PRODUCCION Y CARACTERIZACION DE MODELOS TRANSGENICOS DE ESPECIES SIN CASOS NATUR...
PRODUCCION Y CARACTERIZACION DE MODELOS TRANSGENICOS DE ESPECIES SIN CASOS NATURALES DESCRITOS DE ENCEFALOPATIAS ESPONGIFORMES TRANSMISIBLES
CON EL OBJETIVO DE IDENTIFICAR LOS DETERMINANTES O BASES MOLECULARES DE LA BARRERA DE TRANSMISION EN LAS ENFERMEDADES PRIONICAS SE GENERARAN MODELOS DE RATONES TRANSGENICOS QUE EXPRESEN LA PRPC DE ESPECIES EN LAS CUALES NO SE HAN...
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Descripción del proyecto
CON EL OBJETIVO DE IDENTIFICAR LOS DETERMINANTES O BASES MOLECULARES DE LA BARRERA DE TRANSMISION EN LAS ENFERMEDADES PRIONICAS SE GENERARAN MODELOS DE RATONES TRANSGENICOS QUE EXPRESEN LA PRPC DE ESPECIES EN LAS CUALES NO SE HAN DESCRITO CASOS DE ENFERMEDADES PRIONICAS DE FORMA NATURAL IN VIVO: ORYCTOLAGUS, CANIS, Y GALLUS, ESTE SUBPROYECTO CENTRARA SU ACTIVIDAD EN LA GENERACION DE LOS MENCIONADOS MODELOS MEDIANTE MICROINYECCION PRONUCLEAR, ESTABLECIENDO LINEAS TRANSGENICAS PARA CADA UNA DE LAS 3 CONSTRUCCIONES PROPUESTAS ORYCTOLAGUSPRP, CANISPRP Y GALLUS PRP, PARA IMPEDIR LA INTERFERENCIA DE LA PRP ENDOGENA MURINA SE ESTABLECERAN LAS LINEAS EN UN FONDO GENETICO KNOCK OUT PARA LA PRP MURINA (MOPRP) DISPONIBLE EN NUESTRAS INSTALACIONES, HASTA LLEGAR A ESTABLECER NUCLEOS DE CRIA DE ANIMALES CON GENOTIPO MOPRP0/0 Y HOMOCIGOTES PARA EL TRANSGEN CORRESPONDIENTE,UNA VEZ ESTABLECIDAS LAS LINEAS, SE CREARA UN BANCO DE EMBRIONES Y ESPERMATOZOIDES PARA GARANTIZAR LA DISPONIBILIDAD DE ESTAS PARA LA COMUNIDAD CIENTIFICADE LAS MISMASESTOS MODELOS TRANSGENICOS SERAN UTILIZADOS POR EL EQUIPO DEL OTRO SUBPROYECTO LIDERADO POR EL DR ENRIC VIDAL PARA LA INOCULACION EXPERIMENTAL DE DE PRIONES INFECCIOSOS GENERADOS IN VITRO, MEDIANTE LA TECNICA DE AMPIFICACION CICLICA DEL MALPLEGAMIENTO PROTEICO (EN INGLES PROTEIN MISFOLDING CYCLIC AMPLIFICATION, PMCA), A PARTIR DE HOMOGENADOS NORMALES DE CEREBRO DE ESPECIES EN LAS CUALES NO SE HAN DESCRITO CASOS DE ENFERMEDADES PRIONICAS DE FORMA NATURAL IN VIVO: ORYCTOLAGUS, CANIS, Y GALLUS, CON DOS ESTRATEGIAS DIFERENTES: A) GENERANDO LOS PRIONES DE NOVO O B) UTILIZANDO COMO SEMILLA PRPSC DE DIFERENTES ESPECIES (EEB Y SCRAPIE), LOS NUEVOS PRIONES OBTENIDOS TANTO DE FORMA IN VITRO COMO DESPUES DE SU REPLICACION EN LOS MODELOS BIOLOGICOS, SE EVALUARAN EN RELACION A SU INFECTIVIDAD EN OTROS MODELOS DE INTERES GANADERO Y MEDICO, PARA ELLO SE UTILIZARAN MODELOS MURINOS TRANSGENICOS QUE EXPRESEN PRP OVINA, BOVINA, Y HUMANA PARA DETERMINAR EL RIESGO QUE CONFIEREN LOS NUEVOS PRIONES GENERADOS EN ESPECIES DE INTERES PUBLICO, LOS RESULTADOS DE LAS INOCULACIONES PERDITIRAN DILUCIDAR LA INFLUENCIA DE LA SECUENCIA PRIMARIA DE LA PRP EN LA CAPACIDAD DE TRANSMISION DE LOS PRIONES prion\transgenico\EET\conejo\perro\gallina\resistencia natural\barrera específica
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