Descripción del proyecto
UNA DE LAS AREAS MAS ATRACTIVAS DE LA BIOLOGIA ES EL CONOCIMIENTO DE COMO LOS ORGANISMOS GENERAN Y MANTIENEN UNA FORMA PREDETERMINADA, EN LOS HONGOS LA PARED CELULAR ES UN ELEMENTO MORFOGENETICO ESENCIAL, YA QUE ES LA ULTIMA RESPONSABLE DEL MANTENIMIENTO DE LA FORMA CELULAR, NUESTRO OBJETIVO GENERAL ES ESTUDIAR COMO SE REGULA EL PROCESO DE BIOSINTESIS DEL B-GLUCANO, UN COMPONENTE ESENCIAL DE LA PARED CELULAR, POR LOS MECANISMOS DE TRANSPORTE VESICULAR, ANALIZAREMOS LA IMPLICACION DE LA CLATRINA Y DEL COMPLEJO ADAPTADOR AP-2 DE SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE EN DICHO PROCESO, EL TERMINO EXOMERO SE REFIERE A UN CONJUNTO DE PROTEINAS DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE QUE FORMAN UNA CUBIERTA EN VESICULAS DEL GOLGI TARDIO ESPECIALIZADAS EN EL TRANSPORTE DE CIERTAS PROTEINAS DE SUPERFICIE, COMO SON LA QUITIN SINTASA CHS3P, TRANSGLICOSIDASA CHR2P Y FUS1P (UNA PROTEINA NECESARIA PARA LA FUSION CELULAR DURANTE LA CONJUGACION), EL EXOMERO ESTA COMPUESTO POR UNA PROTEINA ADAPTADORA, CHS5P, A LA QUE SE ANCLAN CHS6 Y SUS PROTEINAS HOMOLOGAS (BCH1P, BUD7P Y BCH2P, DENOMINADAS GENERICAMENTE CHAPS), MIENTRAS QUE CHS6P ES NECESARIA PARA LA SINTESIS DE QUITINA Y BCH1P Y BUD7 SON NECESARIAS PARA EL TRANSPORTE DE FUS1P, LA FUNCION DE BCH2P NO SE CONOCE, EN S, POMBE NO HAY SINTESIS DE QUITINA DURANTE EL CICLO VEGETATIVO NI PROTEINAS HOMOLOGAS A CHR2P O A FUS1P, SIN EMBARGO HAY UNA PROTEINA (CFR1P) SIMILAR A CHS5P Y UNA PROTEINA (CSR1P) SIMILAR A CHS6P, ESTUDIAREMOS SI LAS PROTEINAS DEL EXOMERO CFR1P, CSR1P (EN S,POMBE) Y BCH2P (EN SACCHAROMYCES CEREVISIAE) REGULAN LA SINTESIS DEL B-GLUCANO, TAMBIEN ANALIZAREMOS SI LA CLATRINA Y/O EL EXOMERO DE S, POMBE REGULAN A LAS PROTEINAS DNI1P Y DNI2P, DOS PROTEINAS SIMILARES A LAS CLAUDINAS QUE ESTAN IMPLICADAS EN REMODELACION DE LA PARED CELULAR DURANTE LA CONJUGACION, FINALMENTE, CON EL FIN DE ENCONTRAR NUEVAS PROTEINAS IMPLICADAS EN EL TRANSPORTE VESICULAR Y EN LA BIOSINTESIS DEL B-GLUCANO SE REALIZARAN BUSQUEDAS MEDIANTE ENSAYOS DE DOS HIBRIDOS, IDENTIFICACION DE GENES QUE SUPRIMAN POR SOBREEXPRESION EL FENOTIPO ASOCIADO A LOS MUTANTES ESTUDIADOS, Y MEDIANTE SELECCION DE CEPAS CON UNA ENDOCITOSIS ANORMAL DE LA B-GLUCAN SINTASA BGS1P UTILIZANDO UNA COLECCION DE CEPAS VIABLES CON LOS GENES DE S, POMBE DELECIONADOS,