Descripción del proyecto
LA RAPIDA DISEMINACION DE LA PESTE PORCINA AFRICANA (PPA) EN EUROPA DEL ESTE, EN EUROPA CENTRAL Y EN CHINA, HACEN PREVER QUE ESTA ENFERMEDAD VA A TENER EN LOS PROXIMOS AÑOS GRAN REPERCUSION EN LA INDUSTRIA PORCINA GLOBAL, POR TANTO, SE HACE MAS IMPORTANTE QUE NUNCA, EL DESARROLLO DE UNA VACUNA SEGURA Y EFICAZ, QUE NO EXISTE EN LA ACTUALIDAD, A PESAR DE QUE HAY DATOS CIENTIFICOS ESPERANZADORES QUE PERMITEN DEDUCIR QUE SERA POSIBLE SU CONSECUCION, EN LA PRESENTE PROPUESTA INVESTIGAREMOS ASPECTOS MOLECULARES RELACIONADOS CON GENES VIRALES Y CELULARES IMPLICADOS EN LAS BARRERAS O RESTRICCIONES DE DEFENSA CELULAR FRENTE A LA INFECCION POR VPPA, REALIZAREMOS UN ABORDAJE GLOBAL USANDO TRANSCRIPTOMICA PARA CONOCER COMO SE MODIFICAN CUANTITATIVA Y CUALITATIVAMENTE LOS TRANSCRITOS CELULARES SIGNIFICATIVOS A CONSECUENCIA DE LA INFECCION, TANTO EN FASES TEMPRANAS COMO TARDIAS, ESTE ANALISIS SE REALIZARA EN MACROFAGOS PORCINOS EN CULTIVO Y TAMBIEN EN LEUCOCITOS DE SANGRE PERIFERICA (PBLS) Y GANGLIOS DE ANIMALES INFECTADOS CON EL AISLADO VIRULENTO GEORGIA, MEDIANTE DIVERSAS COMPARACIONES Y ANALISIS BIOINFORMATICO PODREMOS IDENTIFICAR LAS VIAS CELULARES DE INTERACCION CON EL VIRUS,BASADOS EN ESTOS HALLAZGOS, ESTUDIAREMOS LOS FACTORES DE RESTRICCION INTRACELULARES QUE PUEDEN ACTUAR COMO DETERMINANTES DEL EXITO DE LA INFECCION, HAY DOS ASPECTOS DEL VPPA QUE PODRIAN TENER UNA ENORME IMPORTANCIA EN EL DESARROLLO DE UNA VACUNA Y QUE SON, LA MANIPULACION DE LA INMUNIDAD INNATA, Y EL PASO DEL VIRUS POR LA VIA ENDOCITICA, RESPECTO AL PRIMERO, SE HA DEMOSTRADO QUE MUTANTES DELECCIONADOS DE GENES QUE MANIPULAN NEGATIVAMENTE LA RESPUESTA INMUNE INNATA, RESULTAN EN VIRUS ATENUADOS, POR ESO, EN EL PRESENTE PROYECTO ANALIZAREMOS LOS GENES TEMPRANOS QUE SON CANDIDATOS A INTERFERIR CON LA RESPUESTA INNATA, POR EJEMPLO, LA UBIQUITIN CONJUGASA DEL VIRUS (UBCV1), YA QUE LA ACTIVACION DE LAS VIAS DE ESTA RESPUESTA INMUNE, CONLLEVA LA UBIQUITINACION Y DEGRADACION DE PROTEINAS REGULADORAS DE LA CASCADA, COMO DATOS PREVIOS, UBCV1 INTERACCIONA CON UNA E3 LIGASA TIPO CULLIN Y CON LA SUBUNIDAD 40S DEL RIBOSOMA Y PUEDE ESTAR RELACIONADA CON LA INICIACION DE LA TRADUCCION DE PROTEINAS, RESPECTO A LA SEGUNDA, HEMOS COMPROBADO QUE INHIBIDORES QUIMICOS DE LOS TRANSPORTADORES DE MEMBRANA ENDOSOMAL NPC1, SON CAPACES DE ABORTAR UNA INFECCION PRODUCTIVA DEL VPPA, LOS VIRIONES ENTRANTES QUEDAN RETENIDOS EN LOS ENDOSOMAS SIN COMENZAR LA REPLICACION, POR ELLO, ESTUDIAREMOS SI EXISTE UNA INTERACCION DIRECTA DEL GEN DE FUSION DEL VIRUS CON EL TRANSPORTADOR NPC1, COMO OCURRE EN LA INFECCION POR OTROS VIRUS HEMORRAGICOS, TALES COMO EL VIRUS EBOLA, EN LOS QUE NPC1 FUNCIONA COMO UN VERDADERO RECEPTOR INTRACELULAR, ADEMAS, EN ESTA FASE DEL PROYECTO, ANALIZAREMOS EL PASO DEL VIRUS POR LOS ENDOSOMAS Y LA ESTRUCTURA DE LAS FACTORIAS VIRICAS AL INICIO DE LA REPLICACION Y MEDIANTE MICROSCOPIA CORRELATIVA Y CRIO-MICROSCOPIA DE RAYOSX,RECIENTEMENTE SE HA OBTENIDO PROTECCION CRUZADA CON VARIAS VACUNAS BASADAS EN VIRUS ATENUADOS, PERO LOS RESULTADOS DE LAS PRUEBAS NO HAN SIDO SUFICIENTEMENTE BUENOS PARA SUSTENTAR NINGUNO DE LOS CANDIDATOS COMO DEFINITIVO, NUESTRA PROPUESTA, AL ABORDAR EVENTOS DE LA INFECCION POCO CONOCIDOS, PRETENDE DESCUBRIR NUEVAS DIANAS PARA EL DISEÑO RACIONAL DE UNA VACUNA EFICAZ Y SEGURA FRENTE A ESTE IMPORTANTE VIRUS, EN CASO DE ENCONTRAR DIANAS RELEVANTES A PARTIR DE LOS ESTUDIOS PROPUESTOS, SE GENERARAN VIRUS MUTANTES DE DELECCION QUE SERAN ANALIZADOS EN ANIMALES, PESTE PORCINA AFRICANA\INTERACCIONES\DIANAS DE RESTRICCIÓN\INMUNIDAD INNATA\VACUNA