DETERMINANTES MOLECULARES DEL AUMENTO DE CANALES DE SODIO Y POTASIO PRODUCIDO PO...
DETERMINANTES MOLECULARES DEL AUMENTO DE CANALES DE SODIO Y POTASIO PRODUCIDO POR EL DOMINIO N-TERMINAL DEL CANAL DE NAV1.5
A PESAR DEL TRATAMIENTO OPTIMO, LAS ARRITMIAS VENTRICULARES (AV) Y LA FIBRILACION VENTRICULAR, QUE SON RESPONSABLES DE LA MUERTE SUBITA CARDIACA (MSC), SON LA CAUSA MAS FRECUENTE DE MUERTE EN PACIENTES CON CARDIOPATIA ESTRUCTURAL...
A PESAR DEL TRATAMIENTO OPTIMO, LAS ARRITMIAS VENTRICULARES (AV) Y LA FIBRILACION VENTRICULAR, QUE SON RESPONSABLES DE LA MUERTE SUBITA CARDIACA (MSC), SON LA CAUSA MAS FRECUENTE DE MUERTE EN PACIENTES CON CARDIOPATIA ESTRUCTURAL (CE), ESTO ES, PACIENTES CON CARDIOPATIA ISQUEMICA Y/O INSUFICIENCIA CARDIACA (IC). EN PACIENTES CON CE, SE PRODUCE UNA MARCADA DISMINUCION EN LA EXPRESION DE LOS CANALES NAV1.5 AND KIR2.1 EN LA MEMBRANA DE LOS MIOCITOS CARDIACOS. DICHA REDUCCION DISMINUYE LA DENSIDAD DE LAS CORRIENTES DE NA (INA) Y DE K CON RECTIFICACION INTERNA (IK1) Y, POR TANTO, REDUCE LA EXCITABILIDAD VENTRICULAR Y LA CONDUCCION INTRACARDIACA Y PROLONGA LA REFRACTARIEDAD, LO QUE AUMENTA EL RIESGO DE ARRITMIAS. SE TRATA POR TANTO DE UN CIRCULO VICIOSO. LA MAYORIA DE LOS FARMACOS ANTIARRITMICOS (FA) DISPONIBLES EN ESTE MOMENTO BLOQUEAN VARIOS TIPOS DE CANALES IONICOS Y PRODUCEN EFECTOS PROARRITMICOS. POR TANTO, LOS FA NO PUEDEN UTILIZARSE EN PACIENTES CON CE NI EN LOS QUE PRESENTAN UN MAYOR RIESGO DE SUFRIR AV GRAVES, PORQUE EN ELLOS LOS FA AUMENTAN LA MORTALIDAD. NUESTRA HIPOTESIS ES QUE UNA TERAPIA AVANZADA CAPAZ DE AUMENTAR, EN LUGAR DE INHIBIR, LA INA Y LA IK1 PODRIA RESULTAR EFICAZ PARA EL TRATAMIENTO Y LA PREVENCION DE LAS AV GRAVES EN ESTOS PACIENTES. NUESTRO GRUPO HA DEMOSTRADO QUE EL EXTREMO N-TERMINAL DEL CANAL NAV1.5 (NTD) AUMENTA SELECTIVAMENTE LA EXPRESION DE LOS CANALES NAV1.5 Y KIR2.1. POR TANTO, EL OBJETIVO GENERAL DEL PROYECTO ES IDENTIFICAR LOS DETERMINANTES MOLECULARES Y LOS MECANISMOS CELULARES RESPONSABLES DEL AUMENTO DE LA EXPRESION DE CANALES NAV1.5 Y KIR2.1 PRODUCIDO POR EL NTD. PRETENDEMOS ALCANZAR EL OBJETIVO GENERAL DESARROLLANDO LOS SIGUIENTES OBJETIVOS ESPECIFICOS: 1) IDENTIFICAR SI NTD AUMENTA LA EXPRESION DE CANALES NAV1.5 Y KIR2.1 A TRAVES DE UN MECANISMO TRANSCRIPCIONAL O POST-TRANSCRIPCIONAL. 2) IDENTIFICAR SI NTD AUMENTA LA EXPRESION DE CANALES NAV1.5 Y KIR2.1 ACTUANDO A NIVEL DEL RETICULO ENDOPLASMICO. 3) IDENTIFICAR SI NTD AUMENTA LA EXPRESION DE CANALES NAV1.5 Y KIR2.1 MODIFICANDO EL TRAFICO ANTEROGRADO, LA LOCALIZACION EN SUB-DOMINIOS ESPECIFICOS DE LA MEMBRANA, Y/O LA INTERNALIZACION DE LOS CANALES. 4) IDENTIFICAR EL MINIMO MOTIVO DEL NTD RESPONSABLE DEL AUMENTO DE LA EXPRESION DE CANALES NAV1.5 Y KIR2.1, ASI COMO EL DOMINIO RECEPTOR EN LA PROTEINA/S DIANA/S. 5) ANALIZAR PRELIMINARMENTE EL POTENCIAL EFECTO ANTIARRITMICO DE NTD EN UN MODELO MURINO IN VIVO DE ARRITMIAS VENTRICULARES E IC. ESTOS OBJETIVOS SERAN ANALIZADOS UTILIZANDO TECNICAS ELECTROFISIOLOGICAS, DE BIOLOGIA MOLECULAR Y DE IMAGEN DE VANGUARDIA. PARA ELLO SE UTILIZARAN MODELOS IN VITRO E IN VIVO, COMPLEMENTARIOS QUE INCLUIRAN RATONES MODIFICADOS GENETICAMENTE. LOS EXPERIMENTOS SE REALIZARAN EN LINEAS CELULARES Y EN CARDIOMIOCITOS HL-1, DE RATON, Y DE RATA. NUESTROS RESULTADOS SE COMPROBARAN EN CARDIOMIOCITOS HUMANOS DERIVADOS DE CELULAS MADRES PLURIPOTENTES INDUCIDAS QUE SERAN O NO MODIFICADOS GENETICAMENTE UTILIZANDO LA TECNOLOGIA DE CRISP-CAS9. CON ESTE PROYECTO PERSEGUIMOS UN CAMBIO CONCEPTUAL QUE MODIFIQUE EL PARADIGMA DE LA ESTRATEGIA ANTIARRITMICA ACTUAL A LA VEZ QUE DESCIFRAMOS LOS MECANISMOS ULTIMOS QUE CONTROLAN LA EXPRESION DE CANALES NAV1.5 Y KIR2.1 EN LAS MEMBRANAS DE LOS MIOCITOS CARDIACOS Y, POR TANTO LA EXCITABILIDAD. POR TANTO, LOS RESULTADOS ESPERADOS TENDRAN UN GRAN IMPACTO DESDE EL PUNTO DE VISTA TANTO CLINICO COMO BASICO. ANALES DE SODIO\MIOCITOS CARDIACOS\ARRITMIAS VENTRICULARES\PATCH-CLAMP\CORAZON\CANALES KIR2.1ver más
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