Descripción del proyecto
LOS HONGOS FILAMENTOSOS SON FUNDAMENTALES PARA LA PRODUCCION A ESCALA INDUSTRIAL DE UNA GRAN CANTIDAD DE BIOMOLECULAS USADAS EN MEDICINA Y ALIMENTACION, PERO TAMBIEN SUPONEN UN RIESGO PARA LA SALUD Y LA SEGURIDAD ALIMENTARIA, LO QUE UNIDO A LA ESCASEZ DE ANTIMICOTICOS GENERA LA NECESIDAD URGENTE DE IDENTIFICAR, DESARROLLAR Y COMERCIALIZAR NUEVOS ANTIFUNGICOS CON MODOS DE ACCION DIFERENTES A LOS YA CONOCIDOS. LAS PROTEINAS ANTIFUNGICAS (AFPS) SON ALTERNATIVAS PROMETEDORAS A LOS FUNGICIDAS CONVENCIONALES. LAS AFPS SON PROTEINAS CATIONICAS RICAS EN CISTEINA, CONTIENEN ENLACES DISULFURO Y SE PLIEGAN EN ESTRUCTURAS ESTABLES QUE PERMITEN SU EFICIENTE PRODUCCION BIOTECNOLOGICA. EN EL PROYECTO PREVIO AFUNPLUS (RTI2018-101115-B-C21), EL EQUIPO INVESTIGADOR CONTRIBUYO A LA CARACTERIZACION DE LAS TRES AFPS DE P. EXPANSUM (PEAFPA, PEAFPB Y PEAFPC) Y DEMOSTRO SU PERFIL ESPECIFICO DE ACTIVIDAD. PEAFPA DESTACO POR SU POTENCIA ANTIFUNGICA, FALTA DE CITOTOXICIDAD Y EFECTO PROTECTOR FRENTE A FITOPATOGENOS RELEVANTES EN PROTECCION DE CULTIVOS Y CONSERVACION POSTCOSECHA. POR ELLO, ESTOS RESULTADOS SE PROTEGIERON CON DOS PATENTES (PCT/ES2019/070388, PROTEINA ANTIFUNGICA Y USOS DE LA MISMA Y OEPM P201830609, METODOS PARA EL CONTROL BIOLOGICO DE INFECCIONES PRODUCIDAS POR FITOPATOGENOS EN PLANTAS Y CULTIVOS). EN AFUNPLUS TAMBIEN CONTRIBUIMOS AL DESARROLLO DE SISTEMAS DE EXPRESION Y BIOFACTORIAS FUNGICAS GRAS PARA LA PRODUCCION DE AFPS. ESTOS SISTEMAS DE EXPRESION SE ADAPTARON AL SISTEMA DE CLONAJE MODULAR FUNGALBRAID (FB), BASADO EN HERRAMIENTAS DE BIOLOGIA SINTETICA, PARA FACILITAR LA CLONACION DIRECTA DE GENES AFP, LO QUE PERMITE ALCANZAR RENDIMIENTOS DE ENTRE DECENAS Y CENTENAS DE MG DE AFP PURA POR LITRO DE CALDO DE CULTIVO. ADEMAS, EL DISEÑO RACIONAL DE VARIANTES PEAFPB::PEAFPA NOS PERMITIO SELECCIONAR LA PROTEINA QUIMERICA V1 QUE COMBINA LOS RENDIMIENTOS DE PRODUCCION DE PEAFPB CON LA ACTIVIDAD ANTIFUNGICA DE PEAFPA FRENTE A FITOPATOGENOS DE RELEVANCIA ECONOMICA COMO P. DIGITATUM, P. EXPANSUM Y B. CINEREA. FINALMENTE, DEMOSTRAMOS QUE P. CHRYSOGENUM ES UNA BIOFACTORIA EFICIENTE Y SEGURA PARA LA PRODUCCION TANTO DE PEAFPA COMO DE V1 A ESCALA DE LABORATORIO.ESTE PROYECTO DE PRUEBA DE CONCEPTO DERIVA DE AFUNPLUS Y LA PATENTE PCT/ES2019/070388. LA BASE DE AFP@SCALE SON NUESTRAS CEPAS DE P. CHRYSOGENUM QUE PRODUCEN PEAFPA Y V1 CORRECTAMENTE PROCESADAS Y ACTIVAS. EL OBJETIVO DE AFP@SCALE ES CONVERTIR ESTAS CEPAS EN BIOFACTORIAS RENTABLES Y SOSTENIBLES PARA PROMOVER EL DESARROLLO DE AFPS COMO NUEVOS BIOFUNGICIDAS CON APLICACION EN LA CONSERVACION POSTCOSECHA. PARA ELLO, AFP@SCALE OPTIMIZARA LA PRODUCCION DE PEAFPA Y V1 A ESCALA DE BIORREACTOR UTILIZANDO LAS CEPAS YA DISPONIBLES. ADEMAS, AFP@SCALE VERIFICARA LA EFICACIA DE LAS AFPS PURAS Y DE LOS SOBRENADANTES ENRIQUECIDOS EN DICHAS PROTEINAS, QUE SON MAS VIABLES ECONOMICAMENTE, PARA EL CONTROL DE ENFERMEDADES POSTCOSECHA EN UNA PLANTA PILOTO DE ENVASADO DE FRUTOS CITRICOS. LOS RESULTADOS ESPERADOS, DOS NUEVOS BIOFUNGICIDAS, SON INNOVADORES Y DIFERENTES CON RESPECTO A LOS ANTIMICOTICOS EXISTENTES Y SU POTENCIAL COMERCIAL SERA EVALUADO POR UNA CONSULTORA EXTERNA. AFP@SCALE IMPULSARA LA INNOVACION Y LOS BENEFICIOS ECONOMICOS DEL SECTOR DE FUNGICIDAS Y AGROALIMENTARIO. AFP@SCALE AVANZARA DESDE LA INVESTIGACION EN EL LABORATORIO (TRL1-4) HASTA LA DEMOSTRACION A ESCALA PILOTO (TRL4-5), YENDO MAS ALLA DE LA FRONTERA TRL4 QUE SEPARA LA INVESTIGACION EN LABORATORIO DE LOS DATOS OBTENIDOS EN UN ENTORNO INDUSTRIAL.