Descripción del proyecto
EL ESTABLECIMIENTO DEL EJE DERECHA/IZQUIERDA DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO ES UN PASO CRITICO EN LA FORMACION DEL PATRON CORPORAL DE LOS VERTEBRADOS, DETERMINANDO LA POSICION ASIMETRICA DE ALGUNOS ORGANOS INTERNOS, EL CORAZON ES EL PRIMER ORGANO QUE MUESTRA SIGNOS DE ASIMETRIA DERECHA/IZQUIERDA EN EL EMBRION, LAS ALTERACIONES EN LA ORIENTACION DE ESTAS CAMARAS SUELEN SER LA CAUSA DE UN ALTO NUMERO DE CARDIOPATIAS CONGENITAS ESTRUCTURALES, TALES COMO DOBLE SALIDA DEL VENTRICULO DERECHO (DORV), TRANSPOSICION DE LOS GRANDES VASOS (TGA) Y/O TETRALOGIA DE FALLOT, PITX-2 ES UN FACTOR DE TRANSCRIPCION MIEMBRO DE LA FAMILIA DE GENES HOMEOBOX QUE JUEGA UN PAPEL CENTRAL EN LA SEÑALIZACION MOLECULAR DERECHA/IZQUIERDA EN EL EMBRION, ACTUANDO EN LA FASE FINAL DE LA CASCADA NODAL /LEFTY (BURDINE Y SCHIER, 2000), LA EXPRESION DE ESTE FACTOR DE TRANSCRIPCION SE INICIA EN LA PORCION IZQUIERDA DEL MESODERMO LATERAL Y CONTINUA DURANTE LOS PROCESOS DE FORMACION Y DIFERENCIACION EN DIFERENTES TEJIDOS Y ORGANOS COMO EL ESTOMAGO Y EL CORAZON, HASTA EL MOMENTO, TRES ISOFORMAS DIFERENTES DE PITX2 HAN SIDO IDENTIFICADAS EN RATON (PITX2A, PITX2B Y PITX2C), Y SE HA DESCRITO UNA CUARTA ISOFORMA (PITX2D) EN HUMANOS (COX ET AL, 2002), DE TODAS LAS ISOFORMAS DE ESTE FACTOR DE TRANSCRIPCION, ES LA ISOFORMA PITX2C LA MAS REPRESENTADA EN EL CORAZON EMBRIONARIO Y ADULTO, EN NUESTRO GRUPO DE INVESTIGACION, HEMOS ANALIZADO LOS PATRONES DE EXPRESION DE PITX2C DURANTE EL DESARROLLO CARDIACO (CAMPIONE ET AL, 2001) DEMOSTRANDO QUE PITX2C PRESENTA UN PATRON DE EXPRESION DINAMICO Y REGIONALIZADO DURANTE LA CARDIOGENESIS, SIN EMBARGO, EL PAPEL QUE JUEGA PITX2 EN LOS PROCESOS MOLECULARES Y MORFOGENETICOS QUE CONDUCEN A LA FORMACION DEL CORAZON ESTA AUN POR ESCLARECER, LA GENERACION DE MUTANTES CONDICIONALES TEJIDO-ESPECIFICO EN EL MIOCARDIO ATRIAL Y VENTRICULAR, RESPECTIVAMENTE, PARA PITX2 HA PERMITIDO OBSERVAR QUE LA FALTA DE FUNCION DE PITX2 EN ESTOS TEJIDOS CONDICIONA TEMPORALMENTE LA MORFOGENESIS CARDIACA, DADO QUE EXISTE UNA POSICION ECTOPICA DEL CORAZON EMBRIONARIO, NO OBSTANTE, ESTA ALTERACION PERMITE SU VIALIBILIDAD TANTO MORFOGENETICA COMO FUNCIONAL HASTA EL ESTADIO ADULTO, AUNQUE ESTA ULTIMA ESTA PARCIALMENTE COMPROMETIDA, EL ANALISIS DE EXPRESION GENICA (MRNA Y MICRORNA) POR MICROARRAYS COMPARANDO LAS CONDICIONES SILVESTRE Y MUTANTE PARA PITX2 HA REVELADO QUE DISTINTOS FACTORES DE TRANSCRIPCION Y DE CRECIMIENTO ESTAN ALTERADOS DEBIDO A LA EXPRESION ATENUADA DE PITX2, ADEMAS, LOS RESULTADOS DE LOS EXPERIMENTOS COMPARATIVOS DE EXPRESION DE MICRORNAS HAN REVELADO QUE EXISTE UN ALTO NUMERO DE MICRORNA INCREMENTADOS Y DISMINUIDOS POR LA FALTA DE FUNCION DE PITX2 EN EL MIOCARDIO VENTRICULAR, ESTOS DATOS NOS HAN PERMITIDO POSTULAR UNA HIPOTESIS POR LA CUAL PITX2 CONTROLA LA EXPRESION TRANSCRIPCIONAL DE DETERMINADOS MICRORNAS EN EL CORAZON EN DESARROLLO Y DE ESTE MODO CONTROLA A SU VEZ LOS NIVELES DE EXPRESION DE DETERMINADOS RNA MENSAJEROS, POR ELLO, EN ESTE PROYECTO NOS PROPONEMOS ANALIZAR LA CONTRIBUCION DE PITX2 EN LA FORMACION DEL CANAL ATRIOVENTRICULAR DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO DEL CORAZON, MEDIANTE LA GENERACION DE MUTANTES CONDICIONALES DE PITX2, ADEMAS ANALIZAREMOS EL PAPEL REGULADOR DE PITX2 EN LA EXPRESION TEJIDO-ESPECIFICO DE DISTINTOS MRNAS Y MICRORNAS, FINALMENTE REALIZAREMOS UN ESTUDIO DETALLADO DE LA REGULACION TRANSCRIPCIONAL DE DISTINTOS MICRORNAS Y DE SUS CONTRIBUCIONES FUNCIONALES DURANTE LA MIOGENESIS, PITX2\MICRORNAS\DESARROLLO CARDIOVASCULAR\REGULACION GENICA\REGULACION TRANSCRIPCIONAL