Descripción del proyecto
LA APOLIPOPROTEINA D (APOD) ES UNA PROTEINA QUE UNE LIPIDOS Y QUE SE EXPRESA EN EL SISTEMA NERVIOSO DURANTE SU DESARROLLO, ESTA EXPRESION DECRECE DURANTE LA VIDA ADULTA Y AUMENTA CON EL ENVEJECIMIENTO Y CON LA APARICION DE MULTIPLES PATOLOGIAS NEURODEGENERATIVAS, LA LITERATURA ACERCA DE LAS CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS DE LA PROTEINA, ASI COMO NUESTROS RESULTADOS DERIVADOS DEL ANALISIS DE MUTANTES DE APOD EN EL RATON Y EN LA MOSCA DROSOPHILA, APOYAN FUERTEMENTE EL PAPEL PROTECTOR DE APOD ANTE EL ESTRES OXIDATIVO QUE SUBYACE AL ENVEJECIMIENTO Y A LA FISIOPATOLOGIA DE LAS ENFERMEDADES NEURODEGENERATIVAS,A LO LARGO DEL PROYECTO MEC QUE ACTUALMENTE NOS FINANCIA, NUESTRA META CIENTIFICA HA EVOLUCIONADO DESDE ESTABLECER EL PAPEL PROTECTOR DE APOD HASTA PREGUNTARNOS POR SUS MECANISMOS DE ACCION, ENCAMINANDO NUESTRA INVESTIGACION A CONOCER COMO REALIZA APOD SU FUNCION PROTECTORA, NUESTRA HIPOTESIS DE TRABAJO ACTUAL ES QUE UNA FUNCION BIOQUIMICA COMUN (LA REGULACION DE LOS PRODUCTOS DE PEROXIDACION LIPIDICA DENTRO Y FUERA DE LAS MEMBRANAS CELULARES) SUBYACE A LA APARENTE DIVERSIDAD DE FUNCIONES FISIOLOGICAS DE APOD (REGULANDO LA APOPTOSIS, LA PROLIFERACION CELULAR O EL CRECIMIENTO AXONAL), EN TODAS ESTAS FUNCIONES SE REQUIERE EL CONTROL DE LA FLUIDEZ Y ESTABILIDAD DE LAS MEMBRANAS CELULARES,NUESTRO OBJETIVO GLOBAL ES LLEVAR A CABO UN ANALISIS FISIOLOGICO DE LA PROTEINA APOD EN DIFERENTES NIVELES DE ORGANIZACION BIOLOGICA MEDIANTE UNA APROXIMACION MULTIDISCIPLINAR PARA PODER RESOLVER DIFERENTES ASPECTOS DE LA FUNCION DE APOD, ENMARCADOS DENTRO DE NUESTRA META A LARGO PLAZO, LOS OBJETIVOS PROPUESTOS PARA EL SIGUIENTE PERIODO DE PROYECTO MEC SON LOS SIGUIENTES:NIVEL DE ORGANISMO: 1, COMPROBAREMOS SI LA PERDIDA O GANANCIA DE FUNCION DE APOD EN EL RATON AFECTA A LA LONGEVIDAD DEL ORGANISMO Y AL DECLIVE FUNCIONAL DEL SISTEMA NERVIOSO, COMO ES EL CASO EN DROSOPHILA, 2, EVALUAREMOS LOS EFECTOS DE COMBINAR MUTACIONES DE PERDIDA Y GANANCIA DE FUNCION DE APOD CON MODELOS GENETICOS DE ENFERMEDADES NEURODEGENERATIVAS, ESTE OBJETIVO SERA LLEVADO A CABO PRIMERO EN LA MOSCA DEL VINAGRE, LO QUE GUIARA LOS POSTERIORES ESTUDIOS EN EL RATON,NIVEL TISULAR: 3, ESTUDIAREMOS EL PAPEL DE APOD EN EL CRECIMIENTO Y REGENERACION AXONICA Y EN LA SUPERVIVENCIA CELULAR EN CULTIVOS ORGANOTIPICOS DE CEREBELO DE RATON, ESTE OBJETIVO PRETENDE COMPRENDER SI ESTOS PROCESOS CELULARES ESTAN RELACIONADOS CON UNA FUNCION COMUN DE APOD,NIVEL CELULAR: 4, ESTUDIAREMOS DONDE EN LA CELULA ES REQUERIDA LA PRESENCIA DE APOD PARA PODER EJERCER SU FUNCION PROTECTORA, PARA ELLO CONTROLAREMOS LA EXPRESION DE APOD ENVIANDOLA A DISTINTOS COMPARTIMENTOS (EXTRA- E INTRACELULARES) Y ANALIZAREMOS LA RESPUESTA DE LA CELULA AL ESTRES OXIDATIVO EXPERIMENTAL,NIVEL MOLECULAR: 5, ESTUDIAREMOS LAS VIAS DE SEÑALIZACION IMPLICADAS EN REGULAR LA EXPRESION DE APOD EN RESPUESTA AL ESTRES OXIDATIVO EXPERIMENTAL, ASI COMO DE QUE FORMA APOD MODIFICA LA RESPUESTA DEL TRANSCRIPTOMA CELULAR A DICHA SITUACION DE ESTRES, 6, POR ULTIMO,COMPROBAREMOS SI LA UNION DE UN LIGANDO HIDROFOBICO AL BOLSILLO DE APOD ES UN REQUERIMIENTO PARA EJERCER SUS FUNCIONES FISIOLOGICAS, TRAS LA ALTERACION DEL BOLSILLO POR MUTAGENESIS DIRIGIDA Y ANALISIS IN VITRO DE LA UNION A LIGANDOS, PROBAREMOS LA FUNCION DE LAS PROTEINAS MUTADAS IN VIVO MEDIANTE TRANSGENESIS EN LA MOSCA DEL VINAGRE Y COMPROBACION DE SU CAPACIAD DE REALIZAR FUNCIONES CONOCIDAS EN SITUACIONES DE ESTRES OXIDATIVO O DE NEURODEGENERACION Apolipoproteína D\Lipocalinas\Ratones knockout\Ratones transgénicos\Drosophila\Estrés oxidativo\Cerebelo\Supervivencia celular\Regeneración axónica