Descripción del proyecto
EN EL ANTERIOR PROYECTO AFUNP HEMOS IDENTIFICADO, CARACTERIZADO Y PRODUCIDO MEDIANTE BIOTECNOLOGIA UNA SERIE DE NUEVAS PROTEINAS ANTIFUNGICAS (AFPS) DE ORIGEN FUNGICO, LAS CUALES ESTAN CONSIDERADAS COMO UNA ALTERNATIVA MUY PROMETEDORA A LOS FUNGICIDAS CONVENCIONALES, LAS AFPS SON PROTEINAS DE PEQUEÑO TAMAÑO, CATIONICAS, RICAS EN CISTEINA (CRP) Y PUENTES DISULFURO Y CON UNA ESTRUCTURA EXTREMADAMENTE ESTABLE QUE FACILITA SU PRODUCCION BIOTECNOLOGICA, AFUNP DESARROLLO UN CASETE DE DNA Y UN SISTEMA PARA LA PRODUCCION EFICIENTE DE AFPS EN HONGOS FILAMENTOSOS, BASADO EN EL GEN PAF DE P, CHRYSOGENUM Y EL SISTEMA MODULAR DE CLONAJE FUNGALBRAID (FB), ESTE SISTEMA NOS PERMITIO IDENTIFICAR, PRODUCIR Y CARACTERIZAR NUEVAS AFPS Y CRPS, ENTRE ELLAS, LA PDAFPB DE P, DIGITATUM, LAS PEAFPA, PEAFPB Y PEAFPC DE P, EXPANSUM, Y AFPS QUIMERA DISEÑADAS RACIONALMENTE, LA PDAFPB Y LA RECIENTEMENTE DESCRITA PEAFPA SON PROTEINAS EXTREMADAMENTE ACTIVAS INCLUSO FRENTE AL PROPIO HONGO DE ORIGEN, ADEMAS, SE DECIDIO PATENTAR PEAFPA DADO QUE INHIBE EFICAZMENTE EL CRECIMIENTO DE HONGOS PATOGENOS (VEGETALES Y HUMANOS) Y MICOTOXIGENICOS Y ES CAPAZ DE CONTROLAR ENFERMEDADES DE PLANTAS Y PODREDUMBRES POSTCOSECHA, LOS ESTUDIOS SOBRE EL MECANISMO DE ACCION DE PDAFPB INDICAN QUE SE INTERNALIZA EN LAS CELULAS FUNGICAS Y QUE LA SINTESIS DE QUITINA, LA MANOSILACION DE PROTEINAS DE LA PARED CELULAR Y LAS RUTAS DE SEÑALIZACION DE MAPK ESTAN IMPLICADAS EN LA RESPUESTA Y LA SUSCEPTIBILIDAD DE LAS CELULAS FUNGICAS A ESTA PROTEINA, SIN EMBARGO, NO SE PUDIERON ABORDAR ESTUDIOS SIMILARES CON LA PEAFPA DEBIDO A SU RECIENTE IDENTIFICACION,ESTE SUBPROYECTO, INTEGRADO EN AFUNPLUS, PROPONE APROVECHAR E IMPLEMENTAR LOS RESULTADOS PREVIOS DE AFUNP A TRAVES DE LOS SIGUIENTES OBJETIVOS ESPECIFICOS: I) EL DISEÑO Y LA PRODUCCION EN HONGOS FILAMENTOSOS DE NUEVAS AFPS NATURALES Y QUIMERICAS MEDIANTE LA IMPLEMENTACION DE UN CASETE DE DNA (EXPAFP) BASADO EN EL GEN AFPA Y LA TECNOLOGIA FB, APLICABLE A DIFERENTES ESPECIES DE HONGOS, ENTRE ELLAS ESPECIES RECONOCIDAS COMO SEGURAS (GRAS); II) LA CARACTERIZACION ESTRUCTURAL Y FUNCIONAL DE PEAFPA MEDIANTE LA ELUCIDACION DE SU ESTRUCTURA POR CRISTALOGRAFIA DE RAYOS X Y LA PRODUCCION DE VARIANTES DE SECUENCIA, ASI COMO PROFUNDIZAR EN SU ACTIVIDAD ANTIFUNGICA EVALUANDO SU EFICACIA EN MODELOS MURINOS DE INFECCION FUNGICA SISTEMICA; III) EL ESTUDIO DEL MODO DE ACCION ANTIFUNGICO DE PEAFPA SOBRE P, DIGITATUM Y S, CEREVISIAE MEDIANTE ANALISIS TRANSCRIPTOMICO Y LA GENERACION DE MUTANTES CON SENSIBILIDAD ALTERADA; IV) LA EVALUACION DE LA INHIBICION DE LA PRODUCCION DE MICOTOXINAS POR AFPS; Y V) EL USO DE AFPS EN EL CONTROL DE PODREDUMBRES POSTCOSECHA, ESTE SUBPROYECTO SE COORDINA EN AFUNPLUS CON EL SUBPROYECTO 2 (CRAG), QUE PRODUCIRA LA PEAFPA MEDIANTE EL SISTEMA DE PRODUCCION TRANSITORIA EN PLANTAS DESARROLLADO EN AFUNP PARA ABORDAR LA CARACTERIZACION CELULAR DEL MODO DE ACCION DE PEAFPA, ESTUDIARA LA ACTIVIDAD DE SEÑALIZACION Y EXPLORARA LA EFECTIVIDAD DE LAS AFPS COMO POTENCIALES MOLECULAS ANTICANCERIGENAS, EL PROYECTO COORDINADO AFUNPLUS TIENE COMO OBJETIVO AVANZAR EN LA APLICACION FINAL DE LAS AFPS EN PROTECCION DE CULTIVOS Y EN CONSERVACION POSTCOSECHA, Y TAMBIEN EN EL AMBITO BIOMEDICO Y AGROALIMENTARIO, LO QUE GENERARA UN GRAN IMPACTO SOCIOECONOMICO, PROTEÍNAS ANTIFÚNGICAS\HONGOS FILAMENTOSOS\BIOTECNOLOGÍA DE HONGOS\PLANTAS BIOFACTORÍA\PATOLOGÍA POSTCOSECHA\PROTECCIÓN DE CULTIVOS\DEFENSA DE PLANTAS\PENICILLIUM\MICOTOXINAS\FITOPATÓGENOS