Descripción del proyecto
EL ALMIDON ES LA PRINCIPAL FORMA DE RESERVA CARBONADA EN PLANTAS SUPERIORES, EL INTERES DE ESTE POLIMERO DE RESERVA SE DEBE A LA GRAN CANTIDAD EN QUE SE PRODUCE, A LA UNIVERSALIDAD DE SU DISTRIBUCION, SU UTILIZACION ALIMENTARIA Y SU GRAN IMPORTANCIA COMERCIAL, EL PASO LIMITANTE Y REGULADO DE LA SINTESIS DE ALMIDON ESTA CATALIZADO POR LA ADP-GLUCOSA PIROFOSFORILASA (ADPGPPASA), EN ESTE PROYECTO SE PROPONE DETERMINAR LA CONTRIBUCION DE LAS DIFERENTES ISOFORMAS DE ADPGPPASA A LA SINTESIS DE ALMIDON EN ARABIDOPSIS THALIANA, SE GENERARAN Y CARACTERIZARAN DOBLES Y TRIPLES MUTANTES DE LOS GENES QUE CODIFICAN PARA ADPGPPASA, DE ESPECIAL INTERES SERA DETERMINAR LA CONTRIBUCION DE LAS ISOFORMAS APL1 Y APL2 A LA SINTESIS DE ALMIDON, YA QUE RECIENTEMENTE HEMOS DEMOSTRADO QUE POSEEN CAPACIDAD CATALITICA, SE PROPONE, ASIMISMO, EXPRESAR EN E, COLI DE LAS DIFERENTES ISOFORMAS DE ADPGPPASA PARA SU PURIFICACION A HOMOGENEIDAD, SU CARACTERIZACION BIOQUIMICA, ESTUDIO DE INTERACCIONES ENTRE DIFERENTES ISOFORMAS Y OBTENCION DE ANTICUERPOS ESPECIFICOS DE CADA ISOFORMA, CONSIDERANDO QUE LA SACAROSA Y OTROS AZUCARES REGULAN, ENTRE OTROS PROCESOS, LA SINTESIS DE ALMIDON, SE CARACTERIZARAN LOS ENZIMAS SACAROSA FOSFATO SINTASA (SPS) Y SACAROSA FOSFATO FOSFATASA (SPP) RESPONSABLES DE LA SINTESIS DE SACAROSA, EN ARABIDOPSIS THALIANA EXISTEN 4 ISOFORMAS DE CADA UNA DE ESTAS DOS ENZIMAS, POR ELLO, SE DETERMINARA EL PATRON DE EXPRESION DE LOS DIFERENTES GENES QUE LAS CODIFICAN, SE ESTUDIARA EL CONTROL POR LUZ Y CIRCADIANO DE LOS MISMOS, ASI COMO LA POSIBLE INTERACCION ENTRE SPS Y SPP,SE PROPONE PROFUNDIZAR EN LA REGULACION POR AZUCARES DE LA SINTESIS DE ALMIDON MEDIANTE LA IDENTIFICACION DE FACTORES QUE MEDIEN EL CONTROL POR AZUCARES DE LA TRANSCRIPCION DE LOS GENES APL3 Y APL4 MEDIANTE UN ACERCAMIENTO PROTEOMICO FINALMENTE, SE ESTUDIARA EL PAPEL DEL ALMIDON, A NIVEL CUANTITATIVO, SOBRE LA RESPUESTA GRAVITROPICA Y PLAGIOTROPICA Y SOBRE LOS FLUJOS DE AUXINAS Y MODIFICACIONES DEL CITOESQUELETO PRODUCIDAS POR GRAVIESTIMULACION, Almidón\Sacarosa\ADP-glucosa Pirofosforilasa\Sacarosa Fosfato Sintasa\Regulación\Gravitropismo\proteómica de núcleos