ADMINISTRACION DE NANOPARTICULAS DE QUITOSANO-DNA PLASMIDICO PARA BIOSINTETIZAR...
ADMINISTRACION DE NANOPARTICULAS DE QUITOSANO-DNA PLASMIDICO PARA BIOSINTETIZAR ACIDOS GRASOS POLIINSATURADOS OMEGA-3 Y AHORRAR PROTEINA EN SPARUS AURATA
ESTE PROYECTO PRETENDE IMPULSAR LA CONVERSION DE CARBOHIDRATOS A ACIDOS GRASOS POLIINSATURADOS OMEGA-3 DE CADENA LARGA (N-3 LCPUFA), COMO ACIDO EICOSAPENTANOICO (EPA) Y ACIDO DOCOSAHEXANOICO (DHA), Y AHORRAR PROTEINA EN DORADA (SP...
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Descripción del proyecto
ESTE PROYECTO PRETENDE IMPULSAR LA CONVERSION DE CARBOHIDRATOS A ACIDOS GRASOS POLIINSATURADOS OMEGA-3 DE CADENA LARGA (N-3 LCPUFA), COMO ACIDO EICOSAPENTANOICO (EPA) Y ACIDO DOCOSAHEXANOICO (DHA), Y AHORRAR PROTEINA EN DORADA (SPARUS AURATA), LO QUE PERMITIRIA REDUCIR HARINA Y ACEITE DE PESCADO EN PIENSOS ACUICOLAS Y SUSTITUIR PARCIALMENTE PROTEINA POR CARBOHIDRATOS. TODO ELLO FACILITARIA UNA ACUICULTURA MAS SOSTENIBLE, REDUCIENDO COSTOS Y DEPENDENCIA DE CALADEROS PESQUEROS. ADEMAS, LA PRODUCCION DE PECES CON NIVELES ELEVADOS DE N-3 LC-PUFA CONTRIBUIRIA A PROVEER ALIMENTOS FUNCIONALES RICOS EN EPA Y DHA PARA LA DIETA HUMANA. LAS HIPOTESIS DE TRABAJO DEL PROYECTO SON: A) LA SOBREEXPRESION DE DESATURASAS Y ELONGASAS DE ACIDOS GRASOS IMPULSARIA LA SINTESIS DE EPA Y DHA EN S. AURATA; Y B) LA CO-SOBREEXPRESION DE SREBP1A, FACTOR DE TRANSCRIPCION QUE INDUCE LA CONVERSION DE CARBOHIDRATOS A LIPIDOS EN DORADA, JUNTO CON DESATURASAS Y ELONGASAS DE ACIDOS GRASOS FAVORECERIA CONVERTIR CARBOHIDRATOS A EPA Y DHA. LOS OBJETIVOS ESPECIFICOS DEL PROYECTO SON:1) PROMOVER LA SINTESIS DE N-3 LC PUFA MEDIANTE LA ADMINISTRACION ORAL E INTRAPERITONEAL DE NANOPARTICULAS DE QUITOSANO-TRIPOLIFOSFATO (TPP) ACOMPLEJADAS CON PLASMIDOS PARA SOBREEXPRESAR FAT-1 Y FAT-2 DE CAENORHABDITIS ELEGANS, ENZIMAS AUSENTES EN VERTEBRADOS QUE CONVIERTEN ACIDO OLEICO A ACIDO LINOLEICO Y ACIDO ALFA-LINOLENICO (ALA), PRECURSORES DE LAS SERIES LC-PUFA N-6 Y N-3, RESPECTIVAMENTE. DADA LA BAJA CAPACIDAD EN VERTEBRADOS PARA GENERAR EPA Y DHA A PARTIR DE ALA, TAMBIEN SE SOBREEXPRESARAN LA DESATURASA FADS2 Y LA ELONGASA ELOVL5 DE DORADA. SE ENSAYARAN LAS CUATRO ENZIMAS POR SEPARADO Y LA COMBINACION DE FAT-1 CON FAT-2, FADS2 Y ELOVL5, EN DORADAS ALIMENTADAS CON 4 DIETAS CON DIFERENTES MEZCLAS DE ACEITES VEGETALES.2) ESTIMULAR LA CONVERSION DE CARBOHIDRATOS A N-3 LC PUFA ADMINISTRANDO ORAL E INTRAPERITONEALMENTE NANOPARTICULAS DE QUITOSANO-TPP-DNA PARA CO-SOBREEXPRESAR SREBP1A Y LA COMBINACION ENZIMATICA QUE PRODUZCA MAS EPA Y DHA EN EL OBJETIVO ANTERIOR. SE USARAN 3 DIETAS CON DIFERENTES NIVELES DE HARINA DE PESCADO Y RELACION DE PROTEINA SOBRE CARBOHIDRATOS.3) FACILITAR LA FUTURA APLICACION INDUSTRIAL DE TECNOLOGIAS BASADAS EN NANOPARTICULAS DE QUITOSANO ANALIZANDO EL EFECTO DE DIETAS SUPLEMENTADAS CON NANOPARTICULAS DE QUITOSANO-TPP-DNA PARA CO-SOBREEXPRESAR SREBP1A Y LA COMBINACION ENZIMATICA QUE PRODUZCA MAS EPA Y DHA EN EL PRIMER OBJETIVO. PIENSOS PREPARADOS CON 2 NIVELES DE NANOPARTICULAS SE SUMINISTRARAN EN 2 ESTADIOS DE DESARROLLO (15 G Y 200-250 G), DURANTE 16 SEMANAS SIGUIENDO 3 PROTOCOLOS DE ALIMENTACION SUPLEMENTADA: 2 DIAS POR SEMANA, SEMANAL Y CADA 2 SEMANAS.EL USO DE NANOPARTICULAS DE QUITOSANO-TPP-DNA PERMITE SOBREEXPRESAR TRANSITORIAMENTE GENES SIN GENERAR ORGANISMOS TRANSGENICOS. EN LOS 3 OBJETIVOS SE EVALUARA EL EFECTO METABOLICO ENSAYANDO METABOLITOS EN SANGRE, ACIDOS GRASOS EN HIGADO Y MUSCULO, ASI COMO ACTIVIDADES ENZIMATICAS Y ANTIOXIDANTE, LIPOGENESIS DE NOVO Y METABOLITOS POR RMN Y EXPRESION GENICA EN HIGADO. TAMBIEN SE DETERMINARA LA TASA DE CRECIMIENTO ESPECIFICO, COMPOSICION CORPORAL, TASA DE CONVERSION DE ALIMENTO Y RETENCION DE PROTEINA Y LIPIDOS. ADICIONALMENTE, SE HARA UN ANALISIS TRANSCRIPTOMICO (RNA-SEQ) EN DORADAS ALIMENTADAS CON DIETAS SUPLEMENTADAS PARA IDENTIFICAR CAMBIOS EN EL PATRON DE EXPRESION GENICA Y MARCADORES DE INTERES. LOS RESULTADOS SE TRANSFERIRAN A EMPRESAS DE ACUICULTURA Y NUTRICION PARA MEJORAR LA PRODUCCION DE DORADA. CIDOS GRASOS OMEGA-3\SPARUS AURATA\ALIMENTO FUNCIONAL\AHORRO DE PROTEINA\TERAPIA GENICA TRANSITORIA\QUITOSANO\SREBP1A\ELONGASAS DE ACIDOS GRASOS\DESATURASAS DE ACIDOS GRASOS
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