Descripción del proyecto
LAS GIBERELINAS (GAS) PARTICIPAN EN LA REGULACION DE NUMEROSOS PROCESOS EN LA VIDA DE UNA PLANTA, SIN EMBARGO, LA SEÑALIZACION DE GAS SE BASA UNICAMENTE EN UN CONJUNTO LIMITADO DE ELEMENTOS DE SEÑALIZACION ESPECIFICOS DE ESTA RUTA PARA CONTROLAR ESTA COLECCION TAN AMPLIA DE PROCESOS CELULARES (3 RECEPTORES DE GA Y 5 PROTEINAS DELLA EN ARABIDOPSIS, PERO INCLUSO MAS REDUCIDO EN OTRAS ESPECIES VEGETALES), ¿COMO SE CONSIGUE ENTONCES ESTA MULTIPLICIDAD DE FUNCIONES? NUESTRA HIPOTESIS ES QUE EL RESULTADO DE SEÑALIZACION POR GAS DEPENDE DEL CONTEXTO QUE RODEA A LAS PROTEINAS DELLA: (1) EL TIPO CELULAR EN EL QUE SE EXPRESAN, Y (2) EL CONJUNTO DE PROTEINAS DISPONIBLES CON LAS QUE INTERACCIONAR, POR SUPUESTO, AMBOS ASPECTOS ESTAN INTERRELACIONADOS, PUESTO QUE TIPOS CELULARES DISTINTOS CONTIENEN COLECCIONES DIFFERENTES DE PROTEINAS, EL OBJETIVO FINAL DE ESTE PROYECTO ES ENTENDER COMO LAS PROTEINAS DELLA DE ARABIDOPSIS PUEDEN EJERCER DISTINTAS FUNCIONES CELULARES DEPENDIENDO DE LAS PROTEINAS CON LAS QUE INTERACCIONAN, Y DEL TIPO CELULAR EN EL QUE ACTUAN, PARA ESTUDIAR ESTOS DOS ASPECTOS, PROPONEMOS LOS SIGUIENTES OBJETIVOS PARCIALES: (1) EL ANALISIS DE FUNCIONES DE LA SEÑALIZACION DE GAS DEPENDIENTES DEL INTERACTOR, ESTA SECCION PRETENDE DETERMINAR EXPERIMENTALMENTE LA RELEVANCIA FISIOLOGICA DE LA INTERACCION FISICA ENTRE LA PROTEINA DELLA GAI Y TRES NUEVOS PARTNERS IDENTIFICADOS POR NOSOTROS: SALT TOLERANCE (STO), PREFOLDIN5 (PFD5) Y ARABIDOPSIS RESPONSE REGULATOR1 (ARR1), PARTE DE ESTE OBJETIVO REQUERIRA LA BUSQUEDA DE ALELOS ¿EDGETICOS¿ DE GAI QUE IMPIDAN SELECTIVAMENTE CADA UNA DE LAS INTERACCIONES POR SEPARADO, (2) EL ANALISIS DE FUNCIONES DE LA SEÑALIZACION DE GAS QUE SON ESPECIFICAS DEL TIPO CELULAR, PARA CONSEGUIR ESTE OBJETIVO SE LLEVARAN A CABO TRES TAREAS: (I) LA MANIPULACION DEL DOMINIO ESPACIAL DEL LUGAR DE SINTESIS Y DE SEÑALIZACION DE GAS, ACOMPAÑADA POR EL ANALISIS DE LOS EFECTOS SOBRE EL FENOTIPO RELACIONADO CON GAS; (II) UN RASTREO DE ¿ENHANCER TRAP¿ PARA IDENTIFICAR NUEVOS PAPELES ESPECIFICOS DE TEJIDO PARA LA SEÑALIZACION POR GAS; Y (III) EL ANALISIS DEL ESTADO TRANSCRIPCIONAL ESPECIFICO DE TIPO CELULAR EN RESPUESTA A GAS, EXAMINANDO EL TRANSCRIPTOMA DE LA ENDODERMIS Y LA EPIDERMIS POR SEPARACION DE NUCLEOS Y ANALISIS DE OCUPACION DE RNA POLIMERASA II,