Descripción del proyecto
SE HAN CLONADO MUCHOS GENES INVOLUCRADOS EN LA SINTESIS DE CAROTENOIDES QUE HAN SIDO UTILIZADOS EN INGENIERIA GENETICA PARA OBTENER PLANTAS QUE PRODUCEN Y ACUMULAN MAS CAROTENOS, SE SABE POCO SOBRE LOS FACTORES QUE REGULAN LA EXPRESION DE ESTOS GENES EN LAS PLANTAS SUPERIORES LIMITANDO EL USO DE LAS TECNICAS PREDICTIVAS EN INGENIERIA METABOLICA, SOBRETODO AL DISEÑAR PROGRAMAS DE INGENIERIA GENETICA COMPLEJOS PARA ALTERAR LA COMPOSICION Y CONTENIDO DE CAROTENOS EN PLANTAS MAS ALLA DE SISTEMA MODELOS, EL MAIZ, SE CULTIVADO EN TODO EL MUNDO, TIENE UN PAPEL IMPORTANTE EN LA ALIMENTACION HUMANA, EN LA PRODUCCION DE PIENSO Y EN BIOENERGIA, SE HA DEMOSTRADO QUE LA ENZIMA DEL MAIZ β-CAROTENO HIDROXILASA 2 (ZMBCH2) DIRIGE LOS PASOS CRITICOS EN LA CONVERSION DE β-CAROTENO A ZEAXANTINA EN EL ENDOSPERMO, LOS NIVELES DE TRANSCRITO DEL GEN ZMBCH2 SE CORRELACIONAN NEGATIVAMENTE CON ELEVADOS NIVELES DE β-CAROTENO Y POSITIVAMENTE CON NIVELES ELEVADOS DE ZEAXANTINA, GRACIAS AL PROYECTO FINANCIADO POR MINECO (ACABA EN DICIEMBRE 2014) EL IP HA DEMOSTRADO QUE LA TRASCRIPCION DE ZMBCH2 SE PRODUCE PREFERENTEMENTE EN EL ENDOSPERMO DE MAIZ SIENDO REGULADA POR SU DESARROLLO, PARA PROFUNDIZAR EN LOS MECANISMOS QUE REGULAN LA EXPRESION DEL GEN ZMBCH2, AISLAMOS SU REGION 5¿-FLANQUEANTE Y DESCUBRIMOS QUE UN FRAGMENTO DE 774 BP CONTENIA TODOS LOS ELEMENTOS CIS REGULATORIOS NECESARIOS PARA UNA ELEVADA EXPRESION DEL GEN GUS EN EL ENDOSPERMO DE ARROZ TRANSGENICO, LA REGION ESENCIAL DEL PROMOTOR DE 774 BP EN 5 DE ZMBCH2 CONTENIA UNA COPIA DE LA CAJA PROLAMINA (P-BOX) Y UNA COPIA DEL MOTIVO AACA, LOS CUALES SON CONOCIDOS LUGARES DE UNION PARA EL FACTOR PROLAMIN-BOX BINDING ESPECIFICO DE LA SEMILLA DE MAIZ [PBF, UN FACTOR DE TRANSCRIPCION (FT) DOF (DNA-BINDING WITH ONE FINGER)] Y GAMYB (GA-REGULATED MYB, A FT DE LA CLASE R2R3-MYB C) FTS, RESPECTIVAMENTE, SE HA DEMOSTRADO QUE PBF Y GAMYB ESTAN INVOLUCRADOS EN DETERMINAR LA EXPRESION ESPECIFICA DEL ENDOSPERMO DE MUCHOS GENES QUE CODIFICAN PARA PROTEINAS DE ALMACENAMIENTO DE CEREALES, EN EL PROYECTO ACTUAL, UTILIZAREMOS ARROZ PARA PROFUNDIZAR EN LA CARACTERIZACION DE LOS FTS DE MAIZ, ZMPBF Y ZMGAMYB Y ELUCIDAR COMOCACTUAN EN LA REGULACION DEL GEN ZMBCH2, SOBRE-EXPRESION O KNOCK-OUT DE UNO O LOS DOS FT A LA VEZ EN MAIZ, SE UTILIZARA PARA DETECTAR DE FORMA SIMULTANEA OTROS GENES ZMBCH2 ENDOGENOS, LA EXPRESION DE GENES CAROTENOGENICOS, Y DE GENES RELACIONADOS CON LA RUTA DEL MEP, CONCOMITANTEMENTE ANALIZAREMOS LOS PERFILES DE CAROTENOS EN DIFERENTES ORGANOS Y EN EL ENDOSPERMO EN ETAPAS DIFERENTES DE DESARROLLO DE LA SEMILLA, Y ASI ELUCIDAR EL MECANISMO DE EXPRESION DEL GEN ZMBCH2 Y SU REGULACION POR ESOS FTS, LOS RESULTADOS ESPERADOS DEL PROYECTO PROPORCIONARAN CONOCIMIENTOS, VALIOSOS Y NECESARIOS, SOBRE LOS MECANISMOS DE CONTROL MOLECULARES DE LA EXPRESION DEL GEN ZMBCH2 Y LA ACUMULACION DE CAROTENOIDES EN EL ENDOSPERMO DE MAIZ DURANTE EL DESARROLLO DE LA SEMILLA, EL PROMOTOR DE ZMBCH2 Y LOS GENES QUE CODIFICAN PARA LOS TF AISLADOS Y CARACTERIZADOS ESPECIFICOS DE LA SEMILLA SERAN HERRAMIENTAS MOLECULARES ADICIONALES MUY UTILES PARA UNA INGENIERIA METABOLICA MAS PRECISA, ESPERAMOS QUE LOS RESULTADOS DE ESTE PROYECTO CONTRIBUYAN A LA CONSOLIDACION DEL IP COMO UN LIDER MUNDIAL EN EL CAMPO DE LOS CAROTENOIDES Y FAVOREZCAN AUN MAS LAS COLABORACIONES CON VARIOS DE LOS EXCELENTES GRUPOS ESPAÑOLES QUE INVESTIGAN OTROS ASPECTOS DE LA BIOQUIMICA Y LA BIOLOGIA MOLECULAR DE LOS CAROTENOIDES, MAIZ (ZEA MAYS)\REGULACION\CAROTENOIDES\GEN CAROTENOGENICO\PROMOTOR\FACTOR DE TRANSCRIPCION