Descripción del proyecto
EL DESARROLLO VEGETAL DEPENDE DE LA INTERACCION DE MULTIPLES RUTAS BIOQUIMICAS Y LA COORDINACION DE NUMEROSOS PROCESOS EN LOS QUE PARTICIPAN DIFERENTES PROTEINAS, AUN CONOCIENDO EL GENOMA DE DIVERSAS ESPECIES, ESTAMOS LEJOS DE CONOCER LA FUNCION DE TODAS LAS PROTEINAS QUE ACTUAN EN EL DESARROLLO DE UNA PLANTA, NUESTRA HIPOTESIS DE PARTIDA ES QUE LA DETERMINACION DE LA FUNCION CONCRETA DE LAS PROTEINAS QUE ACTUAN SOBRE UN DETERMINADO PROCESO NOS PERMITIRA ENTENDERLO Y POR TANTO CONTROLARLO,EL OBJETIVO DE ESTE PROYECTO ES DETERMINAR LA FUNCION EN EL DESARROLLO DE 2 FAMILIAS DE PROTEINAS: BETA-GALACTOSIDASAS Y PROTEINAS ST, CARACTERIZADAS Y ESTUDIADAS POR NUESTRO GRUPO EN CICER ARIETINUM, RELACIONADAS CON EL DESARROLLO DE ESTA PLANTA Y QUE SE ENCUENTRAN POSIBLEMENTE EN LA PARED CELULAR, PARTIENDO DE ESTAS PROTEINAS, PARA ALCANZAR NUESTRO OBJETIVO, UTILIZAREMOS PLANTAS MODELO: ARABIDOPSIS THALIANA Y MEDICAGO TRUNCATULA PARA EL ESTUDIO DE LAS PROTEINAS STS, TIPICAS DE LEGUMINOSAS, SU UTILIZACION EVITARA LOS PROBLEMAS DEL ESTUDIO EN GARBANZO, ESPECIE RECALCITRANTE DIFICIL DE TRANSFORMAR GENETICAMENTE, LO QUE DIFICULTA EL USO DE ABORDAJES MOLECULARES AVANZADOS,EL ESTUDIO DE LAS BETA-GALACTOSIDASAS SE REALIZARA CON LAS 4 BETA-GAL DE GARBANZO Y CON LAS 6 ATBGALS DE LA SUBFAMILIA A1 DE A, THALIANA, ELEGIDAS POR SU SIMILITUD CON LAS DE GARBANZO Y SU POSIBLE ACCION EN LA PARED CELULAR, ESTABLECEREMOS LA FUNCION ESPECIFICA DE CADA UNA DE ELLAS EN LA PARED CELULAR Y SU EFECTO EN EL DESARROLLO, ANALISIS EN MUTANTES SENCILLOS DE LOS MIEMBROS DE LA SUBFAMILIA A1 NOS INDICAN LA EXISTENCIA DE FENOMENOS DE REDUNDANCIA FUNCIONAL, POR LO QUE EN ESTE PROYECTO SE ABORDARA EL ANALISIS DE DOBLES Y TRIPLES MUTANTES, ASIMISMO, SE UTILIZARAN PLANTAS TRANSGENICAS DE ARABIDOPSIS QUE SOBREEXPRESAN CADA UNO DE LOS SEIS GENES DE LA SUBFAMILIA A1, EL ESTUDIO COMPARATIVO DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN LAS DOS ESTRATEGIAS NOS PERMITIRA DESCIFRAR LAS FUNCIONES DE LAS BETA-GALACTOSIDASAS, EL ANALISIS DE LA MORFOLOGIA DE LA PLANTA, LOS CAMBIOS EN LAS PAREDES CELULARES Y EL ESTUDIO ANATOMICO A NIVEL TISULAR, DETERMINARA LA IMPLICACION DIRECTA DE LAS BETA-GALACTOSIDASAS EN LA DIFERENCIACION O MODIFICACION DE TIPOS CELULARES CONCRETOS, UNA ULTIMA PARTE EN NUESTRO OBJETIVO IMPLICA DETERMINAR SUS ACTIVIDADES ENZIMATICAS Y SUS SUSTRATOS IN VIVO,EL ESTUDIO DE LAS PROTEINAS ST SE ABORDARA CON LAS 2 ST DE GARBANZO Y CON LA FAMILIA DE 6 ST DE M, TRUNCATULA, LEGUMINOSA MODELO DE LA QUE SE CONOCE LA SECUENCIA GENOMICA Y DE LA QUE EXISTEN METODOS PARA SU TRANSFORMACION GENICA Y SU REGENERACION, SU UTILIZACION ES NECESARIA DADO QUE LAS STS NO EXISTEN EN ARABIDOPSIS Y ALGUNAS DE LAS FUNCIONES PROPUESTAS PARA ELLAS, COMO MICORRIZACION, NO TIENEN LUGAR EN ARABIDOPSIS, PARA ESTABLECER SU FUNCION SE DETERMINARA SU LOCALIZACION SUBCELULAR, LA ACUMULACION DE TRANSCRITOS Y LA ACTIVIDAD DE LOS PROMOTORES DE CADA UNO DE LOS GENES, FINALMENTE SE TRATARA DE ANULAR LA PRODUCCION DE LAS PROTEINAS ST DE M, TRUNCATULA MEDIANTE LA CONSTRUCCION DE PLANTAS TRANSGENICAS QUE INDUZCAN LA RNAI O EL ANALISIS DE MUTANTES KNOCKOUT,EL ESTABLECIMIENTO DE LA FUNCION DE ESTAS PROTEINAS, MEDIANTE NUEVOS ABORDAJES MOLECULARES CON PLANTAS MODELO, JUSTIFICA EL PROYECTO Y ES SUMAMENTE IMPORTANTE TANTO DESDE EL PUNTO DE VISTA BASICO (ENTENDER LA FUNCION DE LAS PROTEINAS, PERMITIRA ENTENDER EL DESARROLLO VEGETAL) COMO APLICADO (CONOCER SU FUNCION PERMITIRA MODIFICAR EL PROCESO DE DESARROLLO Y LA PRODUCCION VEGETAL) ARABIDOPSIS\ DESARROLLO\ ESTRÉS ABIÓTICO\ BETA-GALACTOSIDASAS\ GARBANZO\ INTERACCIONES BIÓTICAS\ LEGUMINOSAS\ MEDICAGO TRUNCATULA\ PARED CELULAR\ PROTEÍNAS ST