Descripción del proyecto
LA REPRODUCCION SEXUAL ES UN PROCESO COMPLEJO QUE IMPLICA LA FORMACION Y PARTICIPACION DE DOS CELULAS ALTAMENTE ESPECIALIZADAS QUE SON LOS GAMETOS QUE DARA LUGAR A UN CIGOTO CON SU PROPIA IDENTIDAD GENETICA, EN EL CASO DE LOS MAMIFEROS, DE REPRODUCCION INTERNA, LA FECUNDACION Y EL DESARROLLO EMBRIONARIO PREIMPLANTACIONAL SE PRODUCE EN UN CONDUCTO ESPECIALIZADO DENOMINADO OVIDUCTO (O TROMPA DE FALOPIO), EL ESCLARECIMIENTO DE LOS MECANISMOS QUE ESTAN IMPLICADOS EN LA FORMACION DE GAMETOS, RECONOCIMIENTO ENTRE GAMETOS, FECUNDACION, INTERACCION CON EL OVIDUCTO DE LOS GAMETOS Y EMBRIONES PREIMPLANTACIONALES ES DE GRAN RELEVANCIA CIENTIFICA, TECNOLOGICA, CLINICA Y SOCIAL, PARA LA CONSECUCION DE ESTOS OBJETIVOS NOS PLANTEAMOS UN ABORDAJE NOVEDOSO COMO ES EL USO DE LA TECNOLOGIA CRISPR-CAS9 EN LA CONEJA, ESTA TECNOLOGIA NOS PERMITE GENERAR ANIMALES KNOCK-OUT (KO) AL IMPEDIR LA EXPRESION DE UN GEN FUNCIONAL, ESTA APROXIMACION EXPERIMENTAL APORTA UNA DE LAS EVIDENCIAS CIENTIFICAS MAS ROBUSTAS Y FIABLES, ASI, DESDE HACE UNOS AÑOS EL CONOCIMIENTO EN EL CAMPO DE LA REPRODUCCION SE HA VISTO PROFUNDAMENTE MODIFICADO DEBIDO AL USO DE ANIMALES KO, LA TECNOLOGIA CRISPR-CAS9 PERMITE GENERAR KO EN OTROS ANIMALES QUE NO SEAN EL RATON DE UN MODO EFICIENTE Y SE HA DESARROLLADO RECIENTEMENTE EN LA CONEJA, EN EL PRESENTE PROYECTO VAMOS A UTILIZAR EL CONEJO COMO ANIMAL EXPERIMENTAL PUESTO QUE TIENE UNAS CARACTERISTICAS REPRODUCTIVAS QUE EN ALGUNOS ASPECTOS SON MUY DIFERENTES AL DEL RATON Y PARECIDAS A OTRAS ESPECIES DE ANIMALES DOMESTICOS COMO LA CERDA, VACA, GATA, PERRA E INCLUSO LA ESPECIE HUMANA, ASI, LA CONEJA PRESENTA UNA ZONA PELUCIDA (ZP) QUE RODEA AL OVULO COMPUESTA POR 4 PROTEINAS INCLUYENDO LA PROTEINA ZP4 QUE NO SE ENCUENTRA EN EL RATON (ZP1, ZP2 Y ZP3), ADEMAS, EXISTEN DATOS CONTRADICTORIOS EN BIBLIOGRAFIA EN RELACION AL PAPEL BIOLOGICO DESEMPEÑADO POR OVGP1 QUE ES LA PROTEINA MAS ABUNDANTE SECRETADA POR EL EPITELIO OVIDUCTAL, ASI, OVGP1 TIENE UNA ALTA AFINIDAD POR LA ZP DE OVOCITOS DE CONEJA, VACA, CERDA E INCLUSO LA ESPECIE HUMANA; SIN EMBARGO, EN EL RATON ESTA PROTEINA TIENE UNA ESCASA AFINIDAD POR LA ZP, EN EL PRESENTE PROYECTO QUEREMOS ANALIZAR MEDIANTE EL USO DE ANIMALES KO EL PAPEL JUGADO POR DOS PROTEINAS DE LA ZP (ZP1 Y ZP4) EN UN MODELO DE ZP CON 4 PROTEINAS Y EL PAPEL JUGADO POR OVGP1, EN ESTE PROYECTO SE UTILIZARAN ADEMAS OTRAS TECNOLOGIAS PUNTERAS COMO SON DE ANALISIS PROTEOMICO, EXPRESION GENICA (MICROMATRICES Y PCR) ADEMAS DE MICROSCOPIA CONFOCAL Y ELECTRONICA ENTRE OTRAS, LOS POTENCIALES RESULTADOS OBTENIDOS NOS APORTARAN UNA INFORMACION DE GRAN RELEVANCIA ACERCA DE LOS MECANISMOS IMPLICADOS DE UN MODO GENERAL EN LA FECUNDACION, ESTA INFORMACION SERA CLAVE PARA EL DESARROLLO DE NUEVAS METODOLOGIAS DE DIAGNOSTICO DE INFERTILIDAD, CALIDAD ESPERMATICA, SELECCION ESPERMATICA Y MEJORA DE MEDIOS DE CULTIVOS PARA LA FECUNDACION IN VITRO PARA AUMENTAR LA EFICIENCIA DE LAS TECNICAS DE REPRODUCCION ASISTIDA, ADEMAS, ESTA INFORMACION PUEDE SER CLAVE PARA EL DESARROLLO DE VACUNAS ANTICONCEPTIVAS MAS EFICIENTE PARA EL CONTROL DE POBLACIONES DE ANIMALES SALVAJES CON UN IMPORTANTE IMPACTO SOCIAL, ECOLOGICO Y ECONOMICO, FERTILIDAD\ZONA PELÚCIDA\FECUNDACIÓN\OVIDUCTO\EMBRIONES\OOCITO