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PGC2018-097260-B-I00

Financiado

NUEVAS APLICACIONES DEL SISTEMA CRISPR-CAS IN VIVO PARA IDENTIFICAR FACTORES INV...

NUEVAS APLICACIONES DEL SISTEMA CRISPR-CAS IN VIVO PARA IDENTIFICAR FACTORES INVOLUCRADOS EN EL DESARROLLO TEMPRANO DE VERTEBRADOS LA TRANSICION MATERNO-CIGOTICA (TMC) ES UN PROCESO UNIVERSAL QUE OCURRE EN TODOS LOS ANIMALES E IMPLICA LA ACTIVACION, MEDIADA POR EL MATERIAL MATERNO EN EL OOCITO, DE UN GENOMA CIGOTICO QUIESCENTE Y QUE POSTERIORMENTE INICIARA LA... ver más

01/01/2018

UPO

116K€

Presupuesto del proyecto: 116K€

Líder del proyecto

UNIVERSIDAD PABLO DE OLAVIDE, DE SEVILLA No se ha especificado una descripción o un objeto social para esta compañía.

Total investigadores 3

Financiación concedida El organismo AGENCIA ESTATAL DE INVESTIGACIÓN notifico la concesión del proyecto el día 2018-01-01

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Participantes

UPO

Lider

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Líder del proyecto

UNIVERSIDAD PABLO DE OLAVIDE, DE SEVILLA

Total investigadores 3

Presupuesto del proyecto 116K€

Descripción del proyecto LA TRANSICION MATERNO-CIGOTICA (TMC) ES UN PROCESO UNIVERSAL QUE OCURRE EN TODOS LOS ANIMALES E IMPLICA LA ACTIVACION, MEDIADA POR EL MATERIAL MATERNO EN EL OOCITO, DE UN GENOMA CIGOTICO QUIESCENTE Y QUE POSTERIORMENTE INICIARA LA ELIMINACION DEL DICHO PROGRAMA MATERNO ADOPTANDOSE UN ESTADIO DE PLURIPOTENCIALIDAD EMBRIONARIA, LA TMC ES, DE HECHO, UN PROCESO DE REPROGRAMACION CELULAR IN VIVO, SI BIEN SE HAN DESCUBIERTO ALGUNOS FACTORES MATERNOS REQUERIDOS PARA LA ACTIVACION DEL GENOMA CIGOTICO (AGC), EXISTEN CIENTOS DE ARNS DEPOSITADOS EN EL OOCITO CUYO PAPEL DURANTE LA TCM ES DESCONOCIDO, EL PEZ CEBRA ES UN SISTEMA IDEAL PARA ESTUDIAR ESTA TRANSICION TEMPRANA EN EMBRIOGENESIS, YA QUE TIENE UN DESARROLLO EXTERNO Y RAPIDO Y UNA CLARIDAD OPTICA QUE PERMITE UN ANALISIS VISUAL SENCILLO, POR OTRO LADO, LOS SISTEMAS DE KNOCKDOWN MEDIANTE EL USO DE SIRNA HAN POSIBILITADO LA EVALUACION DE LA FUNCION DE LOS GENES EN DIFERENTES SISTEMAS BIOLOGICOS, DADO QUE LOS SIRNAS RESULTAN POCO EFECTIVOS EN EL PEZ CEBRA, SE HAN EMPLEADO SISTEMAS ALTERNATIVOS DE KNOCKDOWN COMO LOS MORFOLINOS, QUE HAN CONTRIBUIDO PARCIALMENTE A DILUCIDAR EL PAPEL DEL MATERIAL MATERNO EN EL DESARROLLO TEMPRANO, SIN EMBARGO, EL ELEVADO PRECIO, LA TOXICIDAD Y LA FALTA DE FIABILIDAD DE ESTA TECNICA HA IMPEDIDO SU USO PARA LLEVAR A CABO ESCRUTINIOS FUNCIONALES, ALTERNATIVAMENTE, EL RECIENTEMENTE DESCRITO SISTEMA CRISPR-CAS13 SE HA USADO PARA DEGRADAR ARN EN CELULAS DE MAMIFERO, POR LO TANTO ADAPTAR LA TECNOLOGIA CRISPR-CAS13 PARA SU USO EN MODELOS ANIMALES SERIA DE UNA GRAN UTILIDAD, EN ESTA PROYECTO, LOS OBJETIVOS SON: I) OPTIMIZAR EL SISTEMA CRISPR-CAS13 IN VIVO UTILIZANDO PEZ CEBRA COMO ORGANISMO MODELO Y II) REALIZAR UNA ESCRUTINIO FUNCIONAL EMPLEANDO ESTE SISTEMA PARA ELIMINAR LA EXPRESION DE LOS ARNS DEPOSITADOS POR VIA MATERNA, LOS ARNM DIANA EN EL ESCRUTINIO SE SELECCIONARAN BASANDOSE EN DIFERENTES CRITERIOS TALES COMO SU TASA DE TRADUCCION DURANTE EL DESARROLLO TEMPRANO O SU INTERACCION CON FACTORES IMPLICADOS EN AGC, ESTE PROYECTO CONLLEVARA UNA SERIE DE AVANCES EN BIOTECNOLOGIA Y BIOLOGIA DEL DESARROLLO Y EMBRIOLOGIA: 1) EL ESCRUTINIO IDENTIFICARA NUEVOS FACTORES NECESARIOS PARA LA TMC QUE APORTARA UNA VALIOSA INFORMACION SOBRE LOS DIVERSOS PROCESOS MOLECULARES REQUERIDOS DURANTE ESTE EVENTO BIOLOGICO PROPORCIONANDO, ASIMISMO, UN MEJOR ENTENDIMIENTO DE LA PLURIPOTENCIALIDAD EMBRIONARIA Y LA REPROGRAMACION CELULAR, 2) LA OPTIMIZACION DE UN SISTEMA DE ELIMINACION DE ARN IN VIVO SUPONDRA UN NOVEDOSO AVANCE TECNOLOGICO EN EL PEZ CEBRA Y OTROS MODELOS ANIMALES CON MULTIPLES APLICACIONES QUE ABRIRAN NUEVAS VIAS DE INVESTIGACION EN UNA AMPLIA GAMA DE CUESTIONES BIOLOGICAS, FINALMENTE, SE HA SUGERIDO QUE CAMBIOS EN LA ESTRUCTURA DE LA CROMATINA Y EN LA ACCESIBILIDAD DEL GENOMA DURANTE LA TMC PUEDEN REGULAR EL INICIO DE AGC EN VERTEBRADOS, COMO TERCER OBJETIVO, SE GENERARAN, USANDO CRISPR-CAS9, MUTANTES EN REGIONES DEL DNA CON UNA POTENCIAL CAPACIDAD REGULADORA DEL AGC EN EL PEZ CEBRA, CON EL FIN DE PROFUNDIZAR EN COMO EL GENOMA SE VUELVE COMPETENTE PARA SER TRANSCRITO DESPUES DEL "SILENCIO EMBRIONARIO" INICIAL, DESCUBRIR NUEVOS MECANISMOS MOLECULARES QUE GUIAN LA REPROGRAMACION CELULAR IN VIVO NO SOLO CONTRIBUIRA A ACLARAR PROCESOS TAN COMPLEJOS COMO LA TCM Y LA PLURIPOTENCIALIDAD EMBRIONARIA, SINO QUE TAMBIEN DILUCIDARA UNA CUESTION CENTRAL EN BIOLOGIA: COMO LA REGULACION GENICA INDUCE LOS CAMBIOS A GRAN ESCALA QUE CONTROLAN EN ULTIMO TERMINO LA IDENTIDAD CELULAR, CRISPR-CAS\ARN\DESARROLLO TEMPRANO\VERTEBRADOS\PEZ CEBRA\ACTIVACIÓN CIGÓTICA\GENÉTICA\REPROGRAMACIÓN CELULAR

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