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RTI2018-093901-B-I00

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TERAPIA GENICA MEDIADA POR PPRHS: VEHICULIZACION, SILENCIAMIENTO, REPARACION Y A...

TERAPIA GENICA MEDIADA POR PPRHS: VEHICULIZACION, SILENCIAMIENTO, REPARACION Y APROXIMACIONES IN VIVO PREVIAMENTE HABIAMOS DEMOSTRAMOS EL POTENCIAL DE LA TECNOLOGIA DESARROLLADA POR NUESTRO GRUPO, QUE DENOMINAMOS PINZAS DE DNA A BASE DE POLIPURINAS UNIDAS POR ENLACES DE TIPO HOOGSTEEN REVERSO (PPRH), COMO HERRAMIENTAS PARA EL SILE... ver más

01/01/2018

121K€

Presupuesto del proyecto: 121K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE BARCELONA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 327

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2018-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE BARCELONA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 327

Presupuesto del proyecto 121K€

Descripción del proyecto PREVIAMENTE HABIAMOS DEMOSTRAMOS EL POTENCIAL DE LA TECNOLOGIA DESARROLLADA POR NUESTRO GRUPO, QUE DENOMINAMOS PINZAS DE DNA A BASE DE POLIPURINAS UNIDAS POR ENLACES DE TIPO HOOGSTEEN REVERSO (PPRH), COMO HERRAMIENTAS PARA EL SILENCIAMIENTO GENICO, TANTO IN VITRO CONTRA LA DIHIDROFOLATO REDUCTASA (DHFR), TELOMERASA, SURVIVINA, BCL2, TOPOISOMERASA1, MDM2, MYC, MTOR, CD47/SIRP ALFA Y PDL-1/PD1, COMO IN VIVO PARA LA PROTEINA ANTIAPOPTOTICA SURVIVINA, POSTERIORMENTE, DEMOSTRAMOS LA CAPACIDAD DE LOS PPRHS PARA CORREGIR MUTACIONES PUNTUALES EN EL LOCUS ENDOGENO UTILIZANDO COMO MODELO EL GEN DHFR, ADEMAS HEMOS COMPROBADO LA AUSENCIA DE EFECTOS OFF TARGET DE LOS PPRHS COMO HERRAMIENTA SILENCIADORA MEDIANTE APROXIMACIONES DE GENOMICA FUNCIONAL Y SU BAJA TOXICIDAD EN MODELOS CELULARES DE HIGADO Y RIÑON,EL PROYECTO ACTUAL INCLUYE LAS MODIFICACIONES SUGERIDAS POR LA COMISION DE EVALUACION DE LA CONVOCATORIA ANTERIOR (BASICAMENTE VEHICULIZACION Y EXPERIMENTOS IN VIVO), Y CONSTA DE 3 APARTADOS PRINCIPALES CON EL OBJETIVO DE EXTENDER EL CAMPO DE APLICACION DE NUESTRA TECNOLOGIA COMO HERRAMIENTA DE TERAPIA GENICA: I) MEJORAR LA INTERNALIZACION DE LOS PPRHS, QUE HASTA AHORA HABIAMOS REALIZADO MEDIANTE EL LIPOSOMA CATIONICO DOTAP, CON NUEVAS APROXIMACIONES TANTO IN VITRO COMO IN VIVO: I) UTILIZANDO UNA TECNOLOGIA INNOVADORA BASADA EN NANOPARTICULAS DE ORO PARA TRANSFECTAR DNA; II) POR NANOPARTICULAS BIOCOMPATIBLES Y BIODEGRADABLES A BASE DE COMBINACIONES DE ACIDO HIALURONICO Y PROTAMINA; Y III) UTILIZANDO APROXIMACIONES CON CONSTRUCCIONES DE VECTORES ADENOASOCIADOS CON GRAN EFICIENCIA DE TRANSFECCION Y ESPECIFICIDAD DE TEJIDO,II) EXPLORAR LA CAPACIDAD DE LOS PPRHS DE INTERFERIR CON EL PROCESO DE EMPALMAMIENTO DEL RNA COMO DIANA TERAPEUTICA, EN ESTA DIRECCION SE DISEÑARAN PPRHS DIRIGIDOS CONTRA LOS FACTORES DE EMPALMAMIENTO SF3B1 Y SRSF1 Y SE EVALUARA MEDIANTE GENOMICA FUNCIONAL EL IMPACTO GLOBAL SOBRE EL EMPALMAMIENTO DEL MRNA IN VITRO, TAMBIEN SE DETERMINARA SU EFECTO SOBRE DISTINTAS DIANAS COMO EL RECEPTOR DE ESTROGENOS Y CHK1, INVOLUCRADO EN EL ESTRES REPLICATIVO POR DAÑO EN EL DNA, SE DISEÑARAN PPRHS ESPECIFICOS CONTRA ESTAS DIANAS PARA VALORAR SU SILENCIAMIENTO GENICO MEDIANTE NUESTRA TECNOLOGIA, Y SE ENSAYARAN TAMBIEN TRATAMIENTOS COMBINADOS ATACANDO A LA VEZ AL GEN DIANA DIRECTAMENTE Y AL PROCESO DE SU EMPALMAMIENTO ALTERNATIVO, SUBSECUENTEMENTE, SE PROCEDERA A REALIZAR ENSAYOS IN VIVO EN MODELOS DE PDTXS DERIVADOS DE TUMORES DE MAMA OBTENIDOS A PARTIR DE PACIENTES,III) EXPANDIR LA UTILIZACION DE PPRHS PARA CORREGIR MUTACIONES PUNTUALES EN DISTINTOS MODELOS GENICOS PARA CONFIRMAR LA GENERALIDAD DE SU CAPACIDAD DE REPARAR EL DNA (DEMOSTRADA PARA EL GEN DHFR EN EL PROYECTO ANTERIOR) Y DEFINIR SU POTENCIAL TERAPEUTICO EN ENFERMEDADES RARAS, COMO MODELOS PARA LA REPARACION SE UTILIZARAN MUTACIONES POR CODON DE PARADA EN: 1) EL GEN DE LA ADENOSIL FOSFORRIBOSIL TRANSFERASA (APRT) RESPONSABLE DE LA UROLITIASIS POR 2,8 DIHIDROXIADENINA, DONDE SE PROCEDERA A REALIZAR WHOLE GENOME SEQUENCING DE LOS MUTANTES REPARADOS PARA COMPROBAR LA AUSENCIA DE EFECTOS OFF-TARGET; Y 2) EL GEN FANCA, RESPONSABLE DE LA ANEMIA DE FANCONI, UTILIZANDO CELULAS DERIVADAS DE PACIENTES, EN LAS QUE SE PROCEDERA A DEEP SEQUENCING PARA DETERMINAR EL PORCENTAJE DE REPARACION MEDIADA POR LOS PPRHS, PPRHS\VEHICULIZACIÓN\SILENCIAMIENTO GÉNICO\EMPALMAMIENTO\MUTACIÓN

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