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BIO2017-87190-R

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SECRECION DE ADN DE BACTERIAS A CELULAS DE MAMIFERO. ANALISIS DE SU PAPEL EN VIR...

SECRECION DE ADN DE BACTERIAS A CELULAS DE MAMIFERO. ANALISIS DE SU PAPEL EN VIRULENCIA Y SU POTENCIAL APLICACION TERAPEUTICA LOS SISTEMAS DE SECRECION TIPO IV (T4SS) BACTERIANOS TIENEN LA CAPACIDAD UNICA DE SECRETAR ADN, ADEMAS DE PROTEINAS COMO EL RESTO DE SISTEMAS DE SECRECION, SU VERSATILIDAD SE REFLEJA TAMBIEN EN EL DESTINO DE LAS MOLECULAS SECRETAD... ver más

01/01/2017

UNICAN

121K€

Presupuesto del proyecto: 121K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE CANTABRIA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 471

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2017-01-01 No tenemos la información de la convocatoria

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UNICAN

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD DE CANTABRIA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 471

Presupuesto del proyecto 121K€

Descripción del proyecto LOS SISTEMAS DE SECRECION TIPO IV (T4SS) BACTERIANOS TIENEN LA CAPACIDAD UNICA DE SECRETAR ADN, ADEMAS DE PROTEINAS COMO EL RESTO DE SISTEMAS DE SECRECION, SU VERSATILIDAD SE REFLEJA TAMBIEN EN EL DESTINO DE LAS MOLECULAS SECRETADAS, QUE PUEDE SER EL MEDIO EXTRACELULAR U OTRA CELULA, TANTO PROCARIOTA COMO EUCARIOTA, LA MAYORIA FORMAN PARTE DE SISTEMAS CONJUGATIVOS (CT4SS) O SECRETAN FACTORES DE VIRULENCIA EN BACTERIAS PATOGENAS (PT4SS), SU ROL ESENCIAL TANTO EN TRANSFERENCIA HORIZONTAL DE PLASMIDOS (INCLUYENDO DETERMINANTES DE RESISTENCIA A ANTIBIOTICOS) COMO EN VIRULENCIA DE PATOGENOS HUMANOS (LEGIONELLA PNEUMOPHILA, BRUCELLA SPP, HELICOBACTER PYLORI) LOS CONVIERTE EN ATRACTIVAS DIANAS PARA EL DESARROLLO DE NUEVOS ANTIMICROBIANOS, EN PROYECTOS ANTERIORES, EL GRUPO SOLICITANTE HA CONSEGUIDO ENVIAR ADN A CELULAS HUMANAS UTILIZANDO PT4SS DE DIVERSOS PATOGENOS HUMANOS, Y HA DEMOSTRADO QUE LA PROTEINA QUE ENTRA COVALENTEMENTE UNIDA A ESE ADN (LA RELAXASA CONJUGATIVA) POTENCIA SU INTEGRACION EN EL GENOMA HUMANO, ESTA CAPACIDAD UNICA LES CONVIERTE EN POTENCIALES HERRAMIENTAS DE MODIFICACION GENETICA IN VIVO CON TROPISMO CELULAR, ABRIENDO UN ENORME ABANICO DE POSIBILIDADES TERAPEUTICAS,EL OBJETIVO PRINCIPAL QUE SE PERSIGUE EN ESTE PROYECTO ES EL ESTUDIO DEL PROCESO DE TRANSFERENCIA DE ADN A CELULAS HUMANAS A TRAVES DE PT4SS DESDE DOS VERTIENTES DISTINTAS: UNA, ANALIZANDO SU POSIBLE PAPEL EN VIRULENCIA; Y DOS, DESARROLLANDO HERRAMIENTAS QUE APROVECHEN ESTA CAPACIDAD CON FINES TERAPEUTICOS, DE MODO MAS ESPECIFICO, LOS OBJETIVOS A CUMPLIR SON LOS SIGUIENTES:I) BUSQUEDA DE ADN BACTERIANO INTEGRADO EN EL GENOMA DE CELULAS INFECTADAS CON PATOGENOS CON PT4SS, SE PRETENDE IMITAR IN VITRO EL POSIBLE PROCESO IN VIVO DE TRANSFERENCIA E INTEGRACION DE ADN DE ORIGEN BACTERIANO EN EL GENOMA DE LA CELULA HUESPED, EL ANALISIS DE DICHO ADN PERMITIRA DETERMINAR SI LA PRESENCIA DEL PT4SS FAVORECE LA INTEGRACION, Y SI EL ADN INSERTADO ES ALEATORIO O ESPECIFICO,II) ESTUDIO DE LA TRANSFERENCIA DE ADN A CELULAS IB3 A TRAVES DEL T4SS PTW DE BURKHOLDERIA CENOCEPACIA, NUESTRO TRABAJO PREVIO HA DEMOSTRADO QUE DICHO SISTEMA MEDIA LA TRANSFERENCIA CONJUGATIVA DE ADN, PERO SU EXPRESION SE INDUCE AL ENTRAR EN CONTACTO CON LA CELULA HUMANA, POR LO QUE ES UN CANDIDATO IDONEO PARA DEMOSTRAR UN PAPEL IN VIVO DE LA TRANSFERENCIA DE ADN EN VIRULENCIA,III) DESARROLLO DE HERRAMIENTAS DE TRANSFERENCIA DE ADN IN VIVO A CELULAS HUMANAS ESPECIFICAS, BASADAS EN LA EXPRESION HETEROLOGA DE PT4SS EN BACTERIAS NO PATOGENAS, QUE POSTERIORMENTE PUEDAN SER MODIFICADAS PARA DIRIGIRSE A TIPOS CELULARES CONCRETOS,IV) COMBINAR LA ACTIVIDAD DE LA RELAXASA TRWC DE TRANSFERIR Y PROMOVER LA INTEGRACION DE ADN FORANEO, CON LA DE CPF1, UNA NUCLEASA ASOCIADA A CRISPR, QUE CATALIZA LA INTRODUCCION DE CORTES DE MANERA SITIO-ESPECIFICA, PRETENDEMOS UTILILZAR LOS PT4SS PARA INTRODUCIR LA NUCLEASA SIN NECESIDAD DE EXPRESAR EL GEN EN LA CELULA DIANA, CONTROLANDO ASI SU ACTIVIDAD OFF-TARGET, Y COMBINAR AMBAS ENZIMAS PARA CONSEGUIR UNA MEJOR EFICIENCIA Y ESPECIFICIDAD DE INTEGRACION SITIO-ESPECIFICA,COMO RESULTADO DE TODO ELLO, PRETENDEMOS POR UNA PARTE RESPONDER A LA PREGUNTA BIOLOGICA DE SI LOS PATOGENOS UTILIZAN SU CAPACIDAD DE ENVIAR ADN A SUS CEULAS HUESPED COMO PARTE DE SU ESTRATEGIA DE INFECCION; Y POR OTRA, EXPLOTAR ESTAS CAPACIDADES DE LAS BACTERIAS PARA OBTENER NUEVAS HERRAMIENTAS DE MODIFICACION GENETICA DE CELULAS HUMANAS, SISTEMAS DE SECRECIÓN TIPO IV\TRANSFERENCIA HORIZONTAL DE ADN\CONJUGACIÓN BACTERIANA\RELAXASA CONJUGATIVA\PATÓGENO INTRACELULAR\VIRULENCIA BACTERIANA\EDICIÓN GENÓMICA\TERAPIA GÉNICA\CRISPR-CAS

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