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AGL2010-22229-C03-03

Financiado
RESPUESTA PORCINA AL ASFV. GENOMICA Y PROTEOMICA DE LA RESPUESTA A AISLADOS DE D...
RESPUESTA PORCINA AL ASFV. GENOMICA Y PROTEOMICA DE LA RESPUESTA A AISLADOS DE DISTINTA VIRULENCIA Y ANALISIS DE LA EXPRESION GENICA TRAS LA INMUNIZACION CON VACUNAS DE ADN LA PESTE PORCINA AFRICANA ES UNA ENFERMEDAD VIRAL, FATAL Y MUY CONTAGIOSA, QUE AFECTA A CERDOS Y CAUSA GRANDES PERDIDAS ECONOMICAS EN TODO EL MUNDO, LA ENFERMEDAD ESTA MUY EXTENDIDA EN AFRICA Y SE DAN BROTES EN EL ESTE DE EUROPA L... LA PESTE PORCINA AFRICANA ES UNA ENFERMEDAD VIRAL, FATAL Y MUY CONTAGIOSA, QUE AFECTA A CERDOS Y CAUSA GRANDES PERDIDAS ECONOMICAS EN TODO EL MUNDO, LA ENFERMEDAD ESTA MUY EXTENDIDA EN AFRICA Y SE DAN BROTES EN EL ESTE DE EUROPA LO CUAL, JUNTO CON LA AUSENCIA DE UNA VACUNA EFECTIVA, LA CONVIERTE EN UNA GRAN AMENAZA PARA EL SECTOR PORCINO ESPAÑOL, EL USO DE LOS METODOS TRADICIONALES PARA EL DISEÑO DE VACUNAS HAN FALLADO CON ESTA ENFERMEDAD, PROBABLEMENTE DEBIDO A LA COMPLEJIDAD DEL VIRUS Y AL ESCASO CONOCIMIENTO QUE SE TIENE DEL TIPO DE RESPUESTA INMUNE QUE PROTEGE FRENTE A LA INFECCION, CON ESTE PROYECTO PRETENDEMOS AUMENTAR EL CONOCIMIENTO DE LA RESPUESTA INMUNE PORCINA, LO QUE ES NECESARIO PARA EL DISEÑO RACIONAL DE UNA VACUNA EFECTIVA FRENTE AL ASFV, ESTO NOS PERMITIRA COMPRENDER MEJOR LA INTERACCION VIRUS-HUESPED CON VISTAS AL DESARROLLO DE UNA VACUNA, ASI COMO CONOCER LAS RUTAS IMPLICADAS EN LA REGULACION DE LA RESPUESTA INMUNE DEL CERDO A LA INFECCION POR PATOGENOS, PARA CONSEGUIR ESTOS PROPOSITOS, DESARROLLAREMOS LOS SIGUIENTES OBJETIVOS:- CARACTERIZAR EL PATRON GLOBAL DE CAMBIOS DE GENES Y PROTEINAS OCURRIDOS EN TEJIDOS DEL CERDO Y CAUSADOS POR LA INFECCION IN VIVO DE CERDOS CON DISTINTOS AISLADOS DEL VIRUS CON DIFERENTE PATOGENICIDAD, PARA ESTO, USAREMOS EL AFFYMETRIX PORCINE GENECHIP Y ITRAQ, UNA TECNOLOGIA PROTEOMICA DE RECIENTE IMPLANTACION, ADEMAS, MEDIANTE RTQ-PCR, SE ANALIZARA UN PANEL DE GENES CON UNA FUNCION RELEVANTE EN EL SISTEMA INMUNE, LAS RUTAS BIOLOGICAS RELACIONADAS CON LOS GENES Y PROTEINAS DIFERENCIALMENTE EXPRESADOS SE ANALIZARAN CON EL SOFTWARE IPA,- CARACTERIZAR LOS GENES Y PROTEINAS DIFERENCIALMENTE EXPRESADOS, COMO RESPUESTA A LA INFECCION CON ASFV, DE ANIMALES S PREVIAMENTE VACUNADOS CON DISTINTAS ESTRATEGIAS, USAREMOS LA MISMA TECNOLOGIA QUE EN EL APARTADO ANTERIOR- ESTUDIAR LA RESPUESTA INMUNE ESPECIFICA OBTENIDA TRAS LA VACUNACION CON PROTEINAS DE DNA, LA RESPUESTA HUMORAL SERA EVALUADA POR ELISA Y WESTERN BLOT DE LAS PROTEINAS P30 Y P54 MIENTRAS QUE LA RESPUESTA TH1, TH2 Y TH17 SERA ANALIZADA POR RTQ-PCR CON VISTAS A ESTABLECER EL PERFIL DE CITOQUINAS EN MUESTRAS DE SANGRE, ADEMAS, RNA PROCEDENTE DE PBMC AISLADOS TRAS LA TERCERA VACUNACION CON PCMV-UBSHAPQ SE USARA PARA HIBRIDAR CON EL MICROARRAY IMMOPIG DESARROLLADO POR EL INRA Y QUE CONTIENE GENES ESPECIFICOS DEL COMPLEJO SLA Y GENES CON UNA IMPORTANTE FUNCION INMUNE,- DETERMINAR EL PATRON DE EXPRESION GENICA DE MACROFAGOS DESPUES DE LA INFECCION CON ASFV RECOMBINANTE INDUCIBLE EXPRESANDO GENES IMPLICADOS EN LA MORFOGENESIS, LA EXPRESION DE RNA DE MACROFAGOS INFECTADOS IN VITRO CON BA71 WT O BA71 INDUCIBLE , EN PRESENCIA O AUSENCIA DE IPTG, SERA CUANTIFICADO POR RTQ-PCR CON UN PANEL DE GENES RELACIONADOS CON LA RESPUESTA INMUNE, INCLUYENDO LAS CITOQUINAS TH1 Y TH2, ADEMAS, SOBRENADANTE DEL CULTIVO DE LOS MACROFAGOS SE USARA PARA CUANTIFICAR LAS PROTEINAS IFNα, TNFα Y IL8 POR ELISA ASFV\CERDO\RESPUESTA INMUNE\VACUNAS DE DNA\MICROARRAY\PROTEOMICS ver más
01/01/2010
UCO
85K€
Perfil tecnológico estimado

Línea de financiación: concedida

El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2010-01-01
Presupuesto El presupuesto total del proyecto asciende a 85K€
Líder del proyecto
UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.
Total investigadores 1411