Descripción del proyecto
LA REPLICACION DEL DNA EN EUCARIOTAS SE INICIA EN REGIONES DE LOS CROMOSOMAS QUE SE DENOMINAN ORIGENES DE REPLICACION (ORI) A LAS QUE SE UNEN COMPLEJOS PROTEICOS QUE COORDINAN LA SINTESIS DEL DNA CON LOS DEMAS PROCESOS DEL CICLO CELULAR, UNA PROPIEDAD IMPORTANTE DE LOS ORIS EUCARIOTICOS ES LA AUSENCIA DE SECUENCIAS CONSERVADAS NO SOLO ENTRE ESPECIES PROXIMAS SINO INCLUSO ENTRE LOS ORIS DE UN MISMO GENOMA, ESTA CARACTERISTICA DIFICULTA SU IDENTIFICACION Y APUNTA A LA POSIBLE PARTICIPACION DE ELEMENTOS EPIGENETICOS EN SU ESPECIFICACION, EN PROYECTOS PREVIOS, HEMOS IDENTIFICADO QUE LOS ORIS EN LA LEVADURA SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE Y EN CELULAS HUMANAS COLOCALIZAN CON REGIONES GENOMICAS CON UNA COMPOSICION MUY ELEVADA EN A+T O EN C+G, RESPECTIVAMENTE, EN COMPARACION CON EL PROMEDIO GENOMICO EN AMBOS ORGANISMOS, EN ESTE PROYECTO ESTUDIAREMOS LA ESPECIFICACION, EL MECANISMO DE INICIACION Y LA EVOLUCION DE LOS ORIS TANTO DESDE EL PUNTO DE VISTA DEL DNA COMO DEL DE LAS PROTEINAS QUE DESCODIFICAN LA INFORMACION CONTENIDA EN ESAS REGIONES DEL GENOMA, UN SEGUNDO ASPECTO QUE ABORDAREMOS SERA LA IMPLICACION DE LA MAQUINARIA DE REPLICACION Y DEL PROPIO PROCESO DE REPLICACION EN OTROS PROCESOS INDEPENDIENTES DE LA DUPLICACION DE LOS CROMOSOMAS, ESTOS INCLUYEN EL MANTENIMIENTO DE LA HETEROCROMATINA Y EL SILENCIAMIENTO TRANSCRIPCIONAL EN REGIONES ESPECIALIZADAS DEL GENOMA DE S, POMBE Y EL MANTENIMIENTO NO METILADO DE LAS ISLAS CPG EN EL GENOMA HUMANO Y DE RATON, PARA LA CONSECUCION DE ESTOS OBJETIVOS UTILIZAREMOS COMO SISTEMAS MODELO MUTANTES Y CEPAS MANIPULADAS GENETICAMENTE DE S, POMBE, LINEAS CELULARES HUMANAS Y FIBROBLASTOS PRIMARIOS DE RATON, DESDE EL PUNTO DE VISTA TECNICO, USAREMOS HERRAMIENTAS GENETICAS, BIOQUIMICAS Y BIOINFORMATICAS Y ANALISIS GLOBALES DE INMUNOPRECIPITACION DE CROMATINA E HIBRIDACION DE MICROARRAYS GENOMICOS, Replicación de DNA\cromatina\islas CpG\transcripción\recombinación\Schizosaccharomyces pombe