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PID2020-114871RB-I00

Financiado

MODULACION FARMACOLOGICA DE LA SENESCENCIA POR ACTIVADORES NRF2 E INHIBIDORES DE...

MODULACION FARMACOLOGICA DE LA SENESCENCIA POR ACTIVADORES NRF2 E INHIBIDORES DE PROTEINA QUINASA EN CELULAS EPITELIALES HUMANAS CULTIVADAS DE PACIENTES DE EPOC, FPI Y ASMA. LA OMS INDICA QUE LAS ENFERMEDADES CRONICAS PULMONARES (EPOC, FPI Y ASMA) ESTAN AUMENTANDO SU INCIDENCIA Y PREVALENCIA EN TODO EL MUNDO CON UNA ALTA MORBILIDAD Y MORTALIDAD. EXISTE UNA NECESIDAD URGENTE DE DESARROLLAR NUEVOS ENF... ver más

01/01/2020

178K€

Presupuesto del proyecto: 178K€

Líder del proyecto

UNIVERSITAT DE VALÈNCIA (ESTUDI GENERAL) No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Sin perfil tecnológico

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2020-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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Líder del proyecto

UNIVERSITAT DE VALÈNCIA (ESTUDI GENERAL) No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Sin perfil tecnológico

Presupuesto del proyecto 178K€

Descripción del proyecto LA OMS INDICA QUE LAS ENFERMEDADES CRONICAS PULMONARES (EPOC, FPI Y ASMA) ESTAN AUMENTANDO SU INCIDENCIA Y PREVALENCIA EN TODO EL MUNDO CON UNA ALTA MORBILIDAD Y MORTALIDAD. EXISTE UNA NECESIDAD URGENTE DE DESARROLLAR NUEVOS ENFOQUES TERAPEUTICOS. EL OBJETIVO CLAVE DEL PRESENTE PROYECTO DE INVESTIGACION ES ESTUDIAR EL EFECTO DEL INHIBIDOR DE PI3Kα, DE PI3Kβ, DE PI3Kγ, DE PI3Kδ Y ACTIVADORES DE NRF2 EN EL PROCESO DE SENESCENCIA, MEDIANTE EL USO DE EXPERIMENTOS IN VITRO RELEVANTES: MUESTRAS DE TEJIDO PULMONAR HUMANO, CELULAS EPITELIALES HUMANAS CULTIVADAS, FIBROBLASTOS PULMONARES HUMANOS Y NEUTROFILOS HUMANOS CULTIVADOS, DE EPOC, FPI Y ASMA. OBJETIVOS / TAREAS ESPECIFICOS: 1. MODELOS DE SENESCENCIA IN VITRO EN TEJIDOS HUMANOS 1.1. CELULAS EPITELIALES BRONQUIALES HUMANAS PRIMARIAS NORMALES DE PACIENTES (CEBHP) CON EPOC EXPUESTOS A HUMO DE CIGARRILLO Y / O SUERO DE PACIENTES CON EPOC Y / O GALACTOSA 1.2. (CEBHP) NORMALES DE PACIENTES CON FPI EXPUESTOS A BLEOMICINA Y / O SUERO DE PACIENTES CON FPI Y / O GALACTOSA 1.3. CELULAS EPITELIALES HUMANAS PRIMARIAS NORMALES DE PACIENTES CON POLIPOS NASALES CON RINOSINUSITIS CRONICA EXPUESTOS A TNF Y / O SUERO DE RINOSINUSITIS CRONICA CON PACIENTES CON POLIPOS NASALES Y / O GALACTOSA 1.4. FIBROBLASTOS DE PULMON DE PACIENTES CON EPOC, FPI EXPUESTOS A HIPEROXIA (40% O2) O 7 DIAS / O TGF-β1 Y / O BLEOMICINA 1.5. LINEA DE CELULAS EPITELIALES ALVEOLARES TIPO II A549, CELULAS EPITELIALES BEAS-2B Y FIBROBLASTOS MRC5 EXPUESTOS A HUMO DE CIGARRILLO Y / O BLEOMICINA Y / O -TNFα Y / O GALACTOSA Y / O HIPEROXIA (40% O2) O 7 DIAS Y / O TGF-β1. 2. ESTUDIOS DE SENESCENCIA EN CELULAS CULTIVADAS 2.1. ANALISIS DE PROLIFERACION Y MUERTE CELULAR. DETECCION DE NIVELES DE ROS, IL ‐ 1β, IL ‐ 6, IL ‐ 8, VEGF, CXCL5 Y MMP, MEDICION DE ADHESION, PROLIFERACION Y MIGRACION CELULAR. ENSAYO DE POTENCIAL DE MEMBRANA MITOCONDRIAL, LONGITUD DEL TELOMERO, ANALISIS DE LA LONGITUD DEL FRAGMENTO DE RESTRICCION TERMINAL (TRF), DETECCION DE FACTORES FENOTIPICOS SECRETORES ASOCIADOS A LA SENESCENCIA. , ACTIVIDAD CASPASA, ENSAYO DE LACTATO DESHIDROGENASA. IMMUNO-FISH. ANALISIS DEL CICLO CELULAR. RESISTENCIA TRANSEPITELIAL. FRECUENCIA DE BATIDO CILIAR Y ANALISIS FUNCIONAL DE CELULAS CILIADAS DE CELULAS EPITELIALES DE CELULAS NASALES 2.2. MEDICION DE LA EXPRESION DE ARN Y PROTEINA DE LOS GENES IMPLICADOS EN SENESCENCIA. TRATAMIENTO DE CELULAS CON COMPUESTOS DE PRUEBA Y DE REFERENCIA: PI3K PAN-INHIBITOR, PI3Kα, β ,γ, δ INHIBITOR, OMAVEXOLONE, BARDOXOLONE, RAPAMYCIN, METFORMIN, DASATINIB AND BIBR 1532.2. 3. INMUNOHISTOQUIMICA E INMUNOFLUORESCENCIA DE MUESTRAS DE TEJIDO PULMONAR HUMANO Y CELULAS CULTIVADAS HUMANAS. 3. SANGRE PERIFERICA 3.1 SUERO DE PACIENTES CON FPI, EPOC O RINOSINUSITIS CRONICA CON POLIPOS NASALES Y DONANTES SANOS NO FUMADORES 3.2 NEUTROFILOS DE PACIENTES 3.2.1. EVALUACION DE LA INFLAMACION EXTRACELULARES DE NEUTROFILOS (NET): MEDICIONES DE (IL1β, IL-8, IL-17, GM-CSF, CCL-5 Y MMP-9), APOPTOSIS DE NEUTROFILOS HUMANOS, QUIMIOTAXIS, (PAD4), ELASTASA DE NEUTROFILOS, GSH , CXCR2, L-SELECTINA (CD62L), INTEGRINA αMβ2 (MAC-1), CD11B, CD49D E ICAM-1, RAS Y P38 / MAPK, TLR4, RECEPTOR SIMILAR A NOD (NLR) Y NFκB. 3.2.2. TRATAMIENTO DE CELULAS CON COMPUESTOS DE PRUEBA Y DE REFERENCIA. POC\HUMANOS\FIBROBLASTOS\NEUTROFILOS\CELULAS EPITELIALES\SENESCENCIA\ASMA\FIBROSIS PULMONAR

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