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SAF2014-51825-R

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PPRHS: DISEÑO AVANZADO, VEHICULIZACION, OMICA Y APLICACIONES TERAPEUTICAS EN LIN...

PPRHS: DISEÑO AVANZADO, VEHICULIZACION, OMICA Y APLICACIONES TERAPEUTICAS EN LINFOMAS, INMUNOTERAPIA Y REPARACION GENICA. SE PROCEDERA A REALIZAR UN DESARROLLO AVANZADO DE LAS PINZAS DE POLIPURINAS (PPRHS), ORIGINALMENTE DISEÑADAS EN NUESTRO LABORATORIO, EN EL PROYECTO ANTERIOR DEMOSTRAMOS SU FUNCIONALIDAD, SECUENCIO-ESPECIFICA, COMO SILENCIADORAS DE... ver más

01/01/2014

121K€

Presupuesto del proyecto: 121K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE BARCELONA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 327

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2014-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE BARCELONA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 327

Presupuesto del proyecto 121K€

Descripción del proyecto SE PROCEDERA A REALIZAR UN DESARROLLO AVANZADO DE LAS PINZAS DE POLIPURINAS (PPRHS), ORIGINALMENTE DISEÑADAS EN NUESTRO LABORATORIO, EN EL PROYECTO ANTERIOR DEMOSTRAMOS SU FUNCIONALIDAD, SECUENCIO-ESPECIFICA, COMO SILENCIADORAS DE LA EXPRESION GENICA, TANTO IN VITRO COMO IN VIVO, ASI COMO SUS VENTAJAS EN TERMINOS DE ESTABILIDAD, SENCILLEZ Y ECONOMIA DE DISEÑO, ASI COMO SU FALTA DE INMUNOGENICIDAD RESPECTO A LOS SIRNAS, ASI MISMO SE DEMOSTRO SU CAPACIDAD PARA PROMOVER LA REPARACION GENICA DE MUTACIONES PUNTUALES EN EL LOCUS ENDOGENO, EN EL PROYECTO ACTUAL SE MEJORARAN LOS PPRHS EN DISEÑO Y VEHICULIZACION, Y SE ESTUDIARA SI POSEEN TOXICIDAD, POR OTRA PARTE, SE INVESTIGARAN APLICACIONES ESPECIFICAS EN LINFOMAS, SOBRE DIANAS TERAPEUTICAS DE INMUNOTERAPIA Y EN PROTOCOLOS DE TERAPIA GENICA, TANTO DE REPARACION PUNTUAL COMO DE SALTO DE EXON, LOS OBJETIVOS PROPUESTOS SON:1) DISEÑO AVANZADO, VEHICULIZACION, OMICA Y TOXICIDAD DE LOS PPRHS, I) SE ESTUDIARA EL EFECTO DE SUSTITUCIONES DE BASES EN LOS PPRHS ENFRENTADAS A LAS INTERRUPCIONES DE PURINAS DE LAS SECUENCIAS PIRIMIDINICAS DIANA, PARA INCREMENTAR LA ESPECIFICIDAD Y LA UNION, SE VALORARA EL EFECTO DE LA LONGITUD EN UN RANGO DE 20-30 NUCLEOTIDOS, LOS EFECTOS OBSERVADOS SE COMPARARAN CON LOS PRODUCIDOS POR TFOS HOMOLOGOS, SE DISEÑARAN PPRHS EN FORMA DE DOBLE CUÑA DE MANERA QUE LA CADENA DE DNA DESPLAZADA SEA CAPTURADA Y ESTABILIZADA POR UNA PROLONGACION PIRIMIDINICA DEL PPRH Y SE VALORARA SU EFECTIVIDAD EN LOS PARAMETROS DE UNION Y ACTIVIDAD BIOLOGICA, II) APARTE DE LOS LIPOSOMAS CATIONICOS, SE EXPLORARAN OTROS METODOS DE VEHICULIZACION CARENTES DE EFECTOS ADVERSOS Y COMPATIBLES CON UNA POSIBLE UTILIZACION EN CLINICA, SE ESTUDIARA LA POSIBILIDAD DE INTERNALIZACION Y POSTERIOR LIBERACION AL CITOPLASMA Y NUCLEO DE LOS PPRHS MEDIANTE CHITOSAN, PROTAMINA, O NANOPARTICULAS, ASI MISMO SE UTILIZARAN APTAMEROS PARA DIRECCIONAR E INTERNALIZAR LOS PPRHS, III) A NIVEL DE OMICA SE ANALIZARA LA EXPRESION GENICA ASOCIADA A TOXICIDAD MEDIANTE PCR ARRAYS CON UNA BATERIA ESPECIFICA DE GENES DISEÑADA PARA TAL FIN EN LINEAS CELULARES HEPATICAS Y RENALES, MEDIANTE MICROARRAYS DE EXPRESION GENICA GLOBAL SE ANALIZARAN LOS EFECTOS POR UNA POSIBLE UNION A ZONAS INESPECIFICAS (OFF-TARGET), 2) APLICACIONES TERAPEUTICAS ESPECIFICAS DE PPRHS, I) EN LINEAS CELULARES DE LINFOMA SE DETERMINARA LA CITOTOXICIDAD DE PPRHS CONTRA BCL-2, DESNUDOS O VEHICULIZADOS, LAS MEJORES CONDICIONES SE ENSAYARAN EN COMBINACION CON QUIMIOTERAPICOS O ANTICUERPOS USADOS PARA LINFOMA, II) EN EL CAMPO DE LA INMUNOTERAPIA, SE ELEGIRAN COMO DIANAS DE PPRHS ESPECIFICOS CD47 Y PDL-1, PARA DISMINUIR LA SEÑAL DONT EAT ME DE CD47 O BIEN INHIBIR LA EXPRESION DE PD-L1 PARA ALTERAR LA VIA PD1/PD-L1 EN CELULAS TUMORALES Y LOGRAR UN ATAQUE EFICIENTE POR PARTE DE LOS MACROFAGOS, 3) UTILIZACION DE PPRHS EN REPARACION GENICA, I) SE EVALUARA LA CAPACIDAD DE LOS PPRHS PARA CORREGIR MUTACIONES PUNTUALES EN EL LOCUS ENDOGENO EN UNA COLECCION DE LINEAS CELULARES MUTANTES A NIVEL DEL GEN DIHIDROFOLATO REDUCTASA II) LA REPARACION MEDIANTE PPRHS SE APLICARA A CONTINUACION A MUTACIONES CAUSANTES DE FIBROSIS QUISTICA EN LA LINEA 6CFSMEO-, III) ASI MISMO, SE EXPLORARA LA CAPACIDAD DE LOS PPRHS DE CAUSAR EXON-SKIPPING UTILIZANDO COMO MODELO LAS CELULAS NB6, DHFR - POR DUPLICACION DEL EXON 2,, EL SALTO DE EXONES ESPECIFICOS MEDIANTE PPRHS DIRIGIDOS CONTRA ELEMENTOS ESENCIALES DEL EMPALMAMIENTO PODRIAN APLICARSE EN LA DISTROFIA MUSCULAR DE DUCHENNE, OLIGONUCLEÓTIDOS\PINZAS POLIPURINAS\LINFOMA\REPARACIÓN GÉNICA\DHFR\TERAPIA GÉNICA NO-VIRAL

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