Descripción del proyecto
LOS MICRODOMINIOS DE CA2+ SON NECESARIOS PARA LA REGULACION DE LAS NUMEROSAS FUNCIONES CELULARES QUE DEPENDEN DE ESTE CATION, NUESTRA HIPOTESIS PROPONE QUE EXISTEN MICROUNIDADES FUNCIONALES QUE CONFORMARIAN LOS MICRODOMINIOS DE CA2+, REGULANDO ASI LA EXOCITOSIS DE NEUROTRANSMISORES, EL OBJETIVO GENERAL DEL PRESENTE PROYECTO DE INVESTIGACION CONSISTE EN CONOCER CUAL DE LAS PRINCIPALES VIAS DE ENTRADA DE CA2+ AL CITOSOL EN LAS CELULAS CROMAFINES, CANALES DE CA2+ DEPENDIENTES DE VOLTAJE (CCDV) Y RECEPTOR NICOTINICO, O LAS ORGANELAS QUE CAPTAN CA2+ EN EL CITOSOL, MITOCONDRIA Y RETICULO ENDOPLASMICO, FORMAN PARTE DE DICHAS MICROUNIDADES, JUNTO CON LAS VESICULAS SECRETORAS, ADEMAS INVESTIGAREMOS DISTINTOS ASPECTOS DE LA REGULACION DEL CA2+ POR LA MITOCONDRIA, Y ESTUDIAREMOS COMO INFLUYE LA CINETICA QUE EXPERIMENTA EL CA2+ MITOCONDRIAL EN LA CINETICA DEL PROCESO SECRETOR, LOS OBJETIVOS CONCRETOS QUE LLEVAREMOS A CABO EN ESTE PROYECTO DE INVESTIGACION SON LOS SIGUIENTES: I) COLOCALIZACION DE LA MITOCONDRIA CON EL RETICULO ENDOPLASMICO, EL RECEPTOR NICOTINICO Y LOS CCDV; II) COLOCALIZACION DE LAS VESICULAS SECRETORAS CON EL RETICULO ENDOPLASMICO, EL RECEPTOR NICOTINICO Y LOS CCDV; III) EFICIENCIA DEL CA2+ QUE ENTRA POR EL RECEPTOR NICOTINICO EN EVOCAR LA EXOCITOSIS DE NEUROTRANSMISORES EN COMPARACION CON EL CA2+ QUE ENTRA POR LOS CCDV; IV) CAPACIDAD TAMPONADORA DE LA MITOCONDRIA DEL CA2+ QUE ENTRA POR EL RECEPTOR NICOTINICO EN COMPARACION CON EL CA2+ QUE ENTRA POR LOS CCDV; V) CORRELACION DEL CA2+ MITOCONDRIAL Y LA EXOCITOSIS DE NEUROTRANSMISORES ANTE DISTINTOS ESTIMULOS: ACETILCOLINA, CAFEINA, Y PULSOS DESPOLARIZANTES; VI) POBLACIONES MITOCONDRIALES SEGUN EL INCREMENTO DEL CA2+ MITOCONDRIAL QUE EXPERIMENTAN; VII) INTERRELACION ENTRE LOS DISTINTOS SUBTIPOS DE CCDV, LAS POBLACIONES MITOCONDRIALES Y LA MAQUINARIA DE LA EXOCITOSIS, ESTE ESTUDIO SE LLEVARA A CABO EN LAS CELULAS CROMAFINES DE LA GLANDULA SUPRARRENAL HUMANA Y MURINA, ESTO PERMITIRA AHONDAR EN LA FISIOLOGIA DE LA CELULA CROMAFIN DE NUESTRA ESPECIE, Y NOS PERMITIRA COMPARARLA CON LA ESPECIE MURINA, DE GRAN ACCESIBILIDAD E INTERES POR LA POSIBILIDAD DE GENERAR ANIMALES TRANSGENICOS, exocitosis\canales de calcio\receptor nicotínico\mitocondria\retículo endoplásmico\patch-clamp\fluorimetría