LOS MECANISMOS DE MIGRACION DE LAS CELULAS MICROGLIALES AMEBOIDES Y ACTIVADAS, SE CARACTERIZARA LA MORFOLOGIA Y ULTRAESTRUCTURA DE LOS PRECURSORES MICROGLIALES EN LA CABEZA DEL NERVIO OPTICO, ANTES DE QUE ENTREN EN LA RETINA EMBRIONARIA DE CODORNIZ, Y SE DETERMINARA LA COMPETENCIA DE LOS MISMOS PARA COLONIZAR LA RETINA EN DIFERENTES EDADES DEL DESARROLLO MEDIANTE EXPERIENCIAS DE TRANSPLANTES ISOTOPICOS Y HETEROCRONICOS EN CULTIVOS ORGANOTIPICOS DE RETINA EMBRIONARIA DE CODORNIZ (CORECS), ESTUDIAREMOS LA DINAMICA DE LA MIGRACION DE LAS CELULAS MICROGLIALES AMEBOIDES MEDIANTE CAPTURA DE IMAGENES A LAPSOS DE TIEMPO, UTILIZANDO LOS CORECS COMO SISTEMA MODELO, EN ESTE MODELO TAMBIEN SE DETERMINARA EL MODO DE MIGRACION DE LAS CELULAS MICROGLIALES TRAS EL TRATAMIENTO CON INHIBIDORES ESPECIFICOS DE MOLECULAS COMO LA TIROSINA-QUINASA SRC, ROCK, CALPAINA E INTEGRINAS, QUE PARTICIPAN EN LA MIGRACION DE CELULAS TUMORALES, SE PRETENDE COMPROBAR SI EL TIPO DE MIGRACION DE LAS CELULAS MICROGLIALES DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO ES ASIMILABLE AL MODELO AMEBOIDE O AL MODELO MESENQUIMAL DE MIGRACION DE LAS CELULAS TUMORALES, TENIENDO EN CUENTA LAS DIFICULTADES TECNICAS EN LOS ESTUDIOS DE MIGRACION SOBRE CORECS, DERIVADAS DE LA LIMITADA DISPONIBILIDAD DE HERRAMIENTAS MOLECULARES UTILES EN AVES, UTILIZAREMOS CULTIVOS ORGANOTIPICOS DE RETINA POSTNATAL DE RATON (CORPORS) EN LOS QUE ANALIZAREMOS EL COMPORTAMIENTO DE LAS CELULAS MICROGLIALES, COMO PASO PREVIO PARA ESTUDIOS EXPERIMENTALES EN ESTE MODELO, EN EL QUE HAY MAYORES POSIBILIDADES DE ACTUACION MOLECULAR, SEGUIDAMENTE, ESTUDIAREMOS LA EXPRESION DE POLI(ADP-RIBOSA) POLIMERASA-1 (PARP-1) EN EL MODELO DE CORPORS Y ANALIZAREMOS LOS EFECTOS DEL TRATAMIENTO EXPERIMENTAL CON INHIBIDORES DE PARP-1 SOBRE LA MUERTE CELULAR Y EL COMPORTAMIENTO DE LAS CELULAS MICROGLIALES, EN UN INTENTO DE DETERMINAR LA PARTICIPACION DE PARP-1 EN LA BIOLOGIA DE LAS CELULAS MICROGLIALES DURANTE EL DESARROLLO, FINALMENTE, PRETENDEMOS CONTINUAR NUESTROS ESTUDIOS SOBRE LA MIGRACION DE CELULAS MICROGLIALES ACTIVADAS EN LA RETINA ADULTA DE RATON TRAS LA INDUCCION DE MUERTE DE FOTORRECEPTORES POR LUZ INTENSA, ANALIZANDO LA EXPRESION DE DIFERENTES MOLECULAS QUE PODRIAN TENER UN PAPEL EN LA RESPUESTA DE LA MICROGLIA A LA FOTODEGENERACION (FRACTALQUINA, CD200 Y TENASCINA) ASI COMO LAS CARACTERISTICAS DEL STRESS OXIDATIVO GENERADO EN RETINAS FOTODEGENERADAS, EN EL QUE LA MICROGLIA ACTIVADA PUEDE TENER UN IMPORTANTE PAPEL,