INVESTIGACION DEL MECANISMO DE ACUMULACION DE CAROTENOIDES EN EL ENDOSPERMO DE A...
EL OBJETIVO PRINCIPAL DEL PROYECTO ES LA OBTENCION DE LINEAS DE ARROZ TRANSGENICAS QUE EXPRESEN COMBINACIONES DIFERENTES DE 6 GENES RELACIONADOS CON LA RUTA METABOLICA DE LOS CAROTENOIDES. ESTOS GENES SON: ARABIDOPSIS THALIANA DXS...
EL OBJETIVO PRINCIPAL DEL PROYECTO ES LA OBTENCION DE LINEAS DE ARROZ TRANSGENICAS QUE EXPRESEN COMBINACIONES DIFERENTES DE 6 GENES RELACIONADOS CON LA RUTA METABOLICA DE LOS CAROTENOIDES. ESTOS GENES SON: ARABIDOPSIS THALIANA DXS (GEN 1-DEOXI-D-XILULOSA 5-FOSFATO SINTASA), MAIZ (ZEA MAYS) DXR (GEN 1-DEOXI-D-XILULOSA 5-FOSFATO REDUCTOISOMERASA), MAIZ HDR (GEN HIDROXIMETILBUTENIL DIFOSFATO REDUCTASA), A. THALIANA OR (EL GEN ORTOLOGO DEL GEN ORANGE DE LA COLIFLOR), MAIZ PSY1 (GEN FITOENO SINTASA 1) Y PANTOEA ANANATIS CRTI (GEN FITOENO DESATURASA). LOS PERFILES DIFERENTES DE CAROTENOIDES QUE OBTENDREMOS EN LAS SEMILLAS NOS SERVIRAN PARA DISECCIONAR Y ELUCIDAR EL MECANISMO FUNDAMENTAL QUE REGULA LA ACUMULACION DE CAROTENOIDES COMO LA PRO-VITAMINA A EN ARROZ, UN CULTIVO MUY IMPORTANTE PARA LA SOSTENIBILIDAD ALIMENTARIA DE LOS PAISES EN VIAS DE DESARROLLO. ESTOS GENES YA ESTAN DISPONIBLES. EL PROYECTO SE INICIARA CON LA PREPARACION DE LOS VECTORES DE TRANSFORMACION UTILIZANDO 5 PROMOTORES ESPECIFICOS DE ENDOSPERMO PARA LOS TRANSGENES Y UN PROMOTOR CONSTITUTIVO, EL UBI-1 DEL MAIZ PARA EL GEN DE SELECCION. LA CO-INTRODUCCION DE LOS GENES SERA POR TRANSFERENCIA DIRECTA MEDIANTE BOMBARDEO CON MICROPARTICULAS DE ORO. EN NUESTROS RESULTADOS PREVIOS DONDE CO-INTRODUCIMOS 5 GENES EN MAIZ OBSERVAMOS QUE EN EL CONJUNTO COMBINATORIAL RESULTANTE UN 20% DE LAS PLANTAS POSEIA Y EXPRESABAN TODOS LOS GENES INTRODUCIDOS E INTEGRADOS EN UN MISMO LOCUS GENETICO, SIN OBSERVARSE SEGREGACION EN LAS GENERACIONES POSTERIORES. ESTO DE DEBE AL MECANISMO DE INTEGRACION UTILIZADO POR LOS TRANSGENES Y QUE ESTA SIENDO ELUCIDADO EN DETALLE POR NUESTRO GRUPO CON MAS 20 AÑOS APORTANDO DATOS A ESTE TEMA. EL ANALISIS DE TODO EL CONJUNTO COMBINATORIAL DE PLANTAS OBTENIDAS NOS PERMITIRA DISECCIONAR LA RUTA DE LOS CAROTENOIDES Y RECONSTRUIRLA EN SU FORMA ORIGINAL O CON ALTERACIONES PUNTUALES, PROPORCIONANDONOS LAS BASES PARA SU ENTENDIMIENTO, FACILITANDONOS POSTERIORMENTE SU INGENIERIA PARA LA PRODUCCION DE METABOLITOS NUEVOS. UN REQUISITO CLAVE PARA EL EXITO DE LA TRANSFORMACION CON VARIOS GENES ES LA DISPONIBILIDAD DE UN SISTEMA EFICIENTE PARA SU INTRODUCCION, TAL Y COMO DISPONEMOS EN EL LABORATORIO. REGENERAREMOS HASTA 100 PLANTAS TRANSGENICAS DIFERENTES EN 24 MESES (SON SUFICIENTES PARA CAPTURAR TODAS LAS COMBINACIONES). LA SELECCION DE LAS PLANTAS TRANSGENICAS DE HARA MEDIANTE LA OBSERVACION DEL FENOTIPO DE LOS GRANOS DE ARROZ Y A NIVEL DE EXPRESION DE MRNA EN EL ENDOSPERMA INMADURO. ESTAS ANALITICAS SERAN COMPLEMENTADAS CON UN ANALISIS DEL METABOLOMA. LA RECOLECCION DE TODOS ESTOS DATOS JUNTAMENTE CON NUESTRA EXPERIENCIA EN INGENIERIA DE RUTAS METABOLICAS, NOS PERMITIRA IDENTIFICAR POSIBLES EFECTOS PLEIOTROPICOS EN OTRAS RUTAS (COMO TOCOFEROL, ABA Y STRIGOLACTONA) CONSECUENCIA DE LA INTRODUCCION DE LOS TRANSGENES. ESTA INVESTIGACION PROPORCIONARA CONOCIMIENTOS BASICOS APLICABLES A LA INGENIERIA DE LAS RUTAS METABOLICAS Y PARALELAMENTE GENERAREMOS RESULTADOS PATENTABLES CON INTERES ECONOMICO. ESTE PROPUESTA SE APOYA Y EXTIENDE EL PROYECTO PREVIO CONCEDIDO POR MICINN TIPO C A P CHRISTOU BFU2007-61413, Y SITUA A NUESTRO GRUPO EN UNA POSICION CONSOLIDADA DE LIDERAJE MUNDIAL EN ESTE TEMA. NUESTROS RESULTADOS PRELIMINARES INDICAN CLARAMENTE QUE PODREMOS SOBREPASAR LOS PROBLEMAS BASICOS QUE LIMITAN LOS NIVELES DE CAROTENOIDES Y SU ESTABILIDAD EN GOLDEN RICE 2. ESTA PROPUESTA EN ARROZ NO SE SOLAPA CON NINGUNO DE NUESTROS PROYECTOS ACTIVOS EN EL LABORATORIO. RROZ\RUTA METABOLICA\INGENIERIA GENETICA\PROVITAMINA A\CAROTENOIDESver más
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