Descripción del proyecto
EL PROYECTO PLANTEA LA INTEGRACION E INTENSIFICACION DEL ESFUERZO INVESTIGADOR DE TRES GRUPOS CON BUENOS PRECEDENTES DE TRABAJO COORDINADO, CON EL OBJETIVO DE DESARROLLAR NUEVAS VACUNAS BASADAS EN SUBUNIDADES VIRALES Y DISTINTAS ESTRATEGIAS DE PRESENTACION ANTIGENICA, PROPONE TAMBIEN PROSEGUIR EL ESTUDIO DE LAS IMPLICACIONES DE LA PATOGENICIDAD VIRAL EN EL DISEÑO DE VACUNAS SEGURAS Y MARCADORAS, EN LA IDENTIFICACION DE ELEMENTOS IMPLICADOS EN LA VIRULENCIA Y LA ATENUACION VIRAL, Y EN LA DEFINICION DE ESTRATEGIAS ANTIVIRALES ALTERNATIVAS, PARA ELLO SE PROPONE UTILIZAR COMO MODELOS DOS IMPORTANTES VIRUS RNA ANIMALES: EL DE LA FIEBRE AFTOSA (VFA) Y EL DE LA PESTE PORCINA CLASICA (PPC), LOS ESTUDIOS EMPLEARAN COMO HOSPEDADOR MODELO EL CERDO, ESPECIE DOMESTICA DE GRAN IMPORTANCIA, SUSCEPTIBLE A AMBOS VIRUS, EN EL CONTEXTO PARTICULAR DEL PRESENTE SUBPROYECTO, SE HAN PLANTEADO LOS SIGUIENTES OBJETIVOS: 1) DISEÑO DE CONSTRUCIONES PEPTIDICAS MULTIMERICAS QUE INTEGRAN EPITOPOS B Y T DEL VFA DE PROBADA VALIDEZ COMO CANDIDATOS VACUNALES, Y PUESTA A PUNTO DE PROCESOS EFICACES DE SINTESIS QUE PERMITAN OPTIMIZAR SU PRODUCCION CON VISTAS A SU UTILIZACION EN ENSAYOS DE VACUNACION A GRAN ESCALA, LAS CONSTRUCCIONES TENDRAN COMO PROTOTIPO EL DENDRIMERO "B4T", UTILIZADO CON EXITO EN EXPERIMENTOS DE PROTECCION DE PORCINOS FRENTE A VFA DEL SEROTIPO C, EN BASE A DICHO DISEÑO, SE DESARROLLARAN VERSIONES HOMOLOGAS INCORPORANDO EPITOPOS B DE OTROS SEROTIPOS, ASI COMO EPITOPOS T IDENTIFICADOS EN PROTEINAS NO ESTRUCTURALES DE VFA, FINALMENTE, SE DEDICARA ESPECIAL ESFUERZO A LA OPTIMIZACION SINTETICA DE LAS CONSTRUCCIONES, DESARROLLANDO PROTOCOLOS EFICIENTES Y ESCALABLES QUE ASEGUREN UNA PRODUCCION SUFICIENTE PARA ENSAYOS PRECLINICOS, 2) DISEÑO Y DESARROLLO DE SISTEMAS PEPTIDICOS ANALOGOS BASADOS EN EPITOPOS B Y T DEL VPPC,LA DISPONIBILIDAD DE SECUENCIAS DE EPITOPOS B Y T RAZONABLEMENTE BIEN DEFINIDOS PARA ESTE VIRUS RNA ANIMAL HACE POSIBLE UN ABORDAJE PARALELO AL DEL OBJETIVO 1, EN EL QUE SE PONDRAN A PUNTO DIVERSAS CONSTRUCCIONES CUYA CAPACIDAD VACUNAL SE ENSAYARA EN COLABORACION CON OTRO SUBPROYECTO, 3) OTRAS CONTRIBUCIONES A LOS RESTANTES SUBPROYECTOS EN TEMAS DE PROTEOMICA Y QUIMICA DE PEPTIDOS-PROTEINAS,LAS ACTIVIDADES PROPUESTAS INCLUYEN, ENTRE OTRAS, (I) LA SINTESIS DE LA SECCION C-TERMINAL DE LA PROTEINA 3A, ASI COMO 3B, 3BB Y 3BBB, CON VISTAS A SU POSTERIOR ESTUDIO ESTRUCTURAL POR RMN, (II) LA PREPARACION DE UNA BIBLIOTECA DE PEPTIDOS SOLAPANTES DE 3A, A EVALUAR COMO POTENCIALES INHIBIDORES DE LA DIMERIZACION DE 3A DURANTE EL PROCESO INFECTIVO; (III) LA IDENTIFICACION POR TECNICAS PROTEOMICAS DE PROTEINAS Y MODIFICACIONES POST-TRADUCCIONALES IMPLICADAS EN LOS PROCESOS DE INTERNALIZACION Y TRANSPORTE DEL VIRUS EN LA CELULA INFECTADA, Y DE OTROS FACTORES IMPLICADOS EN LA PATOGENICIDAD VIRAL, Vacunas de subunidades\vacunas marcadoras\péptidos\dendrímeros\epítopos B y T\fiebre aftosa\peste porcina clásica