Descripción del proyecto
LA FRESA ES EL FRUTO BLANDO DE MAYOR IMPORTANCIA COMERCIAL A NIVEL MUNDIAL. NUESTRO PAIS OCUPA EL SEGUNDO PUESTO ENTRE LOS PAISES PRODUCTORES DE FRESA. DEBIDO AL CARACTER DE FRUTO BLANDO, Y AL RAPIDO REBLANDECIMIENTO QUE SUFRE DURANTE LA MADURACION, SE ESTIMA QUE ENTRE EL 5 Y EL 25% DE LA PRODUCCION SE PIERDE DEBIDO A LA SOBREMADURACION Y LAS INFECCIONES FUNGICAS ASOCIADAS A ESTE PROCESO. EL RETRASAR O DISMINUIR EL REBLANDECIMIENTO DEL FRUTO ES POR TANTO, UNO DE LOS PRINCIPALES OBJETIVOS DE LOS PROGRAMAS DE MEJORA GENETICA EN FRESA. EL DESMANTELAMIENTO DE LA PARED CELULAR Y LA DISMINUCION DE LA TURGENCIA DEL FRUTO SE HAN SEÑALADO COMO LOS PRINCIPALES PROCESOS CAUSANTES DEL REBLANDECIMIENTO, SI BIEN ESTE ULTIMO ASPECTO SE CONSIDERA DE MENOR IMPORTANCIA QUE LOS CAMBIOS EN LA PARED CELULAR Y POR ELLO HA RECIBIDO UNA MENOR ATENCION. A NIVEL DE PARED CELULAR, DURANTE LA MADURACION DE LA FRESA SE OBSERVA LA CASI TOTAL DISOLUCION DE LA LAMINA MEDIA, UN AUMENTO DE LA SOLUBILIZACION Y DESPOLIMERIZACION DE LAS PECTINAS Y, DEPENDIENDO DEL CULTIVAR, UNA DESPOLIMERIZACION DE LOS XILOGLUCANOS. EN PROYECTOS ANTERIORES, SE OBSERVO QUE EL SILENCIAMIENTO DE LOS GENES PECTATO LIASA (FAPLC) Y POLIGALACTURONASA (FAPG1), QUE CATALIZAN LA ROTURA DE PECTINAS DESMETILADAS, REDUCE EL REBLANDECIMIENTO EN FRESA, INCREMENTANDO LA VIDA POSTCOSECHA DE LOS FRUTOS. TAMBIEN SE HAN OBTENIDO PLANTAS CON UN GEN QUE CODIFICA UNA B-GALACTOSIDASA SILENCIADO. ESTUDIOS PRELIMINARES INDICAN UN LIGERO INCREMENTO EN LA FIRMEZA DEL FRUTO EN ALGUNAS LINEAS ANTIB-GAL, SUGIRIENDOSE QUE LA DEGRADACION DE LAS CADENAS LATERALES NEUTRAS DE LAS PECTINAS TAMBIEN INFLUYE SIGNIFICATIVAMENTE EN EL REBLANDECIMIENTO. EN EL MARCO DEL PROYECTO ANTERIOR, AGL2008-02356, SE HAN OBTENIDO NUEVAS LINEAS TRANSGENICAS CON OTRO GEN DE POLIGALACTURONASA (FAPG2) SILENCIADO, ASI COMO DOBLES TRANSFORMANTES (FAPG1-FAPG2) CON LOS DOS GENES DE POLIGALACTURONASA DESCRITOS EN FRUTO DE FRESA SILENCIADOS. EL PRINCIPAL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES PROFUNDIZAR EN EL ESTUDIO DEL PAPEL DE LOS GENES PECTATO LIASA, POLIGALACTURONASA Y B-GALACTOSIDASA EN LOS CAMBIOS DE TEXTURA QUE SUFRE LA FRESA DURANTE SU MADURACION. PARA ELLO, SE PROPONE, EN PRIMER LUGAR, CARACTERIZAR FENOTIPICAMENTE LAS NUEVAS LINEAS TRANSGENICAS ANTIFAPG2 Y ANTIFAPG1-FAPG2, EVALUANDO TANTO LA FIRMEZA DE FRUTO COMO LOS CAMBIOS QUE TENGAN LUGAR A NIVEL DE ACTIVIDAD ENZIMATICA Y EN LAS PECTINAS DE LA PARED CELULAR. EN SEGUNDO LUGAR, SE PROPONE PROFUNDIZAR EN EL ESTUDIO DE LAS MODIFICACIONES QUE SUFRE LA PARED CELULAR DURANTE EL REBLANDECIMIENTO MEDIANTE EL ANALISIS DETALLADO DE LAS DIFERENTES FRACCIONES DE PECTINAS CON LA TECNICA DE MICROSCOPIA DE FUERZA ATOMICA (AFM) Y MEDIANTE INMUNOHISTOQUIMICA CON ANTICUERPOS MONOCLONALES FRENTE A DOMINIOS PECTICOS ESPECIFICOS. EN ESTE OBJETIVO SE UTILIZARAN FRUTOS TESTIGO EN DISTINTOS ESTADIOS DE DESARROLLO, ASI COMO FRUTOS DE LAS LINEAS ANTIFAPG1, ANTIPLC Y ANTIB-GAL. MEDIANTE EL AFM SE PODRA OBTENER UNA VISION DETALLADA DE LOS CAMBIOS QUE SUFREN LAS PECTINAS EN LONGITUD, RAMIFICACION Y GRADO DE COMPLEJIDAD DURANTE LA MADURACION DEL FRUTO, Y DETERMINAR CUALES DE ESTOS CAMBIOS SE CORRELACIONAN CON LA PERDIDA DE FIRMEZA. LA INMUNOHISTOQUIMICA NOS PERMITIRA IDENTIFICAR IN SITU QUE ESTRUCTURAS PECTICAS SON RELEVANTES EN EL PROCESO DE MADURACION. FINALMENTE, SE PROPONE INICIAR UN ESTUDIO PARA DETERMINAR EL PAPEL DE LAS RELACIONES HIDRICAS DEL FRUTO EN LOS CAMBIOS EN TEXTURA QUE TIENEN LUGAR DURANTE LA MADURACION. RESA\GALACTOSIDASA\PECTATO LISASA\POLIGALACTURONASA\PARED CELULAR\PECTINAS\FIRMEZA\MADURACION\REBLANDECIMIENTO