Descripción del proyecto
EL VIRUS DE LA NECROSIS NERVIOSA VIRAL (NNV), PERTENECIENTE AL GENERO BETANODAVIRUS, ES EL AGENTE ETIOLOGICO DE LA ENCEFALOPATIA Y RETINOPATIA VIRAL (VER), UNA DE LAS ENFERMEDADES VIRALES MAS IMPORTANTES EN LA ACUICULTURA MARINA DEL SUR DE EUROPA, EL GENOMA DEL NNV ESTA CONSTITUIDO POR DOS SEGMENTOS DE RNAMC, RNA1 Y RNA2, QUE CODIFICAN LA RNA-POLIMERASA RNA-DEPENDIENTE Y LA PROTEINA DE LA CAPSIDE (CP), RESPECTIVAMENTE, LOS BETANODAVIRUS SE CLASIFICAN EN 4 GENOTIPOS (SJNNV, TPNNV, RGNNV AND BFNNV) EN BASE A UNA PEQUEÑA SECUENCIA VARIABLE LOCALIZADA EN EL RNA2, SIN EMBARGO, EN EL SUR DE EUROPA SE HAN AISLADO RECOMBINANTES DE LOS TIPOS RGNNV Y SJNNV EN DIFERENTES ESPECIES DE PECES, DE HECHO, LAS CEPAS AISLADAS DE LENGUADOS Y DORADAS ENFERMOS EN LA PENINSULA IBERICA SON RECOMBINANTES CON UN SEGMENTO RNA1 DE TIPO RGNNV Y UN SEGMENTO RNA2 DE TIPO SJNNV, ESTAS CEPAS SON MUY VIRULENTAS PARA AMBAS ESPECIES DE PECES, MUCHO MAS QUE LAS CEPAS DE LOS GENOTIPOS RGNNV (PATOGENAS PARA LUBINAS) Y SJNNV (FRECUENTEMENTE DETECTADAS EN ANIMALES ASINTOMATICOS),NO EXISTEN TRATAMIENTOS EFECTIVOS PARA LAS INFECCIONES POR NNV, POR LO QUE NUMEROSOS ESTUDIOS SE HAN ENFOCADO EN EL DESARROLLO DE VACUNAS, ACTUALMENTE EXISTE UNA SOLA VACUNA CON LICENCIA EN EUROPA UTILIZADA EN LUBINAS PARA LA PROFILAXIS DE LAS INFECCIONES POR RGNNV, ASI COMO DIFERENTES VACUNAS FRENTE A CEPAS DE RGNNV Y SJNNV ANALIZADAS A NIVEL EXPERIMENTAL EN DISTINTAS ESPECIES DE PECES, SIN EMBARGO, SE HA CONSTATADO QUE NO EXISTE PROTECCION CRUZADA ENTRE DIFERENTES GENOTIPOS,EN EL PROYECTO COORDINADO QUE PRESENTAMOS SE VAN A PRODUCIR Y EVALUAR TRES VACUNAS DIFERENTES FRENTE A NNV (INACTIVADA, ATENUADA Y BASADA EN UN PLASMIDO DNA), DISEÑADAS CONTRA UNA CEPA ALTAMENTE VIRULENTA AISLADA DE LENGUADO, LA VACUNA DNA QUE VAMOS A PRODUCIR EN EL CURSO DE ESTE SUBPROYECTO SERA BICISTRONICA, CODIFICANDO TANTO PARA LA CP VIRICA (EL ANTIGENO PROTECTIVO) COMO PARA UN ADYUVANTE MOLECULAR, ESTO CONFERIRA A LOS PECES VACUNADOS UNA PROTECCION CONTRA LA INFECCION POR NNV SUPERIOR A LA CONFERIDA POR VACUNAS DNA CLASICAS, SIN ADYUVANTE,EL PRINCIPAL OBJETIVO DE LA PRESENTE PROPUESTA ES EVALUAR LA RESPUESTA INMUNE DE LENGUADO Y DORADA TRAS LA VACUNACION, EMPLEANDO LAS TRES VACUNAS INDICADAS Y DISTINTAS RUTAS DE ADMINISTRACION, LOS ANALISIS DE EXPRESION SE REALIZARAN UTILIZANDO UN SISTEMA OPENARRAY, QUE PERMITE EL ANALISIS SIMULTANEO DE UN AMPLIO ABANICO DE IMMUNOGENES, SE OBTENDRAN ASI PERFILES DE TRANSCRIPCION QUE SE RELACIONARAN CON LA EFICACIA DE LAS VACUNAS, IDENTIFICANDOSE MARCADORES INMUNES INDICATIVOS DE PROTECCION FRENTE A LA INFECCION, ADEMAS, SE ESTUDIARA LA CINETICA DE LA RESPUESTA DE PROTECCION INDUCIDA POR LA VACUNACION, DE FORMA QUE PODREMOS DETERMINAR EL TIEMPO NECESARIO PARA QUE APAREZCA INMUNIDAD EN LOS PECES VACUNADOS, ASI COMO LA DURACION DE LA MISMA TRAS LA ADMINISTRACION DE LA VACUNA, BETANODAVIRUS\VACUNA DNA\RESPUESTA INMUNE\OPENARRAY\PROTECCIÓN\LENGUADO\DORADA