Descripción del proyecto
CRYPTOCOCCUS NEOFORMANS Y C, GATTII SON LEVADURAS ENCAPSULADAS PATOGENAS OPORTUNISTAS EN PACIENTES INMUNODEPRIMIDOS, SE TRANSMITEN POR INHALACION Y CONDUCEN A NEUMONIAS LATENTES, LA COMPLICACION MAS GRAVE ES LA MENINGOENCEFALITIS, REACTIVADA EN INMUNOSUPRESION, EL CRUCE DE CRIPTOCOCOS A TRAVES DE LA BARRERA HEMATOENCEFALICA ES CRUCIAL EN SU PATOGENIA; PERO EL PORQUE, COMO Y CUANDO OCURRE SE DESCONOCE, DATOS EXPERIMENTALES SUGIEREN QUE CELULAS INMUNITARIAS DEL HUESPED (MONOCITOS/MACROFAGOS) JUEGAN UN PAPEL CLAVE, PROPORCIONANDO UN VEHICULO PARA HABILITAR LA DISEMINACION,LA GENETICA Y FACTORES DE VIRULENCIA SE HAN ESTUDIADO CON DETALLE Y COMBINADOS CON LA DISPONIBILIDAD DE MODELOS ANIMALES, HAN HECHO DE LA CRIPTOCOCOSIS UN SISTEMA ADECUADO PARA EL ESTUDIO DE INTERACCIONES HUESPED-PATOGENO, LOS MODELOS DE INFECCION IN VIVO REQUIEREN EL SACRIFICIO DEL HUESPED Y LA EVALUACION DE LOS MICROORGANISMOS EN ORGANOS INDIVIDUALES PARA DETERMINAR LA EXTENSION Y CINETICA INFECCIOSAS, LA INFORMACION SOBRE INTERACCIONES ENTRE CRIPTOCOCOS, MACROFAGOS Y CELULAS ENDOTELIALES MICROVASCULARES ES ESENCIAL PARA COMPRENDER LA PATOGENESIS, PERO COMPLEJA YA QUE EL ANALISIS HISTOLOGICO ESTA LIMITADO A UN INSTANTE, ELLO IMPIDE TENER INFORMACION DINAMICA SOBRE LA PROGRESION DE LA ENFERMEDAD EN ANIMALES INDIVIDUALES Y EL MODELO CARECE DE SEÑALES FENOTIPICAS EN FASE TEMPRANA, LAS TECNICAS DE IMAGEN IN VIVO SON INDISPENSABLES PARA CONTROLAR INTERACCIONES HUESPED-PATOGENO, FENOMENOS DINAMICOS EN TIEMPO Y ESPACIO, LAS TECNICAS DE IMAGEN NO INVASIVAS TIENEN EL POTENCIAL DE PROPORCIONAR DATOS DINAMICOS PROCEDENTES DE ANIMALES VIVOS EN ESCALAS DE TIEMPO RELEVANTES Y CAPACIDAD DE DEFINIR PLAZOS PARA ANALISIS MICROSCOPICO EX VIVO EN CADA ESPECIMEN,EL OBJETIVO DEL PROYECTO ES DESARROLLAR NUEVAS TECNICAS PARA CONTROLAR DINAMICAMENTE LAS CELULAS INMUNES Y CRIPTOCOCOS IN VIVO Y DEFINIR SUS INTERACCIONES DURANTE LA INFECCION, SE VISUALIZARA SU PROGRESION POR CT Y MRI, CORRELACIONANDOLA CON METODOS DE VISUALIZACION MULTIPLE IN VIVO DE CELULAS DIANA (MRI, BLI, FLI, IVM), MEDIANTE USO DE TECNICAS DE IMAGEN MULTIMODAL, SE REALIZARA UN SEGUIMIENTO SIMULTANEO DE DIFERENTES TIPOS DE CELULAS Y SE RELACIONARA CON LA PROGRESION DE LA ENFERMEDAD PULMONAR Y CEREBRAL, SE DESARROLLARAN HERRAMIENTAS DIAGNOSTICAS Y SONDAS FLUORESCENTES CON POTENCIAL PARA FUTURAS SONDAS MULTIMODALES DE RM, LOS RESULTADOS IN VIVO SE RELACIONARAN CON IMAGENES 3D DE ORGANOS INTACTOS EX VIVO, SE CERRARA LA BRECHA ENTRE IMAGENES IN VIVO Y MICROSCOPIA MEDIANTE TOMOGRAFIA OPTICA DE PROYECCION (OPT) Y MICROSCOPIA DE ILUMINACION SELECTIVA DE PLANO (SPIM), EL USO DE CELULAS INMUNES Y PATOGENOS TRANSGENICOS CONDUCIRA A UNA MEJOR COMPRENSION DE LA PATOGENESIS DE LA CRIPTOCOCOSIS Y RESPONDERA PREGUNTAS CLAVES SOBRE INTERACCIONES HUESPED-PATOGENO, SE GENERARAN HERRAMIENTAS PARA DETECCION RAPIDA IN VIVO DE DIFERENTES CEPAS, FACTORES DE VIRULENCIA, DIANAS TERAPEUTICAS Y NUEVOS MARCADORES DIAGNOSTICOS UTILIZANDO MUESTRAS CLINICAS DEL INSTITUTO PASTEUR, UTILIZAREMOS CEPAS TRANSGENICAS DE REFERENCIA (SUSCEPTIBLES A FARMACOS) PARA IDENTIFICAR ANTIFUNGICOS POTENCIALES, DISEÑO DE HERRAMIENTAS DIAGNÓSTICAS\DESARROLLO DE BIOMARCADORES\INTERACCIÓN PATÓGENO-HUESPED\ENFERMEDADES INFECCIOSAS\PATOGENICIDAD MICROBIANA\MECANISMOS MOLECULARES Y ESTRATEGIAS DE