CARACTERIZACION PROTEOMICA Y GENOMICA DEL NUCLEO DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO NORMA...
CARACTERIZACION PROTEOMICA Y GENOMICA DEL NUCLEO DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO NORMAL Y DE SUS ALTERACIONES EN PACIENTES INFERTILES
PREVIAMENTE TANTO NOSOTROS COMO OTROS GRUPOS HEMOS CONTRIBUIDO A CARACTERIZAR EL PROTEOMA TOTAL DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO NORMAL, DE RELEVANCIA PARA LA INVESTIGACION FUNDAMENTAL, Y HEMOS IDENTIFICADO DIVERSAS ALTERACIONES EN PACIE...
PREVIAMENTE TANTO NOSOTROS COMO OTROS GRUPOS HEMOS CONTRIBUIDO A CARACTERIZAR EL PROTEOMA TOTAL DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO NORMAL, DE RELEVANCIA PARA LA INVESTIGACION FUNDAMENTAL, Y HEMOS IDENTIFICADO DIVERSAS ALTERACIONES EN PACIENTES INFERTILES, DEMOSTRANDO EL POTENCIAL DIAGNOSTICO DEL ANALISIS PROTEOMICO DEL ESPERMATOZOIDE, NO OBSTANTE QUEDA TODAVIA MUCHO POR HACER, ACTUALMENTE SIGUE IN CONOCERSE EN DETALLE LA COMPOSICION DEL PROTEOMA DEL NUCLEO DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO ASI COMO SU POTENCIAL EPIGENETICO, SE CONOCE QUE EL NUCLEO DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO CONTIENE APROXIMADAMENTE UN 15% DEL GENOMA PATERNO ORGANIZADO EN FORMA DE NUCLEOHISTONA Y APROXIMADAMENTE UN 85% ORGANIZADO EN FORMA DE NUCLEOPROTAMINA, Y EXISTE TAMBIEN EVIDENCIA DE QUE ESTOS DOS COMPONENTES SE DISTRIBUYEN DE FORMA DIFERENCIAL DENTRO DEL NUCLEO DEL ESPERMATOZOIDE, PERO SE DESCONOCE QUE OTRAS PROTEINAS, APARTE DE HISTONAS Y DE PROTAMINAS, SE ASOCIAN A CADA UNO DE ESTOS DOS DOMINIOS Y CUAL ES SU FUNCION, CON EL OBJETIVO DE CONTRIBUIR A CUBRIR ESTE VACIO DE CONOCIMIENTO, EN ESTE PROYECTO NOS PROPONEMOS INICIALMENTE CARACTERIZAR EL PROTEOMA DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO DE LOS DOMINIOS DE LA CROMATINA ASOCIADOS A HISTONAS Y EL PROTEOMA ASOCIADO A LOS DOMINIOS ORGANIZADOS EN FORMA DE NUCLEOPROTAMINA, ESTE OBJETIVO SE ABORDARA PURIFICANDO NUCLEOS DEL ESPERMATOZIDE SHUMANO DE CONTROLES Y FRACCIONANDO LOS COMPONENTES NUCLEOHISTONA Y NUCLEOPROTAMINA Y CARACTERIZANDO EL PROTEOMA ASOCIADO A CADA UNO DE ESTOS DOS DOMINIOS A TRAVES DE TECNICAS PROTEOMICAS (OBTENCION DE PEPTIDOS SEGUIDO DE LC-MS/MS Y, SIMULTANEAMENTE, SEPARACION BIDIMENSIONAL DE LAS PROTEINAS SEGUIDO DE SU IDENTIFICACION MEDIANTE MALDI-TOF O SECUENCIACION DE NOVO), ADICIONALMENTE SE CARACTERIZARA LA DISTRIBUCION DE GENES DEL GENOMA EN LOS DOMINIOS ASOCIADOS A HISTONAS Y EN LOS DOMINIOS ASOCIADOS A PROTAMINA A TRAVES DE LA HIBRIDACION DEL DNA GENOMICA CORRESPONDIENTE EN MICROARRAYS, DE ENTRE LAS PROTEINAS NUCLEARES NUEVAS PREVISIBLEMENTE IDENTIFICADAS SE SELECCIONARAN LAS 4-5 MAS INTERESANTES PARA PROCEDER A SU INMUNOLOCALIZACION UTILIZANDO ANTICUERPOS EN ESPERMATOZOIDES HUMANOS, EN BIOPSIAS TESTICULARES, Y EN RATON, SUBSIGUIENTEMENTE A TRAVES DE CHIP-ON-CHIP IDENTIFICAREMOS LOS GENES CONCRETOS ASOCIADOS A ESTAS 4-5 PROTEINAS NUCLEARES SELECCIONADAS, EL PROYECTO SE COMPLETARA A TRAVES DEL ESTUDIO DE LAS POSIBLES ALTERACIONES DEL PROTEOMA NUCLEAR Y DE SU DISTRIBUCION EN PACIENTES INFERTILES Y SU POSIBLE CORRELACION CON ALTERACIONES DE LA INTEGRIDAD GERMINAL Y DE LOS RESULTADOS DE REPRODUCCION ASISTIDA, PROTEOMICA\NUCLEO\ESPERMATOZOIDE\CROMATINA\INFERTILIDAD\NUCLEOHISTONA\NUCLEOPROTAMINA\PROTEOMAver más
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