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BFU2009-11262

Financiado
ARQUITECTURA Y REGULACION DEL CANAL DE POTASIO ERG
LOS CANALES DE POTASIO ERG (ETHER-A-GOGO RELATED GENE) JUEGAN UN PAPEL CRUCIAL EN EL CONTROL DEL POTENCIAL DE MEMBRANA BASAL Y DE LAS CARACTERISTICAS DE LOS POTENCIALES DE ACCION EN NUMEROSOS TIPOS DE CELULAS EXCITABLES, LA ISOFOR... LOS CANALES DE POTASIO ERG (ETHER-A-GOGO RELATED GENE) JUEGAN UN PAPEL CRUCIAL EN EL CONTROL DEL POTENCIAL DE MEMBRANA BASAL Y DE LAS CARACTERISTICAS DE LOS POTENCIALES DE ACCION EN NUMEROSOS TIPOS DE CELULAS EXCITABLES, LA ISOFORMA HUMANA DE ERG1 (H-ERG) ES ESPECIALMENTE RELEVANTE EN LOS CARDIOCITOS, YA QUE MEDIA LA CORRIENTE IKR IMPLICADA EN LA REPOLARIZACION DEL POTENCIAL DE ACCION CARDIACO, MUTACIONES EN ESTE CANAL PUEDEN CAUSAR EL SINDROME QT-LARGO, CARACTERIZADO POR UN ALARGAMIENTO DE LOS POTENCIALES DE ACCION ASOCIADO A UN ALTO RIESGO DE ARRITMIAS CARDIACAS, FIBRILACION VENTRICULAR Y MUERTE SUBITA, DADA SU IMPORTANCIA FISIOPATOLOGICA, Y PUESTO QUE SU FUNCIONALIDAD ES REGULADA POR DISTINTOS AGENTES, RESULTA SUMAMENTE RELEVANTE CONOCER LOS MECANISMOS POR LOS QUE LAS HORMONAS MODIFICAN SUS CARACTERISTICAS FUNCIONALES, EN ESTE SENTIDO, NUESTRO TRABAJO PREVIO HA DEMOSTRADO QUE LOS CANALES ERG PUEDEN SER REGULADOS POR RECEPTORES HORMONALES ACOPLADOS A PROTEINAS G QUE ACTIVAN LA FOSFOLIPASA C, EN UNA CASCADA DE TRANSDUCCION QUE IMPLICA MECANISMOS DE FOSFORILACION, AUNQUE EL SENSOR DEL VOLTAJE Y LOS ELEMENTOS DE APERTURA Y CIERRE ESTAN LOCALIZADOS EN EL CUERPO CENTRAL TRANSMEMBRANAL DE ESTOS CANALES, SE SABE QUE LA PRESENCIA DE UN DOMINIO AMINO ESTRUCTURALMENTE INTACTO ES ESENCIAL TANTO PARA EL CONTROL DE LOS MECANISMOS DE APERTURA Y CIERRE COMO PARA SU REGULACION HORMONAL, POR ELLO, ES FUNDAMENTAL UN MEJOR CONOCIMIENTO DE LA ARQUITECTURA MOLECULAR DEL TETRAMERO DE H-ERG Y DE LAS REORGANIZACIONES ESTRUCTURALES DE LOS DOMINIOS CITOPLASMICOS DURANTE SU ACTIVIDAD, PARA ENTENDER SU PARTICIPACION EN EVENTOS FISIOPATOLOGICOS IMPORTANTES COMO EL RITMO Y LA CONTRACCION CARDIACOS, LA SECRECION HORMONAL O LA PROLIFERACION DE CELULAS TUMORALES, EL PRESENTE PROYECTO PLANTEA TRES OBJETIVOS GENERALES : A) ESTUDIAR LOS COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CASCADAS DE REGULACION HORMONAL DE CANALES ERG, MEDIANTE IDENTIFICACION DE DIANAS DE FOSFORILACION EN RESPUESTA AL TRATAMIENTO HORMONAL, SEGUIDA POR EL SILENCIAMIENTO MEDIANTE RNAI DE LAS PROPIAS DIANAS Y DE LAS PROTEIN QUINASAS Y FOSFATASAS PRESUNTAMENTE IMPLICADAS EN ESA REGULACION,B) ANALIZAR LA ARQUITECTURA MOLECULAR DE LOS DOMINIOS CITOPLASMICOS DE H-ERG MEDIANTE TECNICAS DE TIRF/FRET, UTILIZANDO COMO BASE LAS COLECCIONES DE PROTEINAS DE FUSION FLUORESCENTES DEL CANAL QUE HEMOS GENERADO Y CARACTERIZADO, SE PRETENDE QUE LAS MEDIDAS OBTENIDAS IN VIVO E IN SITU SEAN LA BASE PARA CONOCER EL POSICIONAMIENTO Y LA ORGANIZACION ESTRUCTURAL DE LAS SUBUNIDADES DEL CANAL TETRAMERICO, ASI COMO LAS REORGANIZACIONES ESTRUCTURALES DE LOS DOMINIOS CITOPLASMICOS ASOCIADAS A SU FUNCIONALIDAD, C) ESTUDIAR DE FORMA DIRECTA LAS INTERACCIONES INTRAMOLECULARES ENTRE DOMINIOS INTRACELULARES DE H-ERG CRUCIALES PARA LA FUNCIONALIDAD DEL CANAL Y PARA SU REGULACION HORMONAL, PARA ELLO SE ANALIZARA LA PROXIMIDAD ENTRE DIFERENTES DOMINIOS O SECUENCIAS DE H-ERG MEDIANTE LA MUTAGENESIS A CISTEINAS DE RESIDUOS ESPECIFICOS Y SUBSIGUIENTE QUIMICA DE PUENTES DISULFURO, ASI COMO TAMBIEN MEDIANTE ESPECTROSCOPIA RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR DE ALTA RESOLUCION, CANAL DE POTASIO ERG\ARQUITECTURA MOLECULAR\REGULACION HORMONAL\TIRF/FRET\RELACIONES ESTRUCTURA-FUNCION\INTERACCIONES PROTEINA-PROTEINA ver más
01/01/2009
UNIOVI
182K€
Perfil tecnológico estimado

Línea de financiación: concedida

El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2009-01-01
Presupuesto El presupuesto total del proyecto asciende a 182K€
Líder del proyecto
Universidad de Oviedo No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.
Total investigadores 787