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BIO2008-01481

Financiado

MODIFICACION DE LIPIDOS MEDIANTE PSEUDO-LIPASAS CREADAS A PARTIR DE UNA ESTERASA...

MODIFICACION DE LIPIDOS MEDIANTE PSEUDO-LIPASAS CREADAS A PARTIR DE UNA ESTERASA MEDIANTE EVOLUCION DIRIGIDA FOCALIZADA EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES REALIZAR MODIFICACIONES DE TRIGLICERIDOS (HIDROLISIS, SINTESIS Y TRANSESTERIFICACION) PARA LA OBTENCION DE GRASAS DE ALTO VALOR AÑADIDO (TRIGLICERIDOS ESTRUCTURADOS) UTILIZANDO PARA ELLO ESTERASAS... ver más

01/01/2008

UAM

61K€

Presupuesto del proyecto: 61K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE MADRID No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 3180

Ver Participantes

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2008-01-01

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Participantes

UAM

Lider

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE MADRID

Total investigadores 3180

Presupuesto del proyecto 61K€

Descripción del proyecto EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES REALIZAR MODIFICACIONES DE TRIGLICERIDOS (HIDROLISIS, SINTESIS Y TRANSESTERIFICACION) PARA LA OBTENCION DE GRASAS DE ALTO VALOR AÑADIDO (TRIGLICERIDOS ESTRUCTURADOS) UTILIZANDO PARA ELLO ESTERASAS ALTERADAS ¿A MEDIDA¿ MEDIANTE EVOLUCION DIRIGIDA PARA QUE ACEPTEN SUSTRATOS PROPIOS DE LIPASAS, ESTE PROCESO SE ENMARCA DENTRO DEL AREA ESTRATEGICA DE BIOTECNOLOGIA AGRARIA Y ALIMENTARIA EN EL CAPITULO DE APLICACION DE LA BIOTECNOLOGIA A LA PRODUCCION DE ALIMENTOS FUNCIONALES Y NUTRACEUTICOS,UTILIZANDO METODOLOGIAS PROPIAS DESARROLLADAS PREVIAMENTE PARA LA MUTAGENESIS ALEATORIA FOCALIZADA (UNICAMENTE EN REGIONES CERCANAS AL CENTRO ACTIVO DE UN ENZIMA), SE ESTUDIARA LA MODULACION DE LA ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO DE LA ESTERASA I DE PSEUDOMONAS FLUORESCENS (PFEI), QUE SE UTILIZARA COMO ESQUELETO PARA CONSTRUIR LA ¿PSEUDO-LIPASA¿, SE HA VISTO QUE CAMBIOS EN LA REGION DE ENTRADA AL CENTRO ACTIVO ALTERAN LA ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO DE ESTA ENZIMA HACIA ESTERES DE CADENA MEDIA Y LARGA, A POSTERIORI SE REALIZARA UN ESTUDIO DETALLADO SOBRE AQUELLOS AMINOACIDOS QUE SE REVELEN COMO IMPORTANTES, MEDIANTE MUTAGENESIS SATURANTE, TAMBIEN SE APLICARA LA MISMA METODOLOGIA EN EL BOLSILLO PARA EL SUSTRATO Y EN EL TUNEL DE SALIDA DEL PRODUCTO, A FIN DE FACILITAR AL MAXIMO LA UNION DE SUSTRATOS DE CADENA LARGA (C16-C22), LA ACTIVIDAD HIDROLITICA DE LOS MUTANTES OBTENIDOS SE ENSAYARA FRENTE A ESTERES DE ACIDOS GRASOS DESDE C2 HASTA C22, SATURADOS E INSATURADOS,POR OTRA PARTE SE ESTUDIARA SI UNA MUTACION PARCIAL DEL ACCESO AL CENTRO ACTIVO PUEDE CONLLEVAR EL DESARROLLO DE ENANTIOSELECTIVIDAD EN LA HIDROLISIS DE ESTERES QUIRALES Y DE ESTEREOSELECTIVIDAD EN LA HIDROLISIS/TRANSESTERIFICACION DE TRIGLICERIDOS, AL LIMITAR LA ENTRADA DE SUSTRATOS DE UNA MANERA UNICAMENTE PARCIAL, LA ACTIVIDAD HIDROLITICA DE LOS MUTANTES OBTENIDOS SE ENSAYARA FRENTE A MONO- DI- Y TRIGLICERIDOS SATURADOS E INSATURADOS Y FRENTE A ESTERES QUIRALES DE ACIDOS GRASOS (P, EJ, FENILBUTIRATO), CON LAS VARIANTES DE MEJOR ACTIVIDAD HIDROLITICA, SE ENSAYARAN REACCIONES DE SINTESIS Y TRANSESTERIFICACION EN MEDIO ANHIDRO,ASIMISMO, CON VISTAS A UNA MAYOR ESTABILIDAD DEL CATALIZADOR EN CONDICIONES INDUSTRIALES DE REACCION SE PROCEDERA A LA TERMOESTABILIZACION DE LAS PSEUDO-LIPASAS PREVIAMENTE OBTENIDAS MEDIANTE UNA METODOLOGIA DE SELECCION IN VIVO EN UN HOSPEDADOR TERMOFILO RECIENTEMENTE DESARROLLADA EN NUESTRO GRUPO, LA TERMOESTABILIZACION SUELE CONLLEVAR MUTACIONES REPARTIDAS POR TODA LA ESTRUCTURA, Y FRECUENTEMENTE IMPLICA NO SOLO UN AUMENTO DE LA TEMPERATURA OPTIMA DE ACTIVIDAD DEL ENZIMA (TERMOACTIVIDAD), SINO TAMBIEN UNA MAYOR ESTABILIDAD FRENTE A CODISOLVENTES ORGANICOS, SIENDO AMBAS CONDICIONES FRECUENTEMENTE REQUERIDAS EN LAS REACCIONES INDUSTRIALES CATALIZADAS POR ESTE TIPO DE ENZIMAS, modificación de lípidos\triglicéridos estructurados\lipasas\esterasas\evolución dirigida\especificidad de sustrato\termoestabilización

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