Descripción del proyecto
LA RESISTENCIA DE STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE A ANTIBIOTICOS -LACTAMICOS Y MACROLIDOS HA INCREMENTADO LA IMPORTANCIA DE LAS NUEVAS FLUOROQUINOLONAS (FQS) COMO ALTERNATIVAS TERAPEUTICAS, LAS FQS ACTUAN SOBRE LAS DNA TOPOISOMERASAS DE TIPO II, LA DNA TOPOISOMERASA IV Y LA DNA GIRASA (GIRASA, GYRA2GYRB2), ENZIMAS ESENCIALES QUE CONTROLAN LA TOPOLOGIA DEL DNA, SE DETERMINARA SI, AL IGUAL QUE EN OTRAS BACTERIAS, EN S, PNEUMONIAE EL NIVEL DE SUPERENROLLAMIENTO DE DNA CELULAR SE MANTIENE DE FORMA HOMEOSTATICA POR LAS ACTIVIDADES OPUESTAS DE LA DNA TOPOISOMERASA I (TOPO I, QUE RELAJA EL DNA) Y DE LA GIRASA (QUE INTRODUCE VUELTAS SUPERHELICOIDALES NEGATIVAS), SE ESTUDIARAN LOS REGULADORES DE LA TRANSCRIPCION DE LOS GENES QUE LAS CODIFICAN MEDIANTE LA IDENTIFICACION DE PROTEINAS QUE SE UNAN A LOS PROMOTORES DE DICHOS GENES Y LA CARACTERIZACION DE DICHAS INTERACCIONES TANTO IN VITRO COMO IN VIVO, SE ESTUDIARAN ASIMISMO LOS CAMBIOS EN EL NIVEL DE SUPERENROLLAMIENTO EN DIFERENTES CONDICIONES AMBIENTALES, DE CRECIMIENTO Y EN EL PROCESO DE INFECCION, SE ANALIZARAN LOS GENES QUE RESPONDEN A RELAJACION DE DNA MEDIANTE UNA ANALISIS GENOMICO Y LA CONSTRUCCION DE UNA LIBRERIA DE SECUENCIAS PROMOTORAS FUSIONADAS AL OPERON LUXCDABE, ADEMAS SE PURIFICARAN LAS PROTEINAS HU Y FIS Y SE DETERMINARA SU POSIBLE PAPEL EN LA REGULACION DEL SUPERENROLLAMIENTO GLOBAL,POR OTRA PARTE, SE REALIZARAN DETERMINACIONES DE EFICACIA BIOLOGICA Y DE EFICIENCIA DE TRANSFORMACION EN CEPAS RESISTENTES A FQS (MUTANTES PUNTUALES Y CEPAS RECOMBINANTES) EN BIOFILMS, ESTUDIANDOSE SI LAS FQS FAVORECEN LA TRANSFERENCIA HORIZONTAL, ADEMAS, SE REALIZARA UN ESTUDIO EPIDEMIOLOGICO DE AISLADOS RESISTENTES A FQS DEL AÑO 2006 PARA DETERMINAR LA EVOLUCION DE LOS CLONES RESISTENTES, DNA topoisomerasas\superenrollamiento\fluoroquinolonas\regulación de transcripción\curvatura del DNA\recombinación\eficacia biológica\transferencia horizontal\biofilms