Descripción del proyecto
EL PROYECTO COORDINADO PRETENDE CARACTERIZAR LA ACTIVIDAD DE LAS LACASAS EN EL VINO, BUSCANDO LA DISMINUCION DE SU ACCION INDESEABLE Y BUSCANDO POTENCIAR LOS EFECTOS FAVORABLES, TANTO DESDE LA CALIDAD (REDUCCION DE LA ASTRINGENCIA, TRATAMIENTOS DE CLARIFICACION MAS ESPECIFICOS,
) COMO DESDE LA SALUBRIDAD Y SEGURIDAD ALIMENTARIA: REDUCCION DEL CONTENIDO EN AB, OTA, FV, ETC,EL SUBPROYECTO 1 REALIZARA LA BUSQUEDA DE LACASAS DE BL DE ORIGEN ENOLOGICO, SU CARACTERIZACION Y SU PRODUCCION, SOLAMENTE EXISTE ACTUALMENTE UNA LACASA CLONADA DE UNA BACTERIA ENOLOGICA, L, PLANTARUM J16 (REALIZADA POR NUESTRO GRUPO), AUNQUE TAMBIEN HEMOS CLONADO GENES DE LACASAS DE OTRAS BL AISLADAS DE OTROS ALIMENTOS: P, ACIDILACTICI DE CEREALES Y L, MESENTEROIDES DE QUESO DE CABRA, CONSIDERAMOS QUE LAS ENZIMAS DE BACTERIAS AISLADAS DE VINO (MEDIO EXTREMO DE BAJO PH, ALTO CONTENIDO EN ETANOL, PRESENCIA DE SO2 Y DE POLIFENOLES) ESTAN MAS ADAPTADAS A ESTAS CONDICIONES QUE LOS DE OTRAS BACTERIAS, COMO NO TODAS LAS LACASAS PRESENTAN LAS MISMAS CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS (CINETICAS, CONDICIONES OPTIMAS DE ACTUACION, ETC,), SE PLANTEA EL DISPONER DE ENZIMAS DIFERENTES PARA DETERMINAR SUS PROPIEDADES Y SUS POTENCIALES APLICACIONES, PARA OBTENER UNA CANTIDAD DE ENZIMA ELEVADA, ESTAS ENZIMAS SE CLONARAN Y PRODUCIRAN E, COLI, TAMBIEN SE DETERMINARA EL SISTEMA DE EXPRESION QUE CONDUZCA A RENDIMIENTOS MAS ELEVADOS DE PROTEINA ACTIVA,LAS LACASAS PUEDEN TENER CARACTERISTICAS BENEFICIOSAS AL PODER DEGRADAR MOLECULAS INDESEABLES COMO OTA, AB, Y FV, Y POR ELLO SE EVALUARAN LAS POTENCIALIDADES DEL USO DE ESTAS ENZIMAS EN CONDICIONES INDUSTRIALES, ESTUDIANDO EL EFECTO QUE DIFERENTES TRATAMIENTOS Y CONDICIONES COMUNES EN ENOLOGIA TIENEN SOBRE LA ACTIVIDAD CATALITICA: PH, ETANOL, TEMPERATURA, SO2, Y PRESENCIA DE POLIFENOLES, LA CUANTIFICACION DE AB SE REALIZARA POR NUESTRO GRUPO, Y OTA Y FV EN UCLM, LOS PRODUCTOS DE DEGRADACION DE ESTOS SUSTRATOS POR PARTE DE LAS DIFERENTES LACASAS SERAN ANALIZADOS Y CARACTERIZADOS POR PARTE DEL SUBGRUPO 2 DE LA UCLM,UNA PROPIEDAD DE LAS LACASAS ES QUE FRECUENTEMENTE PUEDEN EJERCER SU ACCION SOBRE DETERMINADOS COMPUESTOS GRACIAS A LA INTERVENCION DE OTRAS MOLECULAS QUE ACTUAN COMO MEDIADORES, SIN ELLOS, ESTOS SUSTRATOS NO SERIAN UTILIZADOS, O LO HARIAN ESCASAMENTE, SE ESTUDIARA LA CAPACIDAD QUE DETERMINADAS SUSTANCIAS NATURALMENTE PRESENTES EN EL VINO PUEDEN EJERCER COMO MEDIADORES SOBRE LA ACCION DE LAS LACASAS, LOS PRODUCTOS DE DEGRADACION DE ESTOS SUSTRATOS SERAN POSTERIORMENTE CARACTERIZADOS POR PARTE DEL SUBGRUPO 2 DE LA UCLM,LA FUNCIONALIDAD DE LAS LACASAS SE RELACIONA CON ASPECTOS QUE DETERMINAN SU ACTIVIDAD CATALITICA, PARA ELLO SE PROCEDERA A CRISTALIZAR LAS LACASAS, ENSAYANDO DISTINTAS CONDICIONES Y MEDIOS PARA OPTIMIZAR EL PROCESO, TRAS EL ANALISIS DE DIFRACCION DE RAYOS X SE DETERMINARA SU ESTRUCTURA CRISTALINA Y LA IDENTIFICACION DE LOS SITIOS DE UNION DE SUSTRATOS Y MEDIADORES, ESTE OBJETIVO SE ABORDARA MAYORITARIAMENTE POR PARTE DE NUESTRO SUBGRUPO EN COLABORACION CON PATRICIA CASINO, INVESTIGADORA DE NUESTRA UNIVERSIDAD Y EXPERTA EN EL TEMA, JUNTO CON LOS DATOS PROPORCIONADOS POR LA URV SOBRE LAS CONSTANTES DE ASOCIACION Y DISOCIACION DE SUSTRATOS Y MEDIADORES POR SPR, SE ESTABLECERAN LAS RELACIONES ENTRE LAS DIFERENCIAS ESTRUCTURALES Y FUNCIONALES DE LAS DIFERENTES LACASAS CARACTERIZADAS, ELLO PERMITIRA CONOCER LAS DIFERENCIAS Y SEMEJANZAS ENTRE LAS LACASAS Y DETERMINAR SU APLICABILIDAD, LACASAS\VINO\POLIFENOLES\AMINAS BIÓGENAS\OCRATOXINA A\SULFITOS\CALIDAD\SALUBRIDAD\SENSORIALIDAD\ASTRINGENCIA.