Fecha
Fin: 01/01/2021.
Objetivos
Objetivos del proyecto
ESTE SUBPROYECTO TIENE COMO OBJETIVO EL ESTUDIO DE LOS CAMBIOS QUE TIENEN LUGAR EN LAS FASES INICIALES DE LA PARATUBERCULOSIS EN EL INTESTINO (PRINCIPALMENTE EN PLACAS DE PEYER), EL PUNTO DONDE SE PRODUCE LA PRIMERA INTERACCION ENTRE EL HOSPEDADOR Y EL PATOGENO (MYCOBACTERIUM AVIUM SUBSP. PARATUBERCULOSIS -MAP-), Y LAS MODIFICACIONES INDUCIDAS POR LA VACUNACION, CON ESPECIAL ATENCION A PONER EN EVIDENCIA LA EXISTENCIA DE MECANISMOS DE INMUNIDAD E...
ESTE SUBPROYECTO TIENE COMO OBJETIVO EL ESTUDIO DE LOS CAMBIOS QUE TIENEN LUGAR EN LAS FASES INICIALES DE LA PARATUBERCULOSIS EN EL INTESTINO (PRINCIPALMENTE EN PLACAS DE PEYER), EL PUNTO DONDE SE PRODUCE LA PRIMERA INTERACCION ENTRE EL HOSPEDADOR Y EL PATOGENO (MYCOBACTERIUM AVIUM SUBSP. PARATUBERCULOSIS -MAP-), Y LAS MODIFICACIONES INDUCIDAS POR LA VACUNACION, CON ESPECIAL ATENCION A PONER EN EVIDENCIA LA EXISTENCIA DE MECANISMOS DE INMUNIDAD ENTRENADA, MEDIANTE LA DEMOSTRACION DE MECANISMOS DE REPROGRAMACION EPIGENETICA. ESTE SUBPROYECTO, REALIZADO POR EL GRUPO DE LA UNIVERSIDAD DE LEON, SE VA A CENTRAR EN LA ESPECIE OVINA. EN UN PRIMER EXPERIMENTO, SE VACUNARAN CON GUDAIR® (VACUNA INACTIVADA) CORDEROS EN CONDICIONES DE CAMPO Y SE REALIZARAN ENSAYOS FUNCIONALES PARA CARACTERIZAR MECANISMOS DE INMUNIDAD ENTRENADA EN MONOCITOS Y NEUTROFILOS DE SANGRE PERIFERICA. ADEMAS, SE ANALIZARA EL PAPEL QUE PUEDEN JUGAR LOS LONG NON-CODING RNA (LNCRNA) EN LA REPROGRAMACION EPIGENETICA ASOCIADA A LA VACUNACION, TAREA QUE LLEVARA A CABO ESTE SUBPROYECTO EN MUESTRAS DE CORDEROS Y TERNEROS (SUBPROYECTO 2), ASI COMO LA METILACION DE HISTONAS, MEDIANTE TECNICAS DE CHIPSEQ (TAREA REALIZADA POR EL SUBPROYECTO 2). EN UN SEGUNDO EXPERIMENTO, SE EMPLEARA UN MODELO DE ASAS INTESTINALES AISLADAS QUIRURGICAMENTE (INCLUYENDO TEJIDO LINFOIDE) EN CORDEROS VACUNADOS Y NO VACUNADOS. SE INFECTARAN TRES SEGMENTOS DE INTESTINO CON UNA CEPA OVINA, OTRA BOVINA DE MAP Y PBS COMO CONTROL NO INFECTADO, RESPECTIVAMENTE. A LAS 8H, 24H (29 DIAS POST-VACUNACION -DPV-) Y A LOS 3 H 28 DIAS POST-INFECCION (56 DPV) SE ESTUDIARAN MUESTRAS DE INTESTINO DE DICHAS ZONAS MEDIANTE METODOS HISTOLOGICOS E INMUNOHISTOQUIMICOS (REALIZADOS TANTO EN MUESTRAS DE CORDEROS COMO DE TERNEROS DEL SUBPROYECTO 2), PARA CARACTERIZAR LAS POBLACIONES CELULARES PRESENTES EN LA ZONA, PRINCIPALMENTE MACROFAGOS Y NEUTROFILOS, Y EVALUAR LAS MODIFICACIONES ASOCIADAS A LA INFECCION POR LAS DISTINTAS CEPAS DE MAP Y LA VACUNACION. ADEMAS, SE EVALUARAN LOS CAMBIOS DE REPROGRAMACION EPIGENETICA A NIVEL LOCAL, MEDIADOS POR LNCRNAS, MEDIANTE TECNICAS DE HIBRIDACION IN SITU, EMPLEANDO SONDAS FRENTE A GENES IDENTIFICADOS EN EL EXPERIMENTO 1 (EN MUESTRAS DE LOS SUBPROYECTOS 1 Y 2). TAMBIEN SE LLEVARA A CABO LA TECNICA CHIPSEQ EN MACROFAGOS AISLADOS DEL INTESTINO (SUBPROYECTO 2), ASI COMO ENSAYOS FUNCIONALES EN SANGRE PERIFERICA, A LOS 28 DPI (56 DPV). FINALMENTE, SE REALIZARAN ESTUDIOS DE TRANSCRIPTOMICA (RNASEQ) EN MUESTRAS DE INTESTINO PARA CONOCER LA EXPRESION DIFERENCIAL DE GENES A NIVEL LOCAL, ASOCIADA A LA INFECCION POR MAP O A LA VACUNACION. ICOBACTERIA\MACROPHAGES\MACROFAGOS\NEUTROFILOS\REPROGRAMACION EPIGENETICA\INMUNIDAD INNATA\INMUNIDAD ENTRENADA\VACUNACION\PARATUBERCULOSIS
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Ambito
Nacional: Se buscaba un proyecto en colaboración individual de ambito nacional.
Este proyecto fue tramitado con éxito!.