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AGL2010-22229-C03-02

Financiado

VIRUS DE LA PESTE PORCINA AFRICANA (VPPA): ESTUDIOS SOBRE MORFOGENESIS Y DESARRO...

VIRUS DE LA PESTE PORCINA AFRICANA (VPPA): ESTUDIOS SOBRE MORFOGENESIS Y DESARROLLO DE VACUNAS DE VPPA DEFICIENTE EN REPLICACION LA MORFOGENESIS DEL VPPA ES UN PROCESO COMPLEJO QUE IMPLICA LA FORMACION DE DIFERENTES DOMINIOS DE LA PARTICULA VIRAL, EL PRIMER ACONTECIMIENTO MORFOGENETICO ES LA ADQUISICION DE MEMBRANAS DEL RETICULO ENDOPLASMATICO Y SU CONVERSI... ver más

01/01/2010

CSIC

109K€

Presupuesto del proyecto: 109K€

Líder del proyecto

AGENCIA ESTATAL CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGA... No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

TRL 2-3 | 552M€

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2010-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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Líder del proyecto

AGENCIA ESTATAL CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGA... No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

TRL 2-3 | 552M€

Presupuesto del proyecto 109K€

Descripción del proyecto LA MORFOGENESIS DEL VPPA ES UN PROCESO COMPLEJO QUE IMPLICA LA FORMACION DE DIFERENTES DOMINIOS DE LA PARTICULA VIRAL, EL PRIMER ACONTECIMIENTO MORFOGENETICO ES LA ADQUISICION DE MEMBRANAS DEL RETICULO ENDOPLASMATICO Y SU CONVERSION EN PRECURSORES DE MEMBRANAS VIRALES QUE DARAN LUGAR A LA ENVUELTA INTERNA DEL VIRUS, PROTEINAS QUE RESIDEN EN ESTAS MEMBRANAS, COMO P54 Y P17, JUEGAN UN PAPEL EN ESTE PROCESO, EN ESTE PROYECTO, INVESTIGAREMOS LA FUNCION DE LA PRENILTRANSFERASA DEL VPPA, QUE SE ENCUENTRA ASOCIADA A LAS MEMBRANAS PRECURSORAS Y SINTETIZA GERANILGERANIL DIFOSFATO, EN LA FORMACION DE LA ENVUELTA INTERNA, INVESTIGAREMOS TAMBIEN EL PAPEL DE LA PROTEINA P10, QUE INTERACCIONA CON DNA Y RESIDE EN EL NUCLEOIDE CENTRAL QUE CONTIENE EL GENOMA DEL VIRUS, EN LA ENCAPSIDACION Y CONDENSACION DEL DNA VIRAL, EN ESTOS ESTUDIOS, UTILIZAREMOS RECOMBINANTES DEL VPPA (ESTIRPE BA71V) QUE EXPRESAN INDUCIBLEMENTE LA PRENILTRANSFERASA O LA PROTEINA P10, SITUANDO SUS GENES BAJO EL CONTROL DE PROMOTORES INDUCIBLES POR IPTG,LOS PRODUCTOS PROTEOLITICOS DE LAS DOS POLYPROTEINAS DEL VIRUS, PP220 Y PP62, SON LOS COMPONENTES PRINCIPALES DEL ¿DOMINIO INTERMEDIO¿ QUE RODEA AL NUCLEOIDE, EL PROCESAMIENTO DE LAS POLIPROTEINAS POR LA PROTEASA PS273R VIRAL, PERTENECIENTE A LA FAMILIA SUMO-1 DE CISTEIN PROTEASAS, SE ENCUENTRA ESTRICTAMENTE CONTROLADO Y ACOPLADO AL ENSAMBLAJE CORRECTO DEL VIRUS, PARA INVESTIGAR LOS MECANISMOS IMPLICADOS EN ESTE CONTROL, NOS PROPONEMOS AVANZAR EN EL ESTUDIO DE LA PRESENCIA DE PUENTES DISULFURO Y REGULACION DE LA ACTIVIDAD DE LA PROTEASA POR AGENTES REDOX, QUE TAMBIEN REGULAN LA ACTIVIDAD DE SUMO-1 PROTEASAS CELULARES,LOS ESTUDIOS SOBRE MORFOGENESIS HAN MOSTRADO QUE SE PUEDEN PRODUCIR ESTIRPES DE VPPA DEFICIENTES EN REPLICACION MEDIANTE LA EXPRESION CONDICIONAL DE PROTEINAS REQUERIDAS PARA EL ENSAMBLAJE DEL VIRUS, PARA EXPLORAR LA POSIBILIDAD DE SU USO PARA EL DESARROLLO DE VACUNAS CANDIDATAS CONTRA LA PESTE PORCINA AFRICANA, CONSTRUIREMOS VIRUS INDUCIBLES EN EL AISLADO VIRULENTO BA71 QUE PRESENTA DOS VENTAJAS PRINCIPALES, PRIMERO, LA SECUENCIA DE SU GENOMA ES MUY SIMILAR A LA DE BA71V, LO QUE NOS PERMITE UTILIZAR LAS HERRAMIENTAS QUE HAN SIDO YA DESARROLLADAS PARA LA CONSTRUCCION DE VIRUS INDUCIBLES EN BA71V, SEGUNDO, BA71 PUEDE CRECER EN CELULAS COS, QUE PUEDEN SER TRANSFECTADAS EFICIENTEMENTE, Y EL VIRUS PRODUCIDO CONSERVA SU VIRULENCIA, CONSTRUIREMOS VIRUS QUE EXPRESEN INDUCIBLEMENTE LAS POLIPROTEINAS PP220, PP62 O AMBAS, PUESTO QUE SU REPRESION PRODUCE PARTICULAS ICOSAEDRICAS ¿VACIAS¿ QUE CARECEN DE LOS DOMINIOS INTERNOS (NUCLEOIDE Y DOMINIO INTERMEDIO), PERO POSEEN LOS EXTERNOS (CAPSIDA Y ENVUELTA INTERNA),SE CONSTRUIRAN TRES TIPOS DE VIRUS INDUCIBLES, DEPENDIENDO DEL SITIO DE INSERCION DEL GEN DEL REPRESOR LAC I: 1) VIRUS TK-, INSERTANDO EL REPRESOR EN EL LOCUS DE LA TIMIDINA KINASA, LO QUE GENERARA VIRUS ATENUADOS, 2) VIRUS CD2-, INSERTANDO EL REPRESOR EN EL HOMOLOGO VIRAL DEL CD2 CELULAR, LA ELIMINACION DE ESTE GEN INMUNOSUPRESOR PUEDE FAVORECER LA RESPUESTA INMUNE EN EL ANIMAL INFECTADO, 3) VIRUS TK+CD2+, EL REPRESOR SE INSERTA SIN MODIFICAR NINGUN GEN VIRAL, CON EL FIN DE OBTENER ESTIRPES VACUNALES MAS SEGURAS, EXAMINAREMOS EL EFECTO DE LA DELECION DEL GEN DE LA DNA POLIMERASA REPARATIVA, POL X, SOBRE LA REPLICACION DEL VIRUS IN VITRO E IN VIVO,EXPLORAREMOS TAMBIEN LA RELEVANCIA DEL VIRUS INTRACELULAR EN LA INFECCION DEL CERDO CONSTRUYENDO UN VIRUS INDUCIBLE EN LA PROTEINA PE120R QUE SE REQUIERE PARA EL TRANSPORTE D VPPA\VACUNAS DE VIRUS DEFICIENTES EN REPLICAC\MORFOGENESIS

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