Descripción del proyecto
LA CALIDAD Y SEGURIDAD DE LOS ALIMENTOS SON FUNDAMENTALES PARA UNA DIETA SALUDABLE, CUALIDADES TAMBIEN APLICABLES A LOS PRODUCTOS DESTINADOS A LA ALIMENTACION ANIMAL, TANTO POR EL IMPACTO ECONOMICO COMO POR SU INFLUENCIA EN LA SALUD HUMANA, EN ESPAÑA, AL IGUAL QUE OTROS PAISES INDUSTRIALIZADOS, EL MAIZ CON ELEVADO CONTENIDO EN PRO-VITAMINA A (PVA) ES UN PRODUCTO CON GRAN POTENCIAL PARA LA FABRICACION DE PIENSO TANTO PARA LA INDUSTRIA AVICOLA, PORCINA COMO PARA LA ACUICULTURA, EL MAIZ ES UN INGREDIENTE FUNDAMENTAL EN LA INDUSTRIA AGROALIMENTARIA, PERO NUESTRO PAIS SOLO PRODUCE EL 25% DEL QUE NECESITA, EL RESTO SE IMPORTA (CASI EXCLUSIVAMENTE MAIZ BT), LA DEGRADACION DEL PVA ES UN PROBLEMA CRITICO YA QUE HASTA EL 60% SE PIERDE DURANTE EL ALMACENAMIENTO, CONOCIENDOSE POCO DE LOS GENES RESPONSABLES DE ESTA DEGRADACION, CONSEGUIR LA RETENCION DE PVA ES ESENCIAL PARA MAXIMIZAR EL VALOR NUTRICIONAL DE LOS CULTIVOS, EN ESTE PROYECTO ELUCIDAREMOS LOS MECANISMOS QUE SUSTENTAN LA ESTABILIDAD DURANTE EL ALMACENAMIENTO A LARGO PLAZO DEL B-CAROTENO MEDIANTE LA IDENTIFICACION Y MODULACION DE LOS GENES IMPLICADOS EN SU SINTESIS, CATABOLISMO Y DEGRADACION EN EL ENDOSPERMO DEL MAIZ, ASI ELIMINAREMOS EL ULTIMO PASO LIMITANTE EN LA BIOFORTIFICACION CON PVA DE CULTIVOS Y TENDRA UN GRAN IMPACTO EN LA CALIDAD DE LOS ALIMENTOS Y PIENSOS, LA ARROZ-LIPOXIGENASA 1 (OSLOX1) ES RESPONSABLE DE CATALIZAR LA OXIDACION DEL B-CAROTENO Y DEL DETERIORO DE LA CALIDAD DE LA SEMILLA, SE DEMOSTRO QUE LA REDUCCION DE LA EXPRESION DEL GEN OSLOX1 RESULTABA EN UNA MENOR DEGRADACION DE CAROTENOIDES EN 'GOLDEN RICE 1', EL BLOQUEO DE LA EXPRESION DE LOS GENES ORTOLOGOS DE MAIZ DE OSLOX1 PUEDE SER LA ESTRATEGIA ADECUADA PARA REDUCIR LAS PERDIDAS DE PVA POSCOSECHA DURANTE EL ALMACENAJE, LAS ENZIMAS ZMLOX1 Y ZMLOX2 TIENEN ALTAS SIMILITUDES CON OSLOX1 A NIVEL DE AMINOACIDOS (80,3% Y 78,7%, RESPECTIVAMENTE; RESULTADOS BIO2014-54441-P), EL BLOQUEO DE LA EXPRESION DE LOS GENES ZMLOX1 Y/O ZMLOX2 DEBERIA RESULTAR EN UNA REDUCCION DE LA DEGRADACION DE B-CAROTENO, FRENANDO EL DETERIORO DE LAS SEMILLAS DURANTE EL ALMACENAJE, A TRAVES DEL PROYECTO BIO2011-22525 DEMOSTRAMOS QUE BLOQUEANDO LA EXPRESION DE ZMBCH2 AUMENTABA DE FORMA SUSTANCIAL LA ACUMULACION DE B-CAROTENO EN EL ENDODERMO DEL MAIZ, EN ESTA PROPUESTA UTILIZAREMOS CRISPR/CAS9 PARA BLOQUEAR INDIVIDUALMENTE LA EXPRESION DE LOS GENES DEL MAIZ BCH2, CCD1, LOX1, LOX2 Y SIMULTANEAMENTE LA EXPRESION DE LOS GENES LOX1 Y LOX2, INVESTIGAREMOS LA ACUMULACION Y ESTABILIDAD DEL B-CAROTENO E IDENTIFICAREMOS QUE ISOENZIMA LOX ES LA RESPONSABLE DE DEGRADACION DE PVA DURANTE EL PROCESO DE ALMACENAJE, POSTERIORMENTE LINEAS MUTADAS SE CRUZARAN CON LA LINEA PH3 CON UN CONTENIDO MUY ELEVADO EN B-CAROTENO (LINEA GENERADA EN BIO2011-22525, REGISTRO DE VARIEDADES PROTEGIDAS ESPAÑOLAS NRVP 20135050 Y TESTADA EN POLLOS Y PECES PM2010PKB-00746) PARA DETERMINAR SI LAS NUEVAS LINEAS SINTETICAS SON CAPACES DE AUTO INDUCIR LA SOBREPRODUCCION DE B-CAROTENO EN EL ENDOSPERMO DURANTE LA MADURACION DE LA SEMILLA, Y MANTENER ESTOS NIVELES DURANTE EL ALMACENAJE, ES IMPORTANTE DESTACAR QUE NUESTRO PROYECTO ABARCA UNA PRUEBA DE ALIMENTACION DE AVES QUE ELEVARA EL NIVEL DE TECNOLOGIA DE PREPARACION A LA FASE DE PRE-COMERCIALIZACION, ESTA INVESTIGACION ABORDA EL RETO INCLUIDO EN EL PLAN ESTATAL (2) BIOECONOMICA, SOSTENIBILIDAD DE LOS SISTEMAS DE PRODUCCION PRIMARIA Y FORESTALES, SEGURIDAD Y CALIDAD ALIMENTARIA, INVESTIGACION MARINA Y MARITIMA Y BIOPRODUCTOS MAÍZ\PROVITAMINA A\B-CAROTENO HIDROXILASA 2\CAROTENOIDE CLEAVAGE DIOXYGENASE 1\9-LIPOXYGENASE\EDICION DEL GENOMA\CRISPR/CAS9 MULTIPLEXING