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BFU2015-66429-P

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BASES MOLECULARES DEL CONTROL DE LA APERTURA Y CIERRE ("GATING") DE LOS CANALES...

BASES MOLECULARES DEL CONTROL DE LA APERTURA Y CIERRE ("GATING") DE LOS CANALES DE POTASIO KCNH AL IGUAL QUE OCURRE EN OTROS CANALES DE POTASIO DEPENDIENTES DE VOLTAJE (KV), LAS PROPIEDADES FUNCIONALES QUE DETERMINAN EL PAPEL FISIOLOGICO Y/O FISIOPATOLOGICO DE LOS CANALES DE LA FAMILIA KCNH DESCANSAN EN PRIMER LUGAR EN LA AR... ver más

01/01/2015

UNIOVI

119K€

Presupuesto del proyecto: 119K€

Líder del proyecto

Universidad de Oviedo No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 787

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2015-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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Líder del proyecto

Universidad de Oviedo No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 787

Presupuesto del proyecto 119K€

Descripción del proyecto AL IGUAL QUE OCURRE EN OTROS CANALES DE POTASIO DEPENDIENTES DE VOLTAJE (KV), LAS PROPIEDADES FUNCIONALES QUE DETERMINAN EL PAPEL FISIOLOGICO Y/O FISIOPATOLOGICO DE LOS CANALES DE LA FAMILIA KCNH DESCANSAN EN PRIMER LUGAR EN LA ARQUITECTURA MOLECULAR ESPECIFICA DE LA PROTEINA Y EN SU CAPACIDAD DE SUFRIR UNA SERIE DE REORGANIZACIONES DINAMICAS Y TRANSITORIAS QUE CONLLEVAN SU APERTURA, INACTIVACION Y CIERRE (EL DENOMINADO GENERICAMENTE "GATING"), ADEMAS, EN LOS ULTIMOS AÑOS SE HA OBSERVADO QUE EN EL "GATING" DE CANALES KV COMO LOS KCNH PROBABLEMENTE INTERVIENEN DE MODO CRUCIAL MECANISMOS ALOSTERICOS ENTRE LOS MODULOS SENSOR DE VOLTAJE Y PORO DEL CANAL, Y QUE EL ACOPLAMIENTO ENTRE AMBOS ESTA INFLUIDO DE MODO CRITICO POR LOS DOMINIOS CITOPLASMATICOS DE LA PROTEINA, SIN EMBARGO, TANTO EN EL CASO DEL CANAL HERG QUE HA CENTRADO NUESTRO TRABAJO EN LOS ULTIMOS AÑOS COMO EN EL DE OTROS CANALES KV, LA NATURALEZA EXACTA DE LA MAYORIA DE LAS YA CITADAS INTERACCIONES TRANSITORIAS PERMANECE AUN SIN DILUCIDAR, EN ESTE SENTIDO, NUESTROS DATOS RECIENTES CON CANALES KCNH EN LOS QUE EL LAZO PROTEICO QUE UNE LOS MODULOS SENSOR DE VOLTAJE Y PORO DE LA PROTEINA HA SIDO ROTO, NOS HAN LLEVADO A REFUTAR LA VISION VIGENTE DE UN ACOPLAMIENTO MECANICO ENTRE ELLOS Y A POSTULAR UN MECANISMO DE "GATING" ALTERNATIVO BASADO EN INTERACCIONES NO COVALENTES / ALOSTERICAS ENTRE DICHOS MODULOS, POR TODO ELLO, EN ESTE PROYECTO PLANTEAMOS COMO OBJETIVO GENERAL EL ESTUDIO DE LA FUNCIONALIDAD DE LOS CANALES DE POTASIO DE LA FAMILIA KCNH (EN CONCRETO HERG, PERO TAMBIEN EAG1), UTILIZANDO EN GRAN MEDIDA LA HERRAMIENTA APORTADA POR EL USO DE LOS DEMICANALES QUE CONSTITUYEN SUS DOS MODULOS FUNCIONALES PARA LLEGAR A UN MEJOR CONOCIMIENTO DE ALGUNAS DE LAS POSIBLES REORGANIZACIONES CONFORMACIONALES E INTERACCIONES, FUNDAMENTALMENTE ALOSTERICAS, ASOCIADAS A DICHA FUNCIONALIDAD, PARA ELLO, PROPONEMOS LOS SIGUIENTES OBJETIVOS CONCRETOS: 1, DILUCIDAR EL MECANISMO MOLECULAR POR EL QUE SE PRODUCE EL "GATING" DE LOS CANALES ENSAMBLADOS A PARTIR DE UN MODULO SENSOR DE VOLTAJE Y UN MODULO PORO INDEPENDIENTES, 2, CONOCER LOS REQUERIMIENTOS MOLECULARES NECESARIOS PARA LA OBTENCION DE CANALES FUNCIONALES ENSAMBLADOS A PARTIR DE DEMICANALES AMINO Y CARBOXILO TERMINALES INDEPENDIENTES, 3, DISTINGUIR SI LA INFLUENCIA DE LOS DOMINIOS CITOPLASMATICOS SOBRE EL PROCESO DE "GATING" SE PRODUCE MEDIANTE SU INTERACCION DIRECTA CON LA MAQUINARIA DE APERTURA Y CIERRE, O BIEN MEDIANTE UN MECANISMO ALOSTERICO MEDIADO POR LAS REGIONES CNBD Y "C-LINKER" RELATIVAMENTE DISTANTES Y SITUADAS EN EL C-TERMINAL DE LOS CANALES, 4, DETECTAR REORGANIZACIONES DINAMICAS DEPENDIENTES DE VOLTAJE DE LOS DOMINIOS CITOPLASMATICOS DE LOS CANALES KCNH DURANTE EL TRANSITO DE ESTOS ENTRE CONFORMACIONES DE ABIERTO, CERRADO O INACTIVO, MEDIANTE LA MEDIDA DE VARIACIONES DE FRET ("FLUORESCENCE RESONANCE ENERGY TRANSFER") EN RESPUESTA A PULSOS DE VOLTAJE, ESPERAMOS OBTENER ASI RESULTADOS QUE NOS PERMITAN RECONOCER SECUENCIAS O DOMINIOS CITOPLASMATICOS QUE DETERMINAN EL ENSAMBLAJE APROPIADO Y EL SUBSIGUENTE TRAFICO EFECTIVO DE LOS DEMICANALES A LA MEMBRANA CELULAR, ASI COMO CONOCER DETALLES MOLECULARES DE LOS HIPOTETICOS MECANISMOS ALOSTERICOS IMPLICADOS EN EL CONTROL DEL GATING DE LOS CANALES KCNH EN PARTICULAR Y EN GENERAL DE LOS CANALES KV, CANALES DE POTASIO DEPENDIENTES DE VOLTA\KCNH\HERG\EAG1\DINÁMICA CONFORMACIONAL\FLUORIMETRÍA EN CLAMP DE VOLTAJE\RELACIONES ESTRUCTURA-FUNCIÓN

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