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PID2020-117649RB-I00

Financiado

DESARROLLO DE TERAPIAS PERSONALIZADAS PARA CANCERES DEPENDIENTES DE WNT

LA ACTIVACION DE LA SEÑALIZACION DE WNT EN MUCHOS TIPOS DE CANCER, PARTICULARMENTE EN LA ENFERMEDAD AVANZADA, HA IMPULSADO EL DESARROLLO DE FARMACOS DIRIGIDOS A ESTA VIA. AQUELLOS QUE AVANZAN A LOS ENSAYOS CLINICOS SE DIRIGEN A PO... ver más

01/01/2020

ASOCIACION CENTRO...

248K€

Presupuesto del proyecto: 248K€

Líder del proyecto

ASOCIACION CENTRO DE INVESTIGACION COOPERATIV... Actividades de organizaciones profesionales asociacion

TRL 4-5 | 50K€

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Líder del proyecto

ASOCIACION CENTRO DE INVESTIGACION COOPERATIV... Actividades de organizaciones profesionales asociacion

TRL 4-5 | 50K€

Presupuesto del proyecto 248K€

Descripción del proyecto LA ACTIVACION DE LA SEÑALIZACION DE WNT EN MUCHOS TIPOS DE CANCER, PARTICULARMENTE EN LA ENFERMEDAD AVANZADA, HA IMPULSADO EL DESARROLLO DE FARMACOS DIRIGIDOS A ESTA VIA. AQUELLOS QUE AVANZAN A LOS ENSAYOS CLINICOS SE DIRIGEN A PORCUPINE PARA BLOQUEAR LA SECRECION DE WNT O BETA-CATENINA Y PROTEINAS ASOCIADAS PARA INHIBIR LA TRANSCRIPCION. LOS PRIMEROS CARECEN DE ESPECIFICIDAD, YA QUE TAMBIEN SE DIRIGEN A WNTS BENEFICIOSOS, Y LOS SEGUNDOS NO INHIBEN LAS SEÑALES DE WNT INDEPENDIENTES DE BETA-CATENINA, QUE SE ENCUENTRAN FRECUENTEMENTE ACTIVADAS EN EL CANCER METASTASICO. UNA SOLUCION ES APUNTAR A LOS WNT INDIVIDUALES CON ANTICUERPOS ESPECIFICOS Y USARLOS EN COMBINACION, ADAPTADOS AL TUMOR DEL PACIENTE. PROPONEMOS HACER ESTO MEDIANTE LA EXPLOTACION DE LOS RESULTADOS DE NUESTROS ESTUDIOS DE ANTICUERPOS WNT11, QUE IDENTIFICARON UN HOTSPOT EN UNA REGION ESTRUCTURALMENTE CONSERVADA QUE ES DE SECUENCIA VARIABLE EN OTROS WNTS. LA DEPLECION DEL EPITOPE DEL ANTICUERPO EN WNT11, Y EL EQUIVALENTE EN WNT-3A, INHIBE SUS ACTIVIDADES. MAS ADELANTE DEFINIREMOS EL HOTSPOT Y ANALIZAREMOS LOS FARMACOS QUE COMPITEN POR LA UNION DE LOS ANTICUERPOS WNT11 AL EPITOPE WNT11. SE GENERARAN MUTACIONES EQUIVALENTES EN TODOS LOS WNTS PARA IDENTIFICAR MIEMBROS REGULADOS DE LA MISMA MANERA. COMO PRUEBA DE PRINCIPIO, SE GENERARAN ANTICUERPOS DIRIGIDOS A LA MISMA REGION EN OTRO WNT. EL ANALISIS DE LOS DATOS DE EXPRESION GENICA DEL TUMOR DEL PACIENTE Y LOS ENSAYOS BASADOS EN CELULAS DE PERDIDA Y GANANCIA DE FUNCION DESTACAN EL POTENCIAL DE WNT11 COMO UN OBJETIVO PARA LA TERAPIA EN EL CANCER DE PROSTATA (CAP) Y COLORRECTAL (CRC). OBSERVAMOS QUE EL KNOCKOUT POR CRISPR/CAS DE WNT11 EN UNA LINEA CELULAR CRC CON ALTO WNT11 PRESENTA UN FENOTIPO DE DIFERENCIACION ESPECTACULAR QUE PUEDE SER RESCATADO CON MEDIO CONDICIONADO DE LA LINEA PARENTAL. ESTE DESCUBRIMIENTO FORMA EL PUNTO DE PARTIDA PARA EXPERIMENTOS DESTINADOS A DEFINIR LA SEÑAL DE WNT11 RESPONSABLE Y LA BASE DE UN CRIBADO DE INHIBIDORES DE WNT11. LOS ENFOQUES OMICOS SE UTILIZARAN EN PARALELO PARA IDENTIFICAR GENES Y PROTEINAS REGULADOS POR WNT11. LO MISMO SE HARA PARA LAS CELULAS CAP, UTILIZANDO ADEMAS DOS MODELOS PDX CON ALTO WNT11. LOS ESTUDIOS COMPLEMENTARIOS TENDRAN COMO OBJETIVO IDENTIFICAR LOS RECEPTORES IMPLICADOS. CON ESTE FIN, SE MEDIRA LA UNION DE WNT11 Y SUS MUTANTES A RECEPTORES CLAVE (FZD8, LRP6 Y ROR1) USANDO FORMAS ETIQUETADAS EXPRESADAS EN CELULAS KNOCKOUT PAN-FZD Y LRP5/6. ADEMAS, SE UTILIZARAN ANTICUERPOS RECOMBINANTES BLOQUEADORES DE FUNCION PARA COMPARAR LOS EFECTOS DE LA INHIBICION DE ESTOS RECEPTORES SOBRE EL CRECIMIENTO Y LA METASTASIS TUMORAL UTILIZANDO EL SISTEMA DE MEMBRANA CORIOALANTOIDEA DE POLLO (CAM). PARA MEDIR LOS EFECTOS SOBRE LA SEÑALIZACION DE WNT, SE HAN GENERADO LINEAS CELULARES QUE EXPRESAN REPORTEROS GFP DE SEÑALIZACION DE WNT CANONICA Y NO CANONICA. EL ANALISIS AUTOMATIZADO DE DATOS DE IMAGENES MORFOMETRICAS DE CULTIVOS 3D SE UTILIZARA PARA CORRELACIONAR LA SEÑALIZACION DE WNT CON FENOTIPOS MORFOLOGICOS, Y MICROSCOPIA INTRAVITAL PARA MEDIR LA SEÑALIZACION DE WNT DURANTE LA INVASION DE CELULAS TUMORALES Y LA METASTASIS. EN CONJUNTO, ESTOS ESTUDIOS PROFUNDIZARAN NUESTRA COMPRENSION DE LA SEÑALIZACION DE WNT11, PROPORCIONARAN INFORMACION PARA QUE LOS INHIBIDORES Y ANTICUERPOS DE WNT11 PUEDAN BLOQUEAR OTROS WNT Y OFRECERAN UN SISTEMA RAPIDO Y ASEQUIBLE PARA MEDIR LOS EFECTOS DE LOS INHIBIDORES DE WNT EN LA SEÑALIZACION DE WNT DURANTE LOS PROCESOS DE INVASION Y FORMACION DE METASTASIS. ENALAZACION DE WNT\ANTICUERPOS PARA BLOQUEAR FUNCION\CANCER DE PROSTATA

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