REGULACION POSTRADUCCIONAL DE LA SINTESIS DE FENILALANINA EN PLANTAS
EN ESTE PROYECTO ABORDAMOS LA BIOSINTESIS EN PLANTAS DE AMINOACIDOS AROMATICOS CON ESPECIAL ENFOQUE EN LA PHE, UN AMINOACIDO DE FUNDAMENTAL IMPORTANCIA COMO PILAR DE PROTEINAS Y PRECURSOR DE NUMEROSOS E IMPORTANTES PRODUCTOS NATUR...
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Descripción del proyecto
EN ESTE PROYECTO ABORDAMOS LA BIOSINTESIS EN PLANTAS DE AMINOACIDOS AROMATICOS CON ESPECIAL ENFOQUE EN LA PHE, UN AMINOACIDO DE FUNDAMENTAL IMPORTANCIA COMO PILAR DE PROTEINAS Y PRECURSOR DE NUMEROSOS E IMPORTANTES PRODUCTOS NATURALES, COMO PIGMENTOS, ALCALOIDES, HORMONAS Y LIGNINA. LA SINTESIS DE PHE REQUIERE UNA REGULACION PRECISA QUE GARANTICE EL ADECUADO APORTE DE PRECURSORES PARA LA SINTESIS DE COMPUESTOS DERIVADOS NATURALES. SE HAN DESCRITO DIVERSOS MECANISMOS REGULADORES A NIVEL TRANSCRIPCIONAL, O POR METABOLITOS, PERO NO EXISTE INFORMACION SOBRE SU REGULACION A NIVEL POSTRADUCCIONAL (PTM), A PESAR DE LA EVIDENCIA INDIRECTA DE SU EXISTENCIA. EN ESTE PROYECTO, EL OBJETIVO CENTRAL ES IDENTIFICAR LA INFLUENCIA QUE LAS FOSFORILACIONES PUEDEN TENER SOBRE EL FLUJO METABOLICO DE LA BIOSINTESIS DE PHE Y COMPUESTOS DERIVADOS UTILIZANDO ARABIDOPSIS COMO ESPECIE MODELO. LAS ENZIMAS INVOLUCRADAS EN LA VIA BIOSINTETICA DE PHE, ASI COMO SUS MECANISMOS REGULADORES, SE ENCUENTRAN ALTAMENTE CONSERVADAS EN PLANTAS, SUGIRIENDO FUERTEMENTE QUE EL CONOCIMIENTO GENERADO EN ESTE PROYECTO PUEDE SER TRANSFERIDO A PLANTAS CON UN INTERES ECONOMICO Y BIOTECNOLOGICO DIRECTO.PARA LOGRAR LOS OBJETIVOS ESPERADOS, SE HAN PROPUESTO UNA SERIE DE EXPERIMENTOS ENFOCADOS EN LA IDENTIFICACION DE EVENTOS DE FOSFORILACION QUE PUEDAN SERVIR COMO DIANAS PARA ESTUDIOS DE INGENIERIA METABOLICA EN EL FUTURO. PARA ELLO, SE REALIZARA UN ESTUDIO UTILIZANDO EXPRESION TRANSITORIA EN PROTOPLASTOS Y POSTERIOR IDENTIFICACION DE FOSFOPROTEINAS MEDIANTE LA TECNICA PHOS-TAG SDS-PAGE. ESTAS PROTEINAS SE ANALIZARAN MEDIANTE LC-MS / MS PARA DETERMINAR LOS SITIOS DE FOSFORILACION ESPECIFICOS. A PARTIR DE LOS CRITERIOS DE PRIORIZACION RECOGIDOS EN LA PROPUESTA, SE ANALIZARAN LOS EVENTOS DE FOSFORILACION DE MAYOR POTENCIAL RELEVANCIA MEDIANTE ESTUDIOS EN PLANTAS. UTILIZANDO LA TECNOLOGIA CRISPR / CAS9, SE OBTENDRAN PLANTAS MODIFICADAS MEDIANTE LA INTRODUCCION DE MUTACIONES FOSFOMIMETICAS Y FOSFO-NULAS PARA DETERMINAR EL POSIBLE EFECTO DE EVENTOS DE FOSFORILACION SELECCIONADOS. EN ESTAS PLANTAS, LAS POSIBLES CONSECUENCIAS FENOTIPICAS Y METABOLICAS SE DETERMINARAN MEDIANTE MULTIPLES ANALISIS. A PARTIR DE ESTE ENFOQUE, LAS MODIFICACIONES ESPECIFICAS QUE GENEREN IMPORTANTES EFECTOS METABOLICOS SERAN OBJETO DE UNA SERIE DE ESTUDIOS UTILIZANDO ENFOQUES EN LOS QUE SE CONSIDERARAN ASPECTOS RELACIONADOS CON LA ESTABILIDAD PROTEICA, LA CARACTERIZACION CINETICA O LA LOCALIZACION SUBCELULAR.FINALMENTE, ESTIMAMOS QUE EL PROYECTO TIENE EL POTENCIAL DE GENERAR IMPORTANTES RESULTADOS RELACIONADOS CON EL CONTROL METABOLICO EN PLANTAS, QUE PUEDEN SER PUBLICADOS EN REVISTAS DE ALTO NIVEL. ADICIONALMENTE, CONSIDERAMOS QUE LOS RESULTADOS QUE ESTE PROYECTO GENERE PUEDEN SER DE INTERES PARA FUTUROS TRABAJOS QUE ABORDEN APLICACIONES BIOTECNOLOGICAS EN PLANTAS DE INTERES AGRONOMICO. ENILALANINA\BIOPRODUCTOS\BIOTECNOLOGIA\FOSFORILACION\REGULACION POSTRADUCCIONAL\AMINOACIDOS AROMATICOS
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